超声波辅助提取苹果叶多酚及其体外抗氧化性研究

论文摘要

苹果叶为蔷薇科植物苹果（Malus pumila Mill.）的叶,主要分布在我国的陕西、山西、河北、山东等地。2009年,陕西省苹果的种植面积为847.4万亩,苹果叶的数量也相当可观。苹果多酚具有抗氧化、清除自由基、抑制微生物、抗病毒、抗肿瘤、防治心血管疾病等作用。为了充分利用苹果叶资源,本文研究了超声波辅助提取苹果叶多酚的技术条件,并对提取物进行了体外抗氧化性研究和HPLC分析,主要取得以下结果:1.苹果叶中黄酮物质的最佳提取条件为:乙醇浓度20%,液料比51:1,温度65℃,超声波功率600W,提取时间20min,提取两次,在此条件下黄酮得率为1.98%。2.苹果叶中多酚物质的最佳提取条件为:乙醇浓度20%,液料比40:1,温度75℃,超声波功率600W,提取时间20min,提取两次,在此条件下多酚得率达4.20%,纯度为10.07%,其中根皮苷的含量为6.18%,占总多酚的61.36%。苹果叶中根皮苷的含量为2.45%。3. X-5树脂对苹果叶多酚有较好的吸附和解吸效果。X-5树脂纯化苹果叶多酚的条件为:上柱液浓度3.658mg/mL、上柱液pH3、上柱量5BV,吸附流速2.0mL/min;以40%的乙醇为解吸剂,洗脱流速1.0mL/min,洗脱体积4BV。在此条件下苹果叶提取物中多酚的纯度提高到38.55%,其中根皮苷的含量为32.84%,占总多酚的85.16%。X-5树脂对苹果叶多酚的吸附为放热过程,属于优惠吸附,吸附过程符合Langmuir等温吸附模型和Freundlich等温吸附模型。4. Sephadex LH-20精制苹果叶多酚时,用80%的乙醇进行洗脱,得到的精制物中多酚纯度为52.02%,其中根皮苷的含量为47.61%,占总多酚的91.51%。5.苹果叶多酚提取物具有一定的体外抗氧化性。对·OH和的O2-·清除能力显著强于茶多酚,还原力与茶多酚相当,对DPPH和NO2-的清除能力比茶多酚弱;经过X-5树脂纯化后,对DPPH和NO2-的清除能力和还原能力有所增强,对·OH和O2-·的清除能力稍有减弱。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 苹果叶概述
• 1.2 植物多酚研究概述
• 1.2.1 植物多酚的定义及分类
• 1.2.2 植物多酚的生物活性
• 1.2.3 植物多酚的应用
• 1.3 苹果多酚概述
• 1.3.1 苹果多酚简介
• 1.3.2 苹果多酚的生理功能
• 1.4 植物多酚的提取方法
• 1.4.1 溶剂提取法
• 1.4.2 超声波提取法
• 1.4.3 微波提取法
• 1.4.4 超高压提取法
• 1.4.5 超临界流体萃取技术
• 1.5 植物多酚的分离纯化
• 1.5.1 大孔吸附树脂吸附法
• 1.5.2 羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱
• 1.6 本研究的目的、意义和内容
• 1.6.1 目的与意义
• 1.6.2 试验内容
• 第二章 超声波辅助提取苹果叶多酚、黄酮技术研究
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 试剂
• 2.1.3 仪器和设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 标准曲线的制作
• 2.2.2 苹果叶中多酚和黄酮的提取与得率的测定
• 2.2.3 单因素试验
• 2.2.4 中心组合试验
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 标准曲线的制作
• 2.3.2 单因素试验结果
• 2.3.3 中心组合试验结果
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 第三章 大孔吸附树脂纯化苹果叶多酚技术研究
• 3.1 试验材料
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 试剂
• 3.1.3 仪器和设备
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 苹果叶多酚粗提物的制备
• 3.2.2 多酚含量的测定
• 3.2.3 树脂的预处理
• 3.2.4 静态吸附试验
• 3.2.5 静态解吸试验
• 3.2.6 苹果叶多酚在所选树脂上的等温吸附研究
• 3.2.7 动态吸附解吸试验
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 不同树脂的筛选
• 3.3.2 X-5 树脂的静态吸附解吸试验
• 3.3.3 X-5 树脂的动态吸附解吸试验
• 3.4 讨论
• 3.5 小结
• 第四章 苹果叶提取物的体外抗氧化性研究
• 4.1 试验材料
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 试剂
• 4.1.3 仪器与设备
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 苹果叶提取物对DPPH 的清除作用
• 4.2.2 苹果叶提取物对·OH 的清除作用
• 2^-·的清除作用'>4.2.3 苹果叶提取物对O₂^-·的清除作用
• 2^-的清除作用'>4.2.4 苹果叶提取物对NO₂^-的清除作用
• 4.2.5 苹果叶提取物的还原能力
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 苹果叶提取物对DPPH 的清除作用
• 4.3.2 苹果叶提取物对·OH 的清除作用
• 2^-·的清除作用'>4.3.3 苹果叶提取物对O₂^-·的清除作用
• 2^-的清除作用'>4.3.4 苹果叶提取物对NO₂^-的清除作用
• 4.3.5 苹果叶提取物的还原能力
• 4.4 讨论
• 4.5 小结
• 第五章 苹果叶多酚Sephadex LH-20 精制和HPLC 分析
• 5.1 试验材料
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 试剂
• 5.1.3 仪器与设备
• 5.2 试验方法
• 5.2.1 Sephadex LH-20 精制苹果叶多酚
• 5.2.2 HPLC 分析
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 两种洗脱方式的比较
• 5.3.2 HPLC 分析苹果叶多酚成分
• 5.4 讨论
• 5.5 小结
• 第六章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介