寒冷高盐致大鼠主动脉及肾脏损害

论文摘要

【目的】探讨寒冷、高盐和寒冷与高盐复合刺激对大鼠血压的影响及主动脉和肾脏的损害。【方法】雄性SD大鼠32只,体重250-300克,随机分为4组（n=8）：1.对照组：常规喂养；2.寒冷组：常规喂养,每天置于5℃人工气候箱4小时；3.高盐组：含8%食盐饲料喂养；4.复合组：同时接受8%食盐饲料和冷刺激。为期8周。于实验前1周开始测量血压,每周2次,每次读数3次,取它们的平均值为该周血压,并计算SBP曲线下面积（SBP-AUC）。于实验第3天、4周末、8周末将大鼠用代谢笼收集24小时尿液,测定尿微量白蛋白（mALB）、视黄醇结合蛋白（RBP）、钠（Na+）和钾（K+）浓度,计算24h尿mALB、RBP、Na+和K+排出量。8周后,于颈总动脉处插管取血离心后获得血清,解剖出主动脉及肾脏。ELISA法测定大鼠血清内皮素-1（ET-1）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的浓度。HE染色于光镜观察主动脉结构的改变,并测量主动脉管腔内径及内中膜厚度,计算内中膜厚度/管腔内径。枸橼酸铅电子染色于电镜观察主动脉内皮细胞的改变。RT-PCR法测定主动脉ET-1和内皮素A型受体（ETAR）mRNA的表达及肾脏血管紧张素1型受体（AT1R）及血管紧张素2型受体（AT2R）mRNA的表达。【结果】1.SBP变化高盐组大鼠1周时SBP升高,7周时达高峰；寒冷组3周时升高,5周时达高峰；复合组1周时SBP升高,5周时达高峰,且明显高于其他两组。实验期间寒冷组、高盐组和复合组SBP-AUC均明显高于对照组（871.23±52.54、866.43±56.22、938.64±52.90 vs 777.60±26.68 mmHg.w,P<0.01）,以复合组最高,寒冷组与高盐组之间无明显差异。2.血清中ET-1和AngⅡ浓度寒冷组、高盐组及复合组血清ET-1浓度（13.56±2.25、11.90±1.94、16.5±1.79 vs 9.32±1.59pg/ml,P<0.01）及AngⅡ浓度（574.4±63.2、502.2±82.4、624.3±85.5 vs 455.6±72.1pg/ml,P<0.01）均明显高于对照组,复合组最高,寒冷组次之。3.大鼠主动脉重构及ET-1和ETAR mRNA表达光镜示：寒冷组、高盐组和复合组主动脉内中膜厚度较对照组明显增厚,内中膜厚度/管腔内径也明显增高。复合组表现最为明显,且复合组平滑肌细胞间质出现明显黏液样变性。电镜示各干预组内皮细胞出现明显的水肿、空泡变性,部分变性坏死的内皮细胞与基底膜剥离,复合组表现尤为明显。各干预组主动脉的ET-1及ETAR mRNA表达均明显高于对照组,复合组最高,寒冷组与高盐组之间无明显差异。4.各组大鼠24h尿mALB, RBP, Na+和K+排出量的比较4周时各组24h尿mALB排出量无显著差异,但3个干预组24h尿RBP排出量均高于对照组；8周时各干预组24h尿mALB排出量均高于对照组,且寒冷组明显高于高盐组（5.4±0.9 vs 4.4±0.8 mg,P<0.05）,而24h尿RBP排出量却明显低于高盐组（71.5±20.1 vs 86.9±9.7μg,P<0.05）24h尿Na+和K+排出量及Na+/K+比值随着干预时间的延长均呈递增趋势。8周时,寒冷组、高盐组、复合组24h尿Na+排出量均明显高于对照组（5.38±0.45、46.61±3.80、60.61±4.77 vs 2.39±0.39mmol,P<0.01）。寒冷组24h尿K+排出量与对照组相比无明显区别,而高盐组和复合组明显高于寒冷组及对照组（4.60±0.45、5.48±0.85 vs 1.52±0.27mmol、1.21±0.42mmol,P<0.01）。5.肾脏中AT1R及AT2R mRNA的表达寒冷组、高盐组及复合组肾脏中AT1RmRNA表达明显高于对照组（0.48±0.01、0.33±0.02、1.16±0.04 vs 0.04±0.01,P<0.01）,而AT2R mRNA表达明显低于对照组（0.38±0.02,0.44±0.04、0.30±0.02 vs 0.80±0.06,P<0.01）。【结论】1.寒冷、高盐刺激均能引起血压升高、主动脉结构和肾脏功能损害,二者复合刺激导致的损害更为明显。复合刺激致内皮素和RAAS的激活程度与主动脉结构和肾脏功能损害程度相关。2.寒冷更容易导致肾小球功能损害,原因可能与肾组织AT,R表达上调更明显有关；高盐更易导致肾小管功能损害,原因可能与肾脏排钠负荷更重有关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 第2章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 动物及实验室
• 2.1.2 主要仪器
• 2.1.3 主要试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 动物分组
• 2.2.2 鼠尾SBP的测量
• 2.2.3 血清ET-1和AngⅡ浓度的检测
• 2.2.4 主动脉光镜标本制作
• 2.2.5 主动脉电镜标本制作
• +和K⁺排出量的测定'>2.2.6 24小时尿mALB、RBP、Na⁺和K⁺排出量的测定
• AR和肾脏AT₁R、AT₂RmRNA的表达'>2.2.7 主动脉ET-1、ET_AR和肾脏AT₁R、AT₂RmRNA的表达
• 2.3 统计学方法
• 第3章 实验结果
• 3.1 血压变化
• 3.2 血清ET-1和AngⅡ浓度比较
• AR mRNA表达'>3.3 主动脉重构及ET-1、ET_AR mRNA表达
• 3.3.1 各组大鼠主动脉内中膜厚度、内中膜厚度/管腔内径比较
• 3.3.2 各组大限主动脉电镜结果比较
• AR mRNA表达比较'>3.3.3 主动脉ET-1和ET_AR mRNA表达比较
• +和K⁺排出量比较'>3.4 各组大鼠24小时尿mALB、RBP、Na⁺和K⁺排出量比较
• +和K⁺浓度比较'>3.4.1 各组大鼠24小时尿mALB、RBP、Na⁺和K⁺浓度比较
• 3.4.2 各组大鼠24小时尿mALB和RBP排出量
• +和K⁺排出量'>3.4.3 各组大鼠24小时尿Na⁺和K⁺排出量
• 1R及AT₂R mRNA表达变化'>3.5 肾脏AT₁R及AT₂R mRNA表达变化
• 第4章 讨论
• 4.1 寒冷和高盐对血压的影响
• 4.2 寒冷和高盐对主动脉重构的影响
• 4.3 寒冷和高盐对肾功能的影响
• 第5章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间的研究成果
• 附带综述