多糖水解酶论文-张静超

多糖水解酶论文-张静超

导读:本文包含了多糖水解酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:铜绿假单胞菌,胞外多糖水解酶,细菌显微追踪技术,生物被膜

多糖水解酶论文文献综述

张静超[1](2018)在《胞外多糖水解酶对铜绿假单胞菌运动特性及其生物被膜的影响》一文中研究指出铜绿假单胞菌是在医院引起感染的最常见病原菌之一。在免疫缺陷及囊胞性纤维症患者中,铜绿假单胞菌定殖人体肺部会引起慢性炎症,致使肺功能逐渐丧失,最终导致患者呼吸衰竭甚至死亡。与浮游生物相比,生物被膜中的细菌抗生素抗性明显增加,抗免疫能力增强。细菌生物被膜形成的标志是菌体被胞外基质包围,胞外基质(EPS)由胞外多糖,脂肪酸,胞外DNA和蛋白质等混合物组成,其中胞外多糖是EPS的主要成分。铜绿假单胞菌至少产生叁种不同的胞外多糖:藻酸盐,Pel和Psl,这叁种多糖决定着生物被膜结构的稳定性,在生物膜发展过程中发挥着不同的作用。本研究利用细菌显微追踪技术在单细胞水平上研究了胞外多糖水解酶PslG与PelA对细菌运动及其生物被膜的影响。PslG是Psl合成过程中的周质蛋白。添加PslG后细菌运动明显加快,运动速度提高到原来4-5倍,运动范围扩大,细菌处于无限制状态;细菌运动无明确方向,轨迹曲折,轨迹面积覆盖效率提高;此外,细菌需要两倍多的时间来形成生物被膜。关于Psl结构及作用也已有一定的研究,但我们对Pel的结构仍知之甚少,其具体功能还尚未明确。我们发现了PelA对铜绿假单胞菌细菌表面运动特性以及生物被膜形成的具体作用,我们观察到PelA在单细胞水平上对铜绿假单胞菌初期粘附的表面运动也有着一定的影响,对生物膜的形成有一定的抑制作用;在形成生物被膜后期添加PelA,出现较明显的生物被膜降解现象。同时,为了达到更好的生物被膜降解效果,我们同时添加PslG、PelA,明显看到已经形成生物被膜的解离现象,这个现象可看做生物被膜形成的逆过程。多个因素共同作用可以达到更好的抑制生物被膜的效果。(本文来源于《天津大学》期刊2018-05-01)

刘璐,汪声晨,彭文舫,翟超,易犁[2](2017)在《Massilia eurypsychrophila 709的鉴定、基因组测序及几种多糖水解酶产生情况分析》一文中研究指出低温酶以其在工业生产中无需额外的能源提升反应体系的温度而受到关注,在造纸,纺织,洗涤及食品加工行业均有应用前景。本研究对中国南极科考队采自极地的136株细菌在低温条件下(20℃)进行底物平板法筛选,发现一株来自于南极阿斯曼丘陵的杆菌能够产生甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶等多糖水解酶。该菌株菌落呈深红色,圆形凸起,边缘整齐,在100倍光学显微镜下为短杆菌。将测序结果与GenBank中已有细菌的序列进行比对,比对结果表明,与Massilia eurypsychrophila具有98.32%的同源性,相似性最高。为了挖掘该菌中的几种多糖水解酶基因,对其进行了全基因组测序,序列分析表明Massiliaeurypsychrophila 709含有两个α-淀粉酶基因,一个木聚糖酶基因,一个可聚糖酶基因。通过对淀粉酶基因的比对,发现其与来源于糖丝菌属Saccharothrix sp.ALI-22-I中的糖苷水解酶具有42%的同源性。在进一步的工作中,我们将对这些低温酶的基因进行克隆表达及酶学性质分析。(本文来源于《第十一届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2017-10-18)

周亚军[3](2016)在《灰盖鬼伞菌盖多糖水解酶的分离纯化、鉴定及生理功能研究》一文中研究指出真菌多糖水解酶的研究有很多报道,其中很多水解酶都参与了其菌丝或子实体的自溶。对于自溶已经有了深入的认识,从最初认为的是在恶劣环境条件下细胞死亡的过程,到现在普遍认为的有着精密复杂调控机制的具有重要生理功能的过程,对真菌的生存、孢子形成和传播等都有重要意义。但关于真菌自溶的机理还需要更加深入的研究。担子菌特别是其中的伞菌,在子实体成熟后都有快速的自溶现象,所以我们以一种模式真菌灰盖鬼伞为研究对象,从其中多糖水解酶对细胞壁结构的水解作用角度,阐释真菌自溶的机理。本论文以灰盖鬼伞为研究材料,用硫酸铵盐析、阴阳离子交换层析、高效液相色谱层析的方法,从灰盖鬼伞菌盖中分离纯化出一系列具有β-1,3-葡聚糖酶活性的葡聚糖酶和一个外切几丁质酶。质谱分析鉴定结果表明,这几种葡聚糖酶分别为胞外β糖苷酶、外切-β-1,3-葡聚糖酶、葡聚糖β-1,3-糖苷酶和糖苷家族16蛋白,然而经过底物特异性和作用方式分析结果显示,它们实际分别为β-糖苷酶、β-1,3-糖苷酶、外切-β-1,3-葡聚糖酶和内切-β-1,3-葡聚糖酶。底物特异性结果表明胞外β-糖苷酶不是专一的β-1,3-糖苷水解酶,对β-1,3/1,4/1,6糖苷键都能水解。用薄层层析色谱方法分析叁种β-1,3-糖苷水解酶与昆布多糖的水解产物,结果表明这叁种β-1,3-糖苷水解酶发挥协同水解作用:内切-β-1,3-葡聚糖酶昆布多糖内部的糖苷键产生各种长度的β-1,3-寡糖,外切-β-1,3-葡聚糖酶再将较长链的寡糖水解为短链的二糖、昆布二糖和龙胆二糖,最后β1,3-糖苷酶水解昆布二糖产生葡萄糖。残留的龙胆二糖还需要其它β-1,6-糖苷酶来水解,胞外β-糖苷酶可能就在此发挥水解作用。因此,我们推测在灰盖鬼伞子实体自溶过程中β-1,3-糖苷酶、外切-β-1,3-葡聚糖酶和内切-β-1,3-葡聚糖酶协同作用降解细胞壁的β-1,3-葡聚糖骨架。此外,这叁种β-1,3-糖苷水解酶的最适pH和最适温度都相同,分别为5.0和60℃,说明它们可能在相同的条件下工作,也从侧面支持了上述协同作用的推测。同时从灰盖鬼伞菌盖中用硫酸铵盐析和弱阳离子交换色谱层析的方法,分离纯化得到的一种具有几丁质酶活性的蛋白,经过质谱鉴定为V型几丁质酶ChiB1、底物特异性和离子色谱层析分析表明ChiB1为一种外切几丁质酶。ChiB1的最适pH为5.0,最适温度为35-40℃,以胶态几丁质为底物的Km和Vmax分别为2.63mg ml-1和2.31μmol min-1 mg。 ChiB1水解灰盖鬼伞碱不溶细胞壁多糖的产物中含有大量的可溶性β-葡聚糖,因此,我们认为几丁质酶ChiB1通过水解细胞壁多糖中的几丁质链从而暴露出大量的β-1,3或β-1,6葡聚糖非还原末端或者直接释放出β-1,3或β-1,6葡聚糖分子,与p-葡聚糖酶协同作用降解细胞壁促进菌盖的自溶,在子实体自溶中具有重要意义。通过对灰盖鬼伞子实体葡聚糖酶和几丁质酶生理功能的研究,我们认为葡聚糖酶和几丁质酶都参与子实体的自溶,外切几丁质酶ChiB1(可能还有其他几丁质酶,如自溶中同样高表达的Ⅲ类几丁质酶)水解细胞壁的几丁质结构,暴露出更多的葡聚糖,配合葡聚糖酶水解葡聚糖结构:而葡聚糖酶BGL1、EXG和ENG协同作用,降解β-1,3-葡聚糖成分。葡聚糖酶和几丁质酶共同水解细胞壁,从而使子实体完全自溶。本研究是对真菌自溶机制具有重要意义的探索,为其提供了重要的参考价值。真菌自溶机制的研究对抗真菌药的研制、抗真菌转基因植物等的研究具有重要意义。(本文来源于《南京师范大学》期刊2016-04-15)

律倩倩,韩宝芹,刘万顺,刘伟治[4](2015)在《海洋甲壳多糖水解酶水解机理研究》一文中研究指出研究表明海洋寡糖具有抗菌,抗肿瘤等多种生物学活性,在功能性食品等众多领域有着广泛应用。海洋寡糖的制备可以通过酶解与化学降解法。相对于化学降解,基于多糖降解酶的酶解法是一种高效、环保的海洋寡糖制备方法。甲壳多糖是一种天然的聚阳离子海洋多糖,其对应的寡糖在多个领域具有广阔的应用前景。但目前壳聚糖酶的水解机制仍不清楚。本研究综合运用共结晶与定点突变技术手段,从分子水平对壳聚糖酶的水解机制进行了研究。寻(本文来源于《第五届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集》期刊2015-08-19)

程袁芬[5](2015)在《蒸煮海参体壁多糖水解酶的分离纯化及性质研究》一文中研究指出海参的营养价值十分丰富,但自溶问题严重影响了海参的养殖、加工、储存、运输及营养保持。传统干制海参的加工造成了大量营养物质流失,而经过蒸煮等工艺热处理的即食海参保留了海参的原始形态以及口感而深受消费者的青睐。但即食海参在储存期间同样会发生自溶现象。目前对海参体壁蛋白酶、多糖水解酶等的研究均是以新鲜海参为研究对象,尚且没有以蒸煮过的海参体壁为原材料提取粗酶进行研究。其中对多种体壁蛋白酶的研究结果表明,此类酶的热稳定性不高,80℃以上强热即会使其失活,因此本课旨在寻找强热抗逆性酶,并在本课题组所发现的鲜活海参体壁所存在的果胶酶基础上,以蒸煮过得海参体壁为实验材料,探寻该酶的存在,并对其进行分离纯化和酶学性质研究,并研究该酶与海参自溶的相关性,为海参体壁劣化提供理论和实践依据。(1)本文首次以蒸煮海参体壁为原料提取粗酶液,以果胶为底物对蒸煮海参体壁粗酶液进行了酶学性质探讨。确定了最佳浸提pH为6.0,反应离子强度为0.15mol/L,反应温度为40℃。在此条件下所得粗酶液中存在最适pH为6.0的果胶酶,将该酶在90℃、95℃、100℃分别保温30min仍能保留43.6%、62.7%、53.9%的残留活力,说明该酶为强热抗逆性酶。(2)在探究蒸煮海参体壁多糖水解酶与海参体壁劣化相关性研究中发现:以蒸煮海参体壁为原料所提取的粗酶可水解果胶,说明粗酶液中存在果胶酶活力;可水解灭酶后的海参体壁并显示多糖水解酶活力,但无蛋白酶活力。因此可推断,海参体壁的劣化很可能与多糖水解酶(果胶酶)有关。另外对海参体壁进行不同蒸煮时间及不同灭菌时间的处理,通过对所得相应酶液的电泳分析和果胶酶活力的测定,发现高温虽导致蛋白降解,但仍存在果胶酶活力,说明果胶酶具有良好的热抗逆性,进一步佐证了海参体壁劣化极有可能与蒸煮海参体壁多糖水解酶(果胶酶)有关。(3)利用Q-Fast flow强阴离子交换层析、Sephacryl S-300 HR凝胶层析、超滤管、SDS-PAGE对即食海参自溶液进行分离纯化,结果表明,即食海参粗酶液线性洗脱峰中存在热抗逆性的果胶酶,选取线性洗脱果胶酶活力较高的管149、150151、152、153、154号管对其进行热稳定性实验。将酶液在金属浴上90℃加热处理15min后发现酶液残留活力依次为59.6%、89.7%、47.2%、130.8%、72.0%、50.2%,其中,第152管的酶存在强热激活现象。另外,新鲜海参、即食海参、蒸煮海参粗酶液等电点的测定中,各自pH变化率的极大值点基本一致,说明叁种粗酶液中蛋白质所带电荷情况基本一致。这对于进一步研究该酶的强热激活机理及其与海参体壁劣化的相关性奠定了实验基础。(本文来源于《青岛科技大学》期刊2015-04-16)

常海燕[6](2014)在《海参肠壁中多糖水解酶的分离纯化与性质研究》一文中研究指出本论文通过研究海参肠壁中的多糖水解酶的活性,旨在为海参肠壁的综合利用提供理论指导。首先,本论文以α-淀粉、羧甲基纤维素钠、壳聚糖、木聚糖、海带多糖作为底物,探究海参肠壁浸提液中多糖水解酶的存在,结果表明:浸提液中含有能够作用于a-1,4糖苷键以及p-1,3糖苷键的多糖水解酶,其中以α-淀粉酶的活力为最高。其次,以淀粉酶活力为技术指标优化了海参肠壁中淀粉酶的浸提过程,并对浸提液中淀粉酶的理化性质进行了探究。结果表明,淀粉酶的最适浸提pH为7.0,浸提离子强度为0.05M,浸提时间为4h;浸提液中粗酶的最适酶解pH为6.0,接近海参肠壁的生理pH 6.2,最适酶解温度分别为20℃和60℃。热稳定性实验表明,经高温处理后,在20℃条件下所测酶活力降低明显;而在60℃条件下所测酶活力降低稍低于前者,因此推测能够降解淀粉的多糖水解酶可能是两种酶。再次,对盐析的饱和度进行了探讨,并对经盐析、透析后的粗酶进行了理化性质研究。研究表明,当饱和度小于50%的时候,浸提液析出的蛋白量很少;当饱和度在50%-60%之间时,蛋白质析出的速率最快;在90%饱和度时,析出的蛋白量和多糖水解酶的活力(60℃条件下酶解)均达到最高值;然而,在20℃酶解时,各个饱和度所得到的粗酶的活力均明显低于60℃,可能的原因为:①20℃活力比较高的酶分子量比较小,经透析而被除去;②该酶为一种金属激活酶,在盐析、透析过程中造成了金属离子的丧失,进而使酶失活。此外,酶学性质研究结果表明,透析液的最适酶解pH为6.0,最适酶解温度为60℃,热稳定性在低于60℃时保持稳定,最适稳定pH为7.0。最后,将透析酶液进行QFF强阴离子交换层析以及Sephacryl S-300凝胶层析,所得淀粉酶的纯化倍数是浸提液的15.04倍,在通过SDS-PAGE电泳时发现该淀粉酶具有两个亚基,其分子量分别为35.5kDa、33.2kDa。此外,对经过纯化的酶液进行部分理化性质的研究,结果表明,该酶的最适酶解pH为6.0,最适酶解温度为60℃,并且在60℃以后热稳定性开始变差。Ca2+, Fe3+,Zn2+, Cu2+, Mn2+对淀粉酶具有抑制作用,随着金属离子浓度的增加,其抑制效果也在增强,其中抑制效果最为显着的是Fe3+;K+对淀粉酶具有明显的激活作用,随着金属离子浓度的增加,其激活效果也在增强;EDTA的加入使得酶降低了约为30%左右的酶活力,因此判断淀粉酶是一种金属酶。(本文来源于《青岛科技大学》期刊2014-04-20)

黄玉红,靳艳玲,方扬,赵海[7](2013)在《细胞壁多糖水解酶及其在非粮生物质原料转化中的应用与研究进展》一文中研究指出可再生生物能源在经济和环境的可持续性发展等方面具有潜在的巨大优势,然而生物能源工业化生产还面临着原料的选择和预处理等难题.对于解决这些难题,预处理技术特别是细胞壁多糖水解酶在非粮燃料乙醇(第1.5代和2代燃料乙醇)的生产过程中发挥了关键作用.本文主要综述了细胞壁多糖水解酶的特征及其在非粮燃料生物质原料转化中的应用,介绍了细胞壁多糖主要成分纤维素、半纤维素和果胶的结构特征,细胞壁多糖水解酶预处理安全、低能耗、成本低、设备简单以及环境友好等优势和多样性特点,及其在非粮燃料乙醇生产中的应用现状,总结了细胞壁化学结构研究、催化过程模型建立、分子水平及计算机科学水平等方面的新技术在该领域的应用.最后对细胞壁多糖水解酶的研究方向提出展望,我国已致力于第1.5代和2代燃料乙醇的研究,并将细胞壁多糖水解酶应用于非粮燃料乙醇工业化的生产.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2013年05期)

李新良[8](2012)在《动物营养用非淀粉多糖水解酶的研究进展》一文中研究指出植物通过光合作用产生的木质纤维素是地球上最大的有机资源。木质纤维素含有大量的非淀粉多糖,如纤维素、3.葡聚糖、木聚糖、果胶和甘露聚糖。有效地降解这些多糖将为饲料、食品、能源与化工等行业提供大量廉价和可再生的资源。随着常规饲料原材料价格的不断攀升和畜禽生长速度的加快,采用廉价碳水化合物不能满足高产畜禽能量需求。添加高效降解非淀粉多糖水解酶能增加粗纤维的消化率,从而将非淀粉多糖转化为代谢能,同时也有效地消除抗营养因子和减少粪便总量。这些多糖的有效降解都需要多组分酶系的协同作用,本报告将重点介绍开发高效生物能源和饲料用酶的前沿研究进展及利用现代分子生物学技术改造酶学特性的一些成功案例。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会论文集》期刊2012-10-19)

胡璇,魏敏,罗诚浩,刘剑峰,李丹[9](2012)在《多糖水解酶处理烟叶的香气成分鉴定》一文中研究指出以α-淀粉酶、纤维素酶和果胶酶组成的多糖水解酶处理烟叶,运用蒸馏萃取法提取烟叶中的香气成分,并结合气相色谱-质谱法(GC-MS)对香气成分进行了定性定量分析。结果表明,多糖水解酶处理的烟叶中水溶性糖含量提高4.29%;烟叶中的香气物质总量提高11.8%;整体口感得到改善,香气的质和量均得到提高,烟气细腻柔和,刺激性、杂气和余味残留有所降低。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2012年10期)

宋丽华,韩吉雨,段学芳,谭先红,刘福昌[10](2011)在《非淀粉多糖水解酶对奶牛生产性能的影响》一文中研究指出试验利用非淀粉多糖水解酶饲喂奶牛,饲喂量每日每头10g,试验结果表明,试验组比对照组产奶量提高8.6%以上。乳成分没有显着差异,但与对照组相比,试验组波动较小,趋势更加稳定。(本文来源于《中国奶牛》期刊2011年12期)

多糖水解酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

低温酶以其在工业生产中无需额外的能源提升反应体系的温度而受到关注,在造纸,纺织,洗涤及食品加工行业均有应用前景。本研究对中国南极科考队采自极地的136株细菌在低温条件下(20℃)进行底物平板法筛选,发现一株来自于南极阿斯曼丘陵的杆菌能够产生甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶等多糖水解酶。该菌株菌落呈深红色,圆形凸起,边缘整齐,在100倍光学显微镜下为短杆菌。将测序结果与GenBank中已有细菌的序列进行比对,比对结果表明,与Massilia eurypsychrophila具有98.32%的同源性,相似性最高。为了挖掘该菌中的几种多糖水解酶基因,对其进行了全基因组测序,序列分析表明Massiliaeurypsychrophila 709含有两个α-淀粉酶基因,一个木聚糖酶基因,一个可聚糖酶基因。通过对淀粉酶基因的比对,发现其与来源于糖丝菌属Saccharothrix sp.ALI-22-I中的糖苷水解酶具有42%的同源性。在进一步的工作中,我们将对这些低温酶的基因进行克隆表达及酶学性质分析。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

多糖水解酶论文参考文献

[1].张静超.胞外多糖水解酶对铜绿假单胞菌运动特性及其生物被膜的影响[D].天津大学.2018

[2].刘璐,汪声晨,彭文舫,翟超,易犁.Massiliaeurypsychrophila709的鉴定、基因组测序及几种多糖水解酶产生情况分析[C].第十一届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2017

[3].周亚军.灰盖鬼伞菌盖多糖水解酶的分离纯化、鉴定及生理功能研究[D].南京师范大学.2016

[4].律倩倩,韩宝芹,刘万顺,刘伟治.海洋甲壳多糖水解酶水解机理研究[C].第五届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集.2015

[5].程袁芬.蒸煮海参体壁多糖水解酶的分离纯化及性质研究[D].青岛科技大学.2015

[6].常海燕.海参肠壁中多糖水解酶的分离纯化与性质研究[D].青岛科技大学.2014

[7].黄玉红,靳艳玲,方扬,赵海.细胞壁多糖水解酶及其在非粮生物质原料转化中的应用与研究进展[J].应用与环境生物学报.2013

[8].李新良.动物营养用非淀粉多糖水解酶的研究进展[C].中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会论文集.2012

[9].胡璇,魏敏,罗诚浩,刘剑峰,李丹.多糖水解酶处理烟叶的香气成分鉴定[J].湖北农业科学.2012

[10].宋丽华,韩吉雨,段学芳,谭先红,刘福昌.非淀粉多糖水解酶对奶牛生产性能的影响[J].中国奶牛.2011

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