人脐血干细胞静脉移植对急性心肌梗死基质金属蛋白酶9表达及胶原蛋白影响

论文摘要

目的探讨人脐血单个核细胞静脉移植对急性心梗后基质金属蛋白酶9、胶原蛋白及心功能影响。方法45只健康成年中国家兔（雌雄不限,体重1-1.5Kg）随机分为3组：（1）移植组：15只,结扎冠脉左前降支复制急性心肌梗死（AMI）模型后24小时,经耳缘静脉注入BrdU标记人脐血单个核细胞（HCBMCs）悬液0.5ml（2×107／ml）；（2）对照组：15只,结扎冠脉左前降支后同时间、同途径注入等量生理盐水；（3）假手术组：15只,左前降支穿线不结扎,术后同时间、同途径注入等量生理盐水。移植后1周、2周、4周超声检测心功能；心肌组织切片HE染色观测心肌病理变化；免疫组化法检测心肌BrdU阳性细胞,ELISA和RT-PCR检测血浆及心肌内基质金属蛋白酶MMP-9水平,masson染色观察心肌胶原蛋白变化。结果（1）与假手术组比较,移植组与对照组超声心功能指标短轴缩短率（LVFS）、左室射血分数（LVEF）均显著下降（P<0.01）；与对照组比较,移植组移植后1周、2周、4周LVFS, LVEF均明显改善（P<0.01）。（2）移植组与对照组HE染色显示梗死区炎症细胞浸润,移植组免疫组化显示梗死区及周边区存在BrdU阳性细胞。对照组梗死区及其周边均未检测到BrdU阳性的移植细胞。（3） ELISA及RT-PCR显示：与假手术组比较,对照组、移植组基质金属蛋白酶MMP-9表达水平和MMP-9mRNA均显著增加（p<0.01）；与对照组比较,移植组基质金属蛋白酶MMP-9表达水平和MMP-9mRNA显著减低（p<0.01）；胶原蛋白masson染色提示移植组和对照组胶原蛋白较假手术组明显增加,并有结构改变；与对照组比较,移植组胶原纤维明显减少,且胶原纤维基本处于有序状态。结论1．对急性心肌梗死家兔静脉移植人脐血单个核细胞,其能存活并迁移至梗死区域及周边区,并改善其心功能。2.对急性心肌梗死家兔静脉移植人脐血单个核细胞,其能调节心肌组织基质金属蛋白酶MMP-9表达,减轻正常胶原蛋白降解及非正常胶原蛋白沉积。提示抗心肌纤维化是人脐血单个核细胞静脉移植改善心梗后心功能机制之一。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 英文缩略词表
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验动物和材料
• 1.2 脐带血单个核细胞的提取与制备
• 1.3 动物模型制作和细胞移植
• 1.4 超声心动图检测
• 1.5 病理学与免疫组化检测
• 1.6 ELISA检测血浆MMP-9的浓度
• 1.7 RT-PCR检测心肌组织MMP-9mRNA表达水平
• 1.8 MASSON法染色检测胶原蛋白变化
• 1.9 统计学处理
• 第二章 结果
• 2.1 心梗动物模型评价
• 2.2 脐血单个核细胞
• 2.3 干细胞移植对AMI家兔心功能的影响
• 2.4 移植细胞（经BrdU标记）检测
• 2.5 血清MMP-9的ELISA检测结果
• 2.6 PCR检测各时间点心肌组织MMP-9mRNA结果
• 2.7 心肌胶原蛋白Masson染色
• 第三章 讨论
• 3.1 本实验的意义及特点
• 3.2 实验动物模型与脐血干细胞移植心功能改善机制
• 3.3 脐血干细胞调节MMP-9的表达,减少胶原蛋白沉积
• 第四章 结论
• 第五章 意义
• 参考文献
• 综述
• 脐血干细胞治疗心肌梗死的研究进展
• 致谢