半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)是我国主要的海水养殖鱼类之一,具有重要的经济价值。它的养殖区主要分布在我国北方,尤其是山东半岛。但是目前对于它的基础免疫学研究非常少,为了深入研究半滑舌鳎的免疫防御机制,我们利用同源克隆的方法得到白细胞介素8(Interleukin 8,IL-8)基因,分析了它的基因表达和生物活性。白细胞介素8是哺乳动物中参与炎症反应的趋化因子,属于CXC家族,所以也称其为CXCL8。本文通过同源克隆获得了半滑舌鳎IL-8(CsIL-8)基因的全长序列,并对其进行了鉴定分析。CsIL-8包括100个氨基酸残基,在同源性上和鱼类谱系1的IL-8更为接近。它含有CXC趋化因子结构域,其中包括4个保守的半胱氨酸残基,其中的两个半胱氨酸组成特征明显的CXC结构。利用实时荧光定量PCR对该基因的组织表达特征进行了分析,在正常生理条件下发现CsIL-8在各个组织均有表达,细菌刺激和亚单位疫苗免疫后CsIL-8的表达上调。纯化的重组蛋白rCsIL-8能够诱导半滑舌鳎?外周血白细胞和头肾淋巴细胞的迁移并且刺激这些细胞的增殖;当rCsIL-8加入到头肾淋巴细胞培养液中时,随着孵育时间的延长,rCsIL-8能够不同程度地上调IL-1β和IL-8的表达。这些研究结果说明CsIL-8是一个具有免疫调节活性的CXC趋化因子,能够参与病原菌刺激引起的炎症反应应答过程。
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