苯扎贝特对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞半胱天冬蛋白酶-3表达的影响

论文摘要

目的:观察苯扎贝特对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞半胱天冬蛋白酶-3（caspase-3）表达的影响,探讨其对胰岛β细胞保护的作用机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为常规饲料组（14只）和高糖高脂饲料组（46只）,分别给予常规饲料和高糖高脂饲料喂养。8周后,测定所有大鼠甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）等水平,高糖高脂饲料组腹腔注射链脲佐菌素（STZ,30mg/kg）溶液建立2型糖尿病大鼠模型,常规饲料组则给予等体积的柠檬酸缓冲液腹腔注射。成模的28只2型糖尿病大鼠随机分为2组:糖尿病组（DM,n=14）和糖尿病+苯扎贝特干预组（DMB,n=14）,常规饲料组大鼠全部作为正常对照组（NC,n=14）,三组一同进入药物干预,DMB组每日给予苯扎贝特50mg/kg灌胃,NC组和DM组每日予相应容量的蒸馏水灌胃,连续灌胃12周。测定三组大鼠药物干预前后的TG、TC、FBG、FINS等水平。干预12周后处死所有大鼠,取胰腺组织HE染色镜下观察,原位末端核苷酸标记法（TUNEL）检测胰岛β细胞凋亡,免疫组化SP法观察胰岛β细胞caspase-3的表达。结果:（1）与常规饲料组相比,高糖高脂饲料组大鼠血TG、TC水平明显升高（P<0.01）,FINS水平也升高（P<0.05）,FBG则无明显差异（P>0.05）。（2）成模后糖尿病大鼠合并糖脂代谢紊乱,经过苯扎贝特干预后,DMB组大鼠TG、TC较干预前明显下降（P<0.01）,FBG也得到改善（P<0.05）,FINS水平也得到恢复（P<0.05）。（3）与NC组相比,DM组、DMB组大鼠胰岛β细胞亡率、caspase-3阳性表达率均明显增多,与DM组相比,DMB组大鼠胰岛β细胞凋亡率、caspase-3阳性表达率下降（P<0.05）,但均高于NC组（P<0.05）。结论:苯扎贝特可以改善糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱,进一步减轻胰岛素抵抗及改善胰岛分泌功能,其作用机制可能与下调胰岛caspase-3表达,减少胰岛β细胞凋亡有关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 第2章 材料与方法
• 2.1 实验动物和饲料条件
• 2.2 实验试剂和仪器
• 2.2.1 实验试剂
• 2.2.2 主要仪器
• 2.2.3 部分试剂配制
• 2.3 2 型糖尿病大鼠模型的建立
• 2.3.1 高糖高脂喂养阶段
• 2.3.2 2型糖尿病大鼠建立
• 2.3.3 苯扎贝特干预
• 2.3.4 胰腺组织分离及固定
• 2.4 大鼠一般情况
• 2.4.1 一般情况
• 2.5 生化检测
• 2.5.1 甘油三酯、总胆固醇的检测
• 2.5.2 空腹血糖的检测
• 2.5.3 空腹胰岛素的检测
• 2.5.4 HOMA-IR 计算
• 2.6 胰腺组织病理学检测
• 2.6.1 石蜡组织切片制备步骤
• 2.6.2 HE 染色步骤
• 2.6.3 TUNEL 技术方法
• 2.6.4 免疫组化SP 法步骤
• 2.7 结果分析
• 2.7.1 胰岛β细胞凋亡检测及细胞凋亡率的计算
• 2.7.2 免疫组化SP 法检测胰岛caspase-3 表达
• 2.8 统计学方法
• 第3章 实验结果
• 3.1 高糖高脂喂养8 周后大鼠一般情况及生化指标
• 3.2 成模糖尿病后大鼠一般情况
• 3.3 成模后血脂变化
• 3.4 成模后空腹血糖变化
• 3.5 成模后空腹胰岛素和HOMA-IR 变化
• 3.6 大鼠胰腺HE 染色
• 3.7 大鼠胰岛β细胞凋亡检测及凋亡率的计算
• 3.8 免疫组化SP 法检测caspase-3 的表达
• 第4章 讨论
• 4.1 实验性2 型糖尿病大鼠模型的建立原理
• 4.2 脂代谢紊乱与2 型糖尿病
• 4.3 脂毒性与2 型糖尿病
• 4.4 脂质过氧化物酶增殖物激活受体（PPARs）概述
• 4.5 苯扎贝特改善糖代谢、对胰岛β细胞的保护作用
• 第5章 结论和展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 综述