论文摘要
Zeylenone是药用植物研究所首次从番荔枝科紫玉盘属植物山椒子中提取分离得到的一个多氧取代环己烯类天然产物。在前期的实验中发现zeylenone在体内外均具有强烈的抗肿瘤效果,并且对耐药肿瘤细胞株和敏感肿瘤细胞株都有良好的抑制作用。构效关系研究表明两个苯甲酸酯是zeylenone的活性基团,水解后则失去活性。前期研究还完成了zeylenone两种构型的人工全合成工作。这些研究都表明zeylenone有开发成为新型抗肿瘤药物的潜力。但是zeylenone在水中溶解度差,稳定性差,易水解失活,需要进一步的制剂开发,提高成药性。所以本论文的研究目的就是制备mPEG-PLGA载zeylenone（?）内米胶束,以增加zeylenone在水中的溶解度和稳定性,并达到缓释给药的效果。首先,本文建立了zeylenone含量的HPLC测定方法,并对zeylenone的理化性质进行了系统研究。结果表明,zeylenone纯度为99.7%,熔点为160.37℃,在水中溶解度仅为11.3μg/ml,log P为2.97,说明zeylenone难溶于水,易溶于有机溶剂。其在水中稳定性也较差,在pH 7.0的磷酸盐缓冲液中的半衰期为17.3 h,而在pH 4.0的条件下最稳定。其次,本文应用溶剂蒸发法制备了mPEG-PLGA载zeylenone纳米胶束,采用DSC和1H NMR两种方法验证了载药胶束的形成,并对载药胶束的性质进行了表征。结果表明,制得的载药胶束复溶性好,载药量为2.55%,包封率高达97.12%,溶解度大于2 mg/ml,粒径为35 nm,具有较窄的单分布特性。并且,载药胶束在体外具有有效的水解保护作用和接近零级的缓释效果。第三,本文建立了高效、灵敏、稳定可靠的LC-MS/MS大鼠血浆和肺组织生物样品分析方法。本方法选择大黄素为内标化合物,采用NaF-BNPP（1：1）为酯酶抑制剂,用乙酸乙酯液-液萃取法作为样品前处理方法。结果显示,NaF-BNPP具有较好的抑制效果,方法绝对提取回收率在85%以上。Zeylenone在大鼠血浆中的浓度为2.68～1340 ng/ml,肺组织中的浓度为1.34～670 ng/ml的范围内,呈现良好的线性,最低定量限分别为2.68和1.34 ng/ml。另外,此方法具有良好的准确度（93.5～111.9%）和精密度（1.56～16.60%）,没有明显的基质效应,达到生物样品测定的要求。第四,本文应用已经建立的LC-MS/MS分析方法,研究了zeylenone原药溶液和载药胶束溶液分别经静脉注射和支气管微喷雾给药后,大鼠体内的药代动力学特性,并测定了支气管微喷雾给药后,大鼠肺组织中的zeylenone含量。结果表明,经过静脉注射,载药胶束能显著延长zeylenone在体内的作用时间,具有明显的缓释效果,并且在开始给药的90 min内,载药胶束各点的血药浓度均低于原药,有可能降低毒性。两种剂型支气管微喷雾给药的生物利用度分别为15.8%和11.5%,原药溶液在肺组织中的含量要高于载药胶束。最后,本文利用病理切片的方法评价了zeylenone原药溶液和载药胶束溶液经支气管微喷雾给药后,对肺组织的毒性。结果表明,载药胶束组的肺组织没有明显异常,原药溶液组支气管黏膜上皮轻微损伤,周围偶见炎性细胞浸润。说明两种剂型的毒性均不大,安全性较高。总而言之,本文成功制备了zeylenone载药纳米胶束,对载药胶束进行了体内外评价,揭示了载药胶束静脉注射和肺部给药的药代动力学特性和肺组织中的含量,评价了肺部给药的安全性。载药胶束提高了zeylenone的溶解度和稳定性,在静脉注射时具有缓释效果,为zeylenone进一步的制剂开发提供了依据。
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相关论文文献
- [1].Zeylenone对急性淋巴细胞白血病细胞增殖及凋亡的影响[J]. 湖南中医药大学学报 2012(09)
- [2].Zeylenone抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖及诱导凋亡作用研究[J]. 中国药理学通报 2013(06)