本文主要研究内容
作者王召霞（2019）在《酿酒酵母终止子的人工设计及在途径优化中的应用》一文中研究指出：RNA聚合酶II转录的终止代表转录循环的最后一步。真核生物终止子通过影响mRNA的稳定性、转录效率和位置对转录和翻译过程起到重要的调控作用。本论文依据酿酒酵母终止子关键核心区的序列和结构特点,按照可调节、可控制等原则设计人工终止子,对酿酒酵母人工终止子进行克隆和表征,以番茄红素生物合成途径在酿酒酵母中的精细调控为验证对象,研究人工终止子对代谢途径的调控规律和对合成途径代谢流的调节效率。主要结果如下:(1)将合成的含有不同linker 1序列的人工终止子与含有中等强度的启动子TYS1p和绿色荧光蛋白基因eGFP的验证载体连接,筛选得到了266个人工酿酒酵母终止子,建立了人工终止子文库。以eGFP基因的荧光蛋白表达强度(FI)作为人工终止子强度的表征指标,酵母人工终止子的强度范围为2.3648~3.5270,平均荧光强度值为3.0719。(2)通过对人工终止子测序及对终止子linker 1序列分析发现,人工终止子的强度随着终止子的linker 1序列GC含量的升高而降低。统计文库中的88个强人工终止子,90个中等强度人工终止子和88个弱人工终止子发现,在弱人工终止子linker 1序列中的任何位置,碱基G的出现概率总是大于强终止子中相应位置碱基G的出现概率。且人工终止子强度随着linker 1序列中碱T的增加而增加。通过改变酵母人工终止子的茎长(由linker 2序列构成)发现,茎长的改变对不同强度的人工终止子有不同程度的影响。弱终止子和中强终止子茎长的改变能导致mRNA表达水平和蛋白质产量的升高,表明终止子的强度可通过改变终止子的茎长来调节。(3)以番茄红素外源合成途径为验证对象,采用不同强度的人工终止子设计平行实验,构建由不同强度人工终止子控制下的基因表达模块,验证人工终止子在途径工程中的应用潜力,发现使用中等强度终止子T-307的菌株控制番茄红素合成途径表达时,合成的番茄红素产量达到了26.72 mg/L,比使用弱终止子T-414的菌株产量提高了34.74%。研究说明,人工终止子的强度具有灵活的调节性,在基因表达和代谢途径精细调控中具有较大的应用潜力。
Abstract
RNAju ge mei IIzhuai lu de zhong zhi dai biao zhuai lu xun huan de zui hou yi bu 。zhen he sheng wu zhong zhi zi tong guo ying xiang mRNAde wen ding xing 、zhuai lu xiao lv he wei zhi dui zhuai lu he fan yi guo cheng qi dao chong yao de diao kong zuo yong 。ben lun wen yi ju niang jiu jiao mu zhong zhi zi guan jian he xin ou de xu lie he jie gou te dian ,an zhao ke diao jie 、ke kong zhi deng yuan ze she ji ren gong zhong zhi zi ,dui niang jiu jiao mu ren gong zhong zhi zi jin hang ke long he biao zheng ,yi fan jia gong su sheng wu ge cheng tu jing zai niang jiu jiao mu zhong de jing xi diao kong wei yan zheng dui xiang ,yan jiu ren gong zhong zhi zi dui dai xie tu jing de diao kong gui lv he dui ge cheng tu jing dai xie liu de diao jie xiao lv 。zhu yao jie guo ru xia :(1)jiang ge cheng de han you bu tong linker 1xu lie de ren gong zhong zhi zi yu han you zhong deng jiang du de qi dong zi TYS1phe lu se ying guang dan bai ji yin eGFPde yan zheng zai ti lian jie ,shai shua de dao le 266ge ren gong niang jiu jiao mu zhong zhi zi ,jian li le ren gong zhong zhi zi wen ku 。yi eGFPji yin de ying guang dan bai biao da jiang du (FI)zuo wei ren gong zhong zhi zi jiang du de biao zheng zhi biao ,jiao mu ren gong zhong zhi zi de jiang du fan wei wei 2.3648~3.5270,ping jun ying guang jiang du zhi wei 3.0719。(2)tong guo dui ren gong zhong zhi zi ce xu ji dui zhong zhi zi linker 1xu lie fen xi fa xian ,ren gong zhong zhi zi de jiang du sui zhao zhong zhi zi de linker 1xu lie GChan liang de sheng gao er jiang di 。tong ji wen ku zhong de 88ge jiang ren gong zhong zhi zi ,90ge zhong deng jiang du ren gong zhong zhi zi he 88ge ruo ren gong zhong zhi zi fa xian ,zai ruo ren gong zhong zhi zi linker 1xu lie zhong de ren he wei zhi ,jian ji Gde chu xian gai lv zong shi da yu jiang zhong zhi zi zhong xiang ying wei zhi jian ji Gde chu xian gai lv 。ju ren gong zhong zhi zi jiang du sui zhao linker 1xu lie zhong jian Tde zeng jia er zeng jia 。tong guo gai bian jiao mu ren gong zhong zhi zi de jing chang (you linker 2xu lie gou cheng )fa xian ,jing chang de gai bian dui bu tong jiang du de ren gong zhong zhi zi you bu tong cheng du de ying xiang 。ruo zhong zhi zi he zhong jiang zhong zhi zi jing chang de gai bian neng dao zhi mRNAbiao da shui ping he dan bai zhi chan liang de sheng gao ,biao ming zhong zhi zi de jiang du ke tong guo gai bian zhong zhi zi de jing chang lai diao jie 。(3)yi fan jia gong su wai yuan ge cheng tu jing wei yan zheng dui xiang ,cai yong bu tong jiang du de ren gong zhong zhi zi she ji ping hang shi yan ,gou jian you bu tong jiang du ren gong zhong zhi zi kong zhi xia de ji yin biao da mo kuai ,yan zheng ren gong zhong zhi zi zai tu jing gong cheng zhong de ying yong qian li ,fa xian shi yong zhong deng jiang du zhong zhi zi T-307de jun zhu kong zhi fan jia gong su ge cheng tu jing biao da shi ,ge cheng de fan jia gong su chan liang da dao le 26.72 mg/L,bi shi yong ruo zhong zhi zi T-414de jun zhu chan liang di gao le 34.74%。yan jiu shui ming ,ren gong zhong zhi zi de jiang du ju you ling huo de diao jie xing ,zai ji yin biao da he dai xie tu jing jing xi diao kong zhong ju you jiao da de ying yong qian li 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自石河子大学的王召霞，发表于刊物石河子大学2019-09-26论文，是一篇关于人工终止子论文,酿酒酵母论文,序列论文,序列论文,基因表达论文,石河子大学2019-09-26论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自石河子大学2019-09-26论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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