动态观察非酒精性脂肪肝发病进程中P450酶的变化

论文摘要

非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）是一类常见的肝脏疾病，与代谢应激、遗传、环境等多种因素有关。肝细胞内脂肪过度堆积导致脂质代谢紊乱，从而影响肝脏功能，部分患者可从单纯脂肪变性进一步发展到脂肪性肝炎（Non-alcoholic steatohepatitis，NASH）、肝纤维化、肝硬化，严重者最终可能导致一系列病理综合征并需要进行肝脏移植。在人民群众生活水平日益提高的今天，NAFLD已成为我国不可忽视的慢性肝病之一，正严重威胁着国人的健康。作为肝脏细胞微粒体内参与代谢最主要的生物氧化酶，细胞色素CYP450酶系与NAFLD发病机制密切相关，它是一种参与内源性物质和外源性物质代谢的酶，可被某些化合物诱导或者抑制。CYP450酶系介导脂质过氧化和氧自由基的生成，并导致肝脏细胞凋亡、继而引发肝纤维化、肝硬化等一系列病理结果。在NAFLD发病进程中，CYP450酶系的活性同样受到各种病理因素的干扰，不同的亚型的活性变化不同，在国内外既往研究中同一亚型的研究结论也同样存在争议。本实验以高脂乳剂诱导方式建立SD大鼠非酒精性脂肪肝模型，通过探针法观测探针药物代谢状况，研究与NAFLD发病密切相关的CYP1A2和CYP2D6两种亚型在NAFLD发病进程中的活性变化情况，为两者作用机制的研究和NAFLD的临床治疗提供依据。主要内容概括如下：1. CYP1A2在非酒精性脂肪肝发病进程中的活性变化状况制备非酒精性脂肪肝大鼠模型，分别于第0、7、9、11、13、15、17周按照单位体重给予探针药物非那西丁，与自身对照，随病程发展模型组CYP1A2的活性在第9周即中度脂肪肝时期达到最高（15.02±3.12mg/kg），明显高于第0周（10.03±3.60mg/kg）；与正常对照组相比，第9周时探针药物代谢量亦明显高于正常组（9.96±4.00mg/kg）。自第9周开始探针药物代谢量又逐渐降低。体外肝孵育实验也得出类似结果。这种与正常值的差异性，间接说明在NAFLD发病进程中CYP1A2的活性先明显升高后又逐渐下降。2. CYP2D6在非酒精性脂肪肝发病进程中的活性变化状况实验通过观察尿液中CYP2D6探针药物美托洛尔代谢产物α-OH美托洛尔的代谢状况。得出模型组α-OH美托洛尔单位体重代谢量随NAFLD病程的加重而显著增加，与第0周（4.10±1.24mg/kg）相比，第9周α-OH美托洛尔代谢量（5.94±2.67mg/kg）明显升高，第17周达到最高代谢量（7.97±1.05mg/kg）。体外肝孵育实验也得出类似结果。此结果间接说明CYP2D6随着脂肪变性的加重活性逐渐增加。

论文目录

• 英文缩略词
• 中文摘要
• Abstract
• 第一部分：非酒精性脂肪肝模型的确立
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论与小结
• 第二部分：CYP1A2 活性研究
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论与小结
• 第三部分：CYP2D6活性研究
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论与小结
• 第四部分：讨论与小结
• 1、讨论
• 2、小结
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述
• 参考文献