抗人诱骗受体3多克隆抗体、单克隆抗体的制备及初步应用

论文摘要

诱骗受体3（DcR3,又称TR6）是新近发现的一种可溶性肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族成员,可与Fas、HVEM、DR3竞争结合其相应配体FasL、LIGHT及TL1A,但并不介导细胞凋亡,在细胞的生长、分化、死亡以及免疫调节等方面发挥重要作用,与恶性肿瘤、自身免疫疾病及移植排斥等密切相关。本文将构建的原核表达质粒pET28a（+）/DcR3转化入大肠杆菌（E.coli） BL21中,高效诱导表达并纯化DcR3融合蛋白,纯化并成功复性的蛋白分别免疫家兔和BALB/c小鼠,获得了效价高、特异性强的抗人DcR3多克隆抗体（pAb）和5株单克隆抗体（mAb）。以pAb为包被抗体,以生物素化的mAb为检测抗体,引入生物素-亲合素系统（BAS）,建立双抗体夹心BAS-ELISA方法。利用该方法检测到特发性肺纤维化（IPF）、小细胞肺癌及慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期患者血清DcR3水平明显高于健康对照。为进一步研究DcR3的功能、应用及探讨其在临床相关疾病发病机制中的作用奠定基础。

论文目录

• 提要
• 第一章 综述诱骗受体3 的研究进展及临床应用前景
• 1. DcR3的结构
• 2. DcR3的表达
• 3. DcR3 的作用及作用机制
• 4. DcR3 和疾病的关系
• 5. DcR3 临床应用前景
• 第二章 DCR3 蛋白表达、纯化、复性及生物学活性检测
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第三章 抗人DCR3 多克隆、单克隆抗体的制备及鉴定
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第四章 定量检测DCR3 方法的建立及初步临床应用
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 学习期间所获科研成果
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 致谢