油茶饼中茶皂素及蛋白质的提取分离研究

论文摘要

本课题以油茶饼粕为原料，主要研究了油茶饼中茶皂素的提取、分离、纯化的最佳工艺及测定茶皂素的方法，并对油茶饼中蛋白质的提取及功能特性进行了研究，为茶皂素的工业生产提供了理论基础，并对提高油茶饼的综合资源利用具有重要意义。1．油茶饼粕中主要营养成分：总糖35.19%、脂肪6.19%、蛋白质8.12%、粗纤维18.67%、茶皂素12.11%。2.通过薄层层析（TLC）对油茶饼提取物进行定性试验，发现提取物中在于茶皂素对照品同样Rf值的位置出现了相同的斑点，Rf值为0.37，说明油茶饼粕中含有茶皂素。3.采用甲醇为提取剂，通过超声波辅助法提取油茶饼粕中的茶皂素。以茶皂素的提取效率为考察指标进行二次通用旋转组合试验。研究表明：提取时间对茶皂素提取效率影响最大，其次是料液比，提取温度对茶皂素提取效率影响最小，最佳提取工艺为料液比1:9、超声温度50℃、超声提取时间57min为超声波辅助提取茶皂素的最佳工艺条件，此条件下茶皂素提取效率可达到80.89%。4.建立高效毛细管电泳法，检测茶皂素的条件为：BECKMAN高效毛细管电泳仪，PDA检测器。未涂层熔融石英毛细管柱（i.d.50um×60cm，有效长度50cm）。运行缓冲液为30mM硼酸硼砂溶液，pH=8.0，进样时间5s，毛细管柱温为25℃，分离电泳电压为20KV，检测波长为210nm。并与香草醛浓硫酸分光光度法进行比较，结果表明高效毛细管电泳法不易受其他杂质影响，精确度较高。6.分别用大孔树脂和聚酰胺树脂对茶皂素进行分离纯化，并考察这两种方法的洗脱剂浓度，分别用70%和50%乙醇进行洗脱，两种分离纯化方法所得目的物纯度为：83.23%、80.17%。7.采用碱提酸沉法提取油茶饼粕中的蛋白质，以蛋白质的提取率为考察指标进行正交试验。最佳提取工艺为：提取温度为45℃、pH值为11.5、料液比1:45的条件下提取90min。在此条件下得到蛋白提取率为44.19%。8.对油茶蛋白质进行功能特性测定。结果可知：吸油性为4.0ml/g、乳化性36%、乳化稳定性为55%、起泡性60%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 茶皂素研究进展
• 1.1.1 油茶及茶粕简介
• 1.1.2 茶皂素的概况
• 1.1.3 茶皂素的结构和理化性质
• 1.1.4 茶皂素的分离提取及检测方法的研究进展
• 1.1.4.1 茶皂素的提取方法研究进展
• 1.1.4.2 茶皂素的纯化方法研究进展
• 1.1.4.3 茶皂素的检测分析方法
• 1.1.5 茶饼粕的应用
• 1.1.5.1 茶皂素的应用
• 1.1.5.2 油茶饼蛋白的利用
• 2 引言
• 3 材料与方法
• 3.1 原料及预处理
• 3.1.1 原料
• 3.1.2 原料预处理
• 3.2 仪器与药品试剂
• 3.2.1 试验仪器
• 3.2.2 试验药品试剂
• 3.3 技术路线
• 3.3.1 分析原料中的营养成分变化技术路线
• 3.3.2 茶皂素提取纯化技术路线
• 3.3.3 茶饼蛋白的提取技术路线
• 3.4 研究方法
• 3.4.1 原料含水率及主要营养成分含量的测定
• 3.4.2 油茶皂素的定性及定量检测
• 3.4.2.1 油茶皂素样液的制备
• 3.4.2.2 油茶皂素的 TLC 定性分析
• 3.4.2.3 分光光度法测油茶皂素含量
• 3.4.2.4 高效毛细管电泳法（HPCE）测定茶皂素含量
• 3.4.2.5 高效毛细管电泳法（HPCE）测茶皂素含量与分光光度法的比较
• 3.4.3 油茶饼中茶皂素的提取和纯化方法
• 3.4.3.1 溶剂的选择
• 3.4.3.2 单因素实验
• 3.4.3.3 二次通用旋转组合试验优化茶皂素提取工艺
• 3.4.3.4 茶皂素的分离纯化方法及工艺优化
• 3.4.4 油茶饼粕中蛋白质的提取及部分功能特性研究
• 3.4.4.1 油茶饼粕蛋白质等电点的测定
• 3.4.4.2 单因素实验
• 3.4.4.3 蛋白质的提取工艺优化
• 3.4.4.4 油茶饼中蛋白质的部分功能特性研究
• 4 结果与分析
• 4.1 主要营养成分含量测定结果
• 4.2 茶皂素的定性及定量检测
• 4.2.1 茶皂素的定性检测
• 4.2.2 分光光度法测茶皂素含量
• 4.2.3 HPCE 检测方法的建立
• 4.2.3.1 检测波长的确定
• 4.2.3.2 缓冲液 pH 值得选择
• 4.2.3.3 缓冲液浓度的选择
• 4.2.3.4 HPCE 方法的建立
• 4.2.3.5 方法学考察
• 4.3 油茶饼中茶皂素的提取分离结果与分析
• 4.3.1 提取溶剂的选择
• 4.3.2 超声波辅助提取的单因素试验
• 4.3.2.1 料液比对茶皂素提取效率的影响
• 4.3.2.2 提取时间对茶皂素提取效率的影响
• 4.3.2.3 提取温度对茶皂素提取效率的影响
• 4.3.3 茶皂素提取的二次通用旋转组合试验
• 4.3.3.1 单因素分析
• 4.3.3.2 交互作用效应分析
• 4.3.3.3 提取工艺的优化
• 4.3.4 大孔树脂分离纯化法
• 4.3.4.1 大孔树脂的筛选
• 4.3.4.2 洗脱剂浓度的选择
• 4.3.5 聚酰胺树脂分离法
• 4.3.5.1 聚酰胺树脂静态吸附及解析率
• 4.3.5.2 洗脱剂浓度选择
• 4.3.6 两种纯化方法的比较
• 4.3.7 分光光度检测法与 HPCE 法检测茶皂素的比较
• 4.4 油茶饼粕中蛋白质的提取及部分功能特性研究
• 4.4.1 蛋白质的提取工艺优化
• 4.4.1.1 蛋白质等电点的确定
• 4.4.1.2 料液比对油茶饼粕蛋白质提取率的影响
• 4.4.1.3 浸提时间对油茶饼粕蛋白质提取率的影响
• 4.4.1.4 浸提温度对油茶饼粕蛋白质提取率的影响
• 4.4.1.5 pH 对油茶饼粕蛋白质提取率的影响
• 4.4.2 提取工艺的正交试验结果分析
• 4.4.3 油茶饼蛋白质功能特性研究
• 4.4.3.1 溶解性
• 4.4.3.2 吸油性、起泡性、乳化性
• 5 讨论
• 6 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介及发表文章