超高效液相色谱—电喷雾串联四极杆质谱法测定动物源性食品和尿液中糖皮质激素残留

论文摘要

随着经济的快速发展,动物源性食品在人们生活中所占比例越来越大,而各种动物源性食品中的激素残留污染现已成为危及人类身体健康的公共卫生热点问题。本文建立了动物源性食品和尿液中糖皮质激素残留的超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆、多反应监测（MRM）模式的质谱（负离子模式）分析方法。样品加入缓冲溶液,经甲醇超声提取、正己烷脱脂（尿样除外）、GCB柱浓缩和净化、氨基柱进一步净化后,通过Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱分离,以甲醇和含0.1%甲酸的水为流动相（流速为0.3 ml/min）进行梯度洗脱,超高效液相色谱-质谱/质谱分析。以保留时间和离子对（母离子和两个碎片离子）信息比较进行定性,以母离子和响应值高的碎片离子进行定量。方法检出限为0.0030.38μg/kg,最低定量限为0.0111.27μg/kg。添加水平为2μg/kg、0.4μg/kg时,十六种糖皮质激素的加标回收率为81.0%112.3%,相对标准偏差为1.8%16.6%。实验结果表明所建立的方法具有分析速度快、灵敏度高和特异性好等特点。以Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18柱为分离柱,乙腈和含0.1%甲酸的水为流动相梯度洗脱,采用UPLC-MS/MS成功分离地塞米松和倍他米松,并建立了测定动物源性食品和尿液中地塞米松和倍他米松残留的超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱分析方法。倍他米松和地塞米松最低检出限为0.0990.36μg/kg,最低定量限为0.331.21μg/kg。添加水平为2μg/kg、0.4μg/kg时,倍他米松和地塞米松回收率为71.2108.2%,相对标准偏差为4.313.5%。在鸡体内通过口腔给药喂入地塞米松和泼尼松,并分析不同时间在鸡体内地塞米松和泼尼松的残留。结果表明把糖皮质激素作为兽药使用时,不能在停药后立即宰杀,否则会造成糖皮质激素在动物体内的残留,给消费者带来潜在的健康威胁。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 糖皮质激素概述
• 1.2 糖皮质激素类药物对人的副作用
• 1.3 糖皮质激素最大残留量的规定
• 1.4 国内外糖皮质激素残留分析现状
• 1.4.1 糖皮质激素类残留样品前处理
• 1.4.1.1 样品的提取
• 1.4.1.2 样品的净化
• 1.4.2 糖皮质激素分析方法
• 1.4.2.1 薄层色谱法
• 1.4.2.2 气相色谱法
• 1.4.2.3 液相色谱方法
• 1.4.2.4 气相色谱-质谱方法
• 1.4.2.5 液相色谱-质谱方法
• 1.5 选题的目的和意义
• 第二章 超高效液相色谱－电喷雾串联四极杆质谱（UPLC-MS/MS）分析方法的建立
• 2.1 仪器与试剂
• 2.1.1 仪器
• 2.1.2 试剂和标准品
• 2.2 仪器条件
• 2.2.1 液相色谱条件
• 2.2.2 质谱条件
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 质谱分析
• 2.3.1.1 质谱条件的优化
• 2.3.1.2 糖皮质激素碰撞诱导解离分析
• 2.3.2 液相色谱条件的选择
• 2.3.2.1 色谱柱的选择
• 2.3.2.2 柱温的选择
• 2.3.2.3 流动相的优化
• 2.3.2.4 流量的选择
• 第三章 动物源性食品和尿样中糖皮质激素残留分析方法的建立
• 3.1 实验部分
• 3.1.1 试剂、仪器和材料
• 3.1.2 前处理方法
• 3.1.2.1 样品中糖皮质激素的提取
• 3.1.2.2 样品的浓缩与净化-GCB固相萃取柱
• 3.1.2.3 样品的浓缩与净化-HLB固相萃取柱
• 3.1.2.4 样品测定流程图
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 提取液和缓冲溶液pH值的选择
• 3.2.2 固相萃取前样品溶液中甲醇和水的比例的选择
• 3.2.3 固相萃取柱淋洗液和洗脱液的选择
• 3.2.4 所建立的分析方法研制结果
• 3.2.4.1 线性关系和方法检出限-GCB固相萃取柱
• 3.2.4.2 方法的准确度和精密度-GCB固相萃取柱
• 3.2.4.3 线性关系-HLB固相萃取柱
• 3.2.4.4 方法的准确度、精密度和检出限-HLB固相萃取柱
• 3.2.4.5 固相萃取柱的选择
• 3.2.4.6 空白样品中糖皮质激素残留的定性分析和定量分析
• 3.2.4.7 标准溶液的稳定性和样品的稳定性
• 3.2.4.8 日内标准偏差和日间标准偏差
• 3.3 小结
• 第四章 地塞米松和倍他米松的分离与检测方法的建立
• 4.1 地塞米松和倍他米松分离条件的确定
• 4.1.1 仪器、试剂和标准品
• 4.1.2 仪器条件
• 4.1.2.1 液相色谱条件
• 4.1.2.2 质谱条件
• 4.1.3 结果与讨论
• 4.1.3.1 质谱条件的选择
• 4.1.3.2 超高效液相条件的选择
• 4.1.3.3 倍他米松和地塞米松分离机理分析
• 4.2 地塞米松和倍他米松残留分析方法的建立
• 4.2.1 试剂、仪器和材料
• 4.2.2 前处理方法
• 4.2.2.1 样品中倍他米松和地塞米松的提取
• 4.2.2.2 样品的浓缩与净化
• 4.2.3 方法研制结果
• 4.2.3.1 线性关系和方法检出限
• 4.2.3.2 方法的准确度和精密度
• 4.3 小结
• 第五章 鸡体内喂养地塞米松和泼尼松后的残留检测
• 5.1 实验部分
• 5.1.1 试剂、仪器和材料
• 5.1.2 前处理方法
• 5.1.2.1 样品中糖皮质激素的提取
• 5.1.2.2 样品的浓缩与净化
• 5.2 结果与讨论
• 第六章 结论
• 参 考 文 献
• 博士在读期间发表论文情况
• 附 录
• 致 谢