酿酒酵母1450产孢培养基的筛选及单倍体的分离

论文摘要

诱导酵母产孢进而获得单倍体是进行酵母遗传学和育种工作极为关键的一步,它既是性状遗传分析所必需,又可为杂交作好亲本的准备。孢子的获得必需要提供适当的产孢条件,酿酒酵母营养体在营养缺乏等饥饿条件下,经过减数分裂由二倍体变为单倍体,形成子囊。在常用的酵母产孢培养基中没有一种产孢培养基能够适用于所有的酵母产孢。为此,本文在几种不同生孢培养基的条件下进行酿酒酵母1450的生孢实验,选择一种最适培养基进行酿酒酵母1450单倍体的分离,并采用发酵法筛选出一株性能良好的单倍体,供随后的育种实验使用。主要研究结果如下:1.通过对四种常用于酵母产孢的培养基的优选,确认Mcclary培养基为适宜的酿酒酵母1450的生孢培养基。2.用Mcclary培养基对1450进行产孢培养的最适温度为25℃-28℃,培养时间为5-7d。温度对酵母生孢能力的影响与相关酶的活性有关。3.在测定菌株的发酵力试验中,发现单倍体菌株的酒精发酵力差异较大,推测原因是酒酵母的发酵能力由多个基因控制。并且通过对酒精发酵力和酒精发酵性能的综合分析,得到一株性能良好的单倍体S-3,可以作为以后杂交实验的亲本。4.对单倍体S-3进行了生长曲线的测定,结果表明在进行育种工作时选取9h左右的菌体较好。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 葡萄酒相关酵母
• 1.1.1 葡萄酒相关酵母的发展概况
• 1.1.2 葡萄酒相关酵母的分布
• 1.1.3 葡萄酒相关酵母与葡萄酒风味
• 1.2 葡萄酒酵母的菌种选育
• 1.2.1 葡萄酒酵母选种指标
• 1.2.2 自然选育
• 1.2.3 基因工程在葡萄酒酵母育种中的应用
• 1.3 原生质体融合技术在微生物菌种选育中的应用
• 1.3.1 抗生素高产菌株的选育
• 1.3.2 原生质体融合技术在酵母菌工程菌构建上的应用
• 1.3.3 原生质体融合技术在其它多功能菌种选育中的应用
• 1.3.4 原生质体融合技术在污水工程菌构建上的应用
• 1.4 酵母子囊孢子的形成及单倍体的分离
• 1.4.1 酵母子囊孢子的形成
• 1.4.2 酵母单倍体的分离
• 1.5 立题的目的和意义
• 第二章 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 试验菌种及来源
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 主要试剂及配方
• 2.1.4 主要仪器和设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 诱导孢子形成的方法
• 2.2.2 子囊孢子的染色
• 2.2.3 子囊孢子分离和单倍体的获得
• 2.2.4 单倍体菌株发酵力的测定
• 2.2.5 单倍体生长曲线的绘制
• 2.2.6 残糖和酒精度的测定
• 第三章 结果与分析
• 3.1 不同产孢培养基中酵母的产孢率
• 3.2 不同温度条件对酵母产孢的影响
• 3.3 单倍体的获得
• 3.4 单倍体酒精发酵力的测定
• 3.5 单倍体发酵性能的测试
• 3.6 单倍体 S-3 生长曲线的绘制
• 第四章 讨论
• 4.1 酿酒酵母产孢培养基的筛选
• 4.2 单倍体的获得及分析
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 发表论文情况
• 附表