富硒锌益生菌制剂研制及其在犬上的初步应用

论文摘要

硒和锌是人和动物所必需的微量元素,已经发现它们具有一系列重要的生物学功能。硒功能包括:提高机体免疫力、抗癌、抗自由基、延缓衰老、拮抗有毒元素、防治某些地方性流行病等。锌由于其在体内广泛的生理生化功能而被称为“生命元素”。其功能包括:促进机体发育和骨骼生长、提高免疫机能、提高动物的繁殖机能、参与蛋白质和核酸代谢,调节酶的活性等。近十几年来,用微生物作为载体富集人和动物所必需的微量元素以获得有机态、成本低廉的微量元素添加剂日益引起了各国的关注。有机硒和有机锌与无机硒和无机锌相比有许多优势,首先其毒性较小,适口性好,此外因其吸收利用率更高,可降低饲料中硒和锌的添加量,从而减少对环境的污染。酵母菌具有富集多种微量元素的能力,又是发酵工业中最常用的菌种之一,其他微生物（如乳酸菌等益生菌）也有一定的富集微量元素的能力。一些人用及饲用微生物富集的有机微量元素产品相继问世。本研究试图通过筛选益生菌菌株,优化培养条件,研制成一种具有有机硒、有机锌和益生菌三重作用的富硒锌益生菌制剂,在此基础上对犬的全血硒锌含量、抗氧功能和肠道菌群影响作了初步探索。1.富硒锌益生菌菌株的筛选本试验对3株酵母菌和5株乳酸菌进行筛选。在添加不同Se4+含量的琼脂平皿培养基中分别接种酵母菌和乳酸菌进行了耐硒能力试验,然后在添加不同Zn2+含量的琼脂平皿培养基中分别接种酵母菌和乳酸菌进行耐锌能力试验,综合筛选出Y2和L4为耐硒和耐锌能力强的菌株。2.富硒锌益生菌培养条件的优化利用产朊假丝酵母和嗜酸乳杆菌作菌种,在培养基中添加一定量的Zn2+和Se4+,采用混合发酵法生产富硒锌益生菌,并对富硒锌益生菌培养条件进行的优化。经过筛选,富硒锌益生菌的培养条件:培养基为适宜的培养基,装液量50ml/250ml三角瓶,5μg·ml-1的Se4+浓度,150μg·ml-1的Zn2+浓度,5%的接种量,32℃,培养时间为36h。在优化的培养条件下,混合培养,培养结束后,低温下3000r·min-1离心20min,得到菌泥,菌泥中加入保护剂（保护剂为脱脂奶粉和蔗糖）,真空冷冻干燥,得到富硒锌益生菌产品,获得富硒锌益生菌的量为225.94g·L-1,硒含量为167.23μg·g-1,锌含量为4.52mg·g-1,产朊假丝酵母的数量为1.02×108cfu·g-1,嗜酸乳杆菌的数量为1.48×109cfu·g-1。3.富硒锌益生菌对犬全血硒锌含量、抗氧化功能和肠道菌群的影响研究富硒锌益生菌对犬全血硒锌含量、抗氧化能力和肠道菌群的影响。8条18月龄本地犬,雌雄各半,均分成对照组和试验组,对照组在整个试验期间饲喂犬基础日粮,试验组在饲喂犬基础日粮的基础上,每天补给富硒锌益生菌2.0 g,连续30 d。分别于饲喂的第0 d、15 d和30 d采样测定全血硒锌含量与抗氧化能力和肠道菌群的相关指标。结果:在试验15d,犬全血硒和锌含量、全血GPX活性、血清SOD活性、血清T-AOC和粪中乳杆菌数量显著高于对照组（P＜0.05）,粪中肠杆菌数量显著低于对照组（P＜0.05）,血清MDA含量和粪中双歧杆菌、葡萄球菌和肠球菌数量与对照组之间差异不显著（P＞0.05）;在试验30 d,犬全血硒含量、血清SOD活性、血清T-AOC和粪中乳杆菌数量极显著高于对照组（P＜0.01）,全血锌含量、GPX活性和粪中双歧杆菌数量显著高于对照组（P＜0.05）,粪中肠杆菌数量极显著低于对照组（P＜0.01）,血清MDA含量、粪中葡萄球菌和肠球菌数量显著低于对照组（P＜0.05）。结论:富硒锌益生菌能提高犬全血硒和锌含量,提高机体抗氧化能力,调节肠道菌群和改善肠道内环境。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 符号及缩略语说明
• 前言
• 第一部分 文献综述
• 1 硒和锌的历史研究
• 2 硒和锌在动物体内的分布
• 3 硒和锌的吸收与代谢
• 4 硒和锌的功能
• 5 动物硒和锌缺乏症
• 6 硒和锌缺乏的原因及防治
• 7 有机硒和有机锌研究
• 8 益生菌的生物学功能
• 9 益生菌作用的基本理论
• 10 饲料与食品用益生菌种类.
• 11 通过酵母进行有机硒和有机锌的合成转化
• 12 通过乳酸菌进行有机硒和有机锌的合成转化
• 参考文献
• 第二部分 试验研究
• 第一章 富硒锌益生菌菌株的筛选
• 摘要
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 参考文献
• Abstract
• 第二章 富硒锌益生菌培养条件的优化
• 摘要
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 参考文献
• Abstract
• 第三章 富硒锌益生菌对犬全血硒锌水平、抗氧化功能和肠道菌群的影响
• 摘要
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 参考文献
• Abstract
• 全文结论
• 攻读硕士学位期间发表论文
• 致谢