论文摘要
目的：1、利用RGDV体外干预人舌鳞状细胞癌脑转移亚系Tb细胞系，探讨RGDV对Tb细胞系增殖、凋亡的调控作用。2、利用RGDV对金黄地鼠颊囊癌模型进行靶向治疗，探讨RGDV在口腔自发成瘤体系中的作用。方法：1、RGDV对舌癌细胞增殖凋亡的研究（1）通过RGDV作用于Tb细胞，采用MTT比色法、平板克隆形成实验以及流式细胞仪细胞内抗原检测法检测PCNA蛋白的表达，观察RGDV对Tb细胞增殖的影响。（2）通过RGDV作用于Tb细胞系，采用FITC-AnnexinV／PI检测细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞周期、Hoechst／PI双染法观察细胞形态、电镜观察细胞形态、DNA梯状电泳以及流式细胞仪细胞内抗原检测法检测Caspase-3蛋白的表达，观察RGDV对Tb细胞凋亡的影响。2、RGDV对金黄地鼠颊囊癌靶向治疗的研究建立金黄地鼠颊囊癌模型，利用RGDV对金黄地鼠颊囊癌模型进行靶向治疗，定期观察地鼠颊囊癌肿瘤体积变化，治疗结束后取颊囊癌组织。常规包埋、切片，免疫组织化学法检测治疗后组织中v-WF、Brdu的表达变化。统计分析实验结果。结果：1、RGDV对舌癌细胞增殖凋亡的研究（1）RGDV对Tb细胞增殖的影响：RGDV干预组Tb细胞增殖速度低于Con组，克隆形成率明显低于Con组（P＜0.05）；PCNA表达水平明显下调。（2）RGDV对Tb细胞凋亡的影响：RGDV组的凋亡细胞发生率明显增加，达到88.3％与Con组相比有显著性差异（P＜0.05）；Tb细胞复制被阻滞在S期；DNA电泳显示清晰的DNA Ladder；Hoechst／PI双染法观察到明显的凋亡细胞；Caspase-3蛋白的含量同Con组相比明显增多。2、RGDV对金黄地鼠颊囊癌靶向治疗的研究（1）利用RGDV对金黄地鼠颊囊癌模型进行靶向治疗后，肿瘤体积的变化结果：RGDV组地鼠肿瘤体积较Con组显著缩小（P＜0.05）。（2）利用RGDV对金黄地鼠颊囊癌模型进行靶向治疗后，v-WF的表达结果：RGDV组和Con组v-WF均有表达，分别检测MVD（微血管密度），RGDV组MVD值显著低于Con组（P＜0.05）。（3）利用RGDV对金黄地鼠颊囊癌模型进行靶向治疗后，Brdu的表达结果：RGDV组和Con组Brdu均有表达，分别检测PI（增殖指数），RGDV组PI值显著低于Con组（P＜0.05）。结论：1、应用RGDV干预Tb细胞后，Tb细胞的增殖能力降低，提示RGDV抑制了Tb细胞的增殖能力；2、应用RGDV干预Tb细胞后，可诱导Tb细胞凋亡提示细胞凋亡途径可能是RGDV影响肿瘤形成的重要途径，并且RGDV可能通过Caspase-3信号通路诱导Tb细胞凋亡；3、应用RGDV作用金黄地鼠颊囊癌后，抑制了肿瘤细胞的增殖，抑制了肿瘤的生长。4、应用RGDV作用金黄地鼠颊囊癌后，降低了金黄地鼠颊囊癌的微血管密度，说明RGDV对肿瘤新生血管起抑制作用。