论文摘要
目的:研究嗜酸乳杆菌CMS-H002对急性溃疡性结肠炎模型（UC）的治疗作用,了解TLR4、单核细胞趋化因子MCP-1及核因子NF-κBp65在各组小鼠结肠组织中的表达变化情况,对嗜酸乳杆菌治疗UC的可能机理进行探讨。方法:1.UC模型的建立:Balb/c小鼠自由饮用2.5%右旋糖酐硫酸酯钠（Dextran Sulfate Sodium,DSS）（分子量50000）7天,建立小鼠急性UC模型。2.嗜酸乳杆菌对急性UC的治疗效果评价:将40只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、生理盐水组、SASP组、嗜酸乳杆菌CMS-H002高、低剂量组。正常对照组小鼠每日自由饮用消毒蒸馏水,其余各组小鼠每日自由饮用2.5%DSS,连续7天。正常对照组无其它处理;生理盐水组每日给0.4ml生理盐水灌胃;SASP组按照每日15mg/10g体重灌胃;CMS-H002高、低剂量组每日分别按照4.0×108cfu,4.0×107cfu/10g体重灌胃一次。每日观察小鼠的进食进水、体重、粪便性状及隐血。给药7天后,颈椎脱臼法处死各组小鼠,测量结肠长度,留取各组结肠标本,行HE染色并观察光镜下结肠组织学病理变化。3.取各组小鼠结肠组织,用免疫组化sp法检测NF-κBp65和TLR-4蛋白表达,RT-PCR法检测MCP-1mRNA表达。结果:1.生理盐水组小鼠毛发色泽灰暗,精神萎靡,活动减少,出现腹泻血便等症状。体重有明显减轻,至实验第7天,体重下降了3.05±0.7。SASP及嗜酸乳杆菌CMS-H002株治疗后,小鼠体重下降延缓,腹泻和血便现象减轻,其中高剂量CMS-H002在阻止体重下降方面作用强于SASP。2.生理盐水组小鼠DAI（疾病活动指数）由0增至6.53±1.50,SASP及嗜酸乳杆菌CMS-H002治疗均能降低小鼠疾病活动度,实验第7天,CMS-H002高剂量组的DAI为1.5±0.74,低于SASP组2.3±0.83,但无统计学意义（P＞0.05）。3.生理盐水组小鼠结肠长度较正常组明显缩短（8.40±0.54）,黏膜充血水肿,组织病理学检查可见黏膜上皮缺失,杯状细胞减少,隐窝变形破坏,炎性细胞浸润;嗜酸乳杆菌CMS-H002及SASP治疗可阻止结肠缩短,减轻黏膜缺失,控制炎症,尤以CMS-H002高剂量组病变程度最轻,组织学评分为4.7±0.90,低于SASP组6.6±1.60（P＜0.05）。4.生理盐水组小鼠结肠组织TLR4、NF-κBp65、MCP-1 mRNA表达明显增强,各治疗组TLR4、NF-κBp65、MCP-1mRNA的表达均低于生理盐水组,其中以嗜酸乳杆菌CMS-H002高剂量组表达最低。5.TLR4、NF-κBp65、MCP-1与DAI及组织损伤评分之间均成正相关,r＞0.398,P＜0.01。结论:1.2.5%DSS诱导的小鼠UC模型具有急性期UC特点,而且死亡率低,适用于轻中度UC模型研究。2.嗜酸乳杆菌CMS-H002菌株能有效治疗DSS诱导的急性UC,其抑制肠道炎症的作用可能与菌体成分或其代谢产物通过TLR4/NF-κB信号传导通路抑制MCP-1的表达有关。