高速逆流色谱在天然产物中的应用及柑橘功能因子保健新产品的开发

论文摘要

本研究主要包括两部分内容：第一部分内容是研究高速逆流色谱在天然产物中的应用,主要利用高速逆流色谱分离了甜瓜蒂中的葫芦素类化合物和橘皮中的多甲氧基黄酮类化合物,均取得了较好的分离效果。首先,是利用高速逆流色谱分离甜瓜蒂中的葫芦素类化合物,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（1.2：0.8：0.8：1.2,V/V）为两相溶剂系统,在主机转速800 r/min、流动相流速2.0 mL/min、分离温度25℃、检测波长254 nm条件下,4h内从200 mg甜瓜蒂粗提物中一步分离制备得到33.5 mg葫芦素B、21.7 mg葫芦素E和14.9 mg葫芦素Ⅰ,产物纯度经HPLC检测,分别为99.1%、98.3%和97.5%,结构经MS、1H-NMR和13C-NMR鉴定,与文献相符。其次,是利用高速逆流色谱分离橘皮中的多甲氧基黄酮类化合物,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水（1：0.8：1：1.2,V/V）为两相溶剂系统,在主机转速800 r/min、流动相流速2.0mL/min、分离温度25℃、检测波长254nm条件下,从200 mg橘皮粗提物中一步分离制备得到32.8 mg川陈皮素、10.9 mg红橘素、43.5 mg3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮和18.7 mg 5-羟基-6,7,8,3,4’-五甲氧基黄酮,产物纯度经HPLC检测,分别为98.9%、97.8%、99.2%和99.8%,结构经MS、1H-NMR鉴定,与文献相符。以上研究证明,高速逆流色谱在天然产物的分离中具有良好的应用前景。第二部分主要是柑橘中多甲氧基黄酮的提取分离及软胶囊的初步处方研究。首先,进行了橘皮多甲氧基黄酮中川陈皮素和红橘素的含量测定及方法学研究,检测条件为色谱柱：Aglient Extend C18柱（250 mm ×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈-水梯度洗脱（0～10 min：乙腈40%；10～15mmin：乙腈40%～60%；15～20 mmin：乙腈40%）,检测波长330nm,流速1.0 mL·min-1,柱温25℃,进样量10μL。其次,是进行了橘皮中川陈皮素和红橘素提取工艺研究,最佳提取工艺为：微波功率800 W、提取时间5 min、乙醇体积比75%、料液比1：15,此时川陈皮素和红橘素的提取率分别达到90.21%和84.25%,并与传统提取工艺进行了比较。再次,是采用大孔树脂对橘皮多甲氧基黄酮进行分离纯化,以川陈皮素作为指标化合物,探讨了D101、AB-8、HZ816和HZ841四种树脂,优选出AB-8树脂用于橘皮多甲氧基黄酮的分离纯化。最后,是进行了多甲氧基黄酮软胶囊的处方研究,确定的最佳处方为（按1g内容物总量）：多甲氧基黄酮粉末含量为20%（200 mg）；助悬剂为蜂蜡,含量为1.5%（15 mg）；润湿剂为浓缩磷脂,含量为2%（20 mg）；分散介质为大豆油,含量为76.5%（765 mg）。以上研究为多甲氧基黄酮保健新产品的开发提供了一定的基础试验数据。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 概述
• 1.2 高速逆流色谱在天然产物研究中的应用
• 1.2.1 高速逆流色谱简介
• 1.2.2 高速逆流色谱的溶剂系统及其选择
• 1.2.3 高速逆流色谱在天然产物分离中的应用
• 1.2.4 高速逆流色谱在药物分析中的应用
• 1.2.5 小结
• 1.3 橘皮中多甲氧基黄酮的研究进展
• 1.3.1 橘皮中多甲氧基黄酮概述
• 1.3.2 橘皮多甲氧基黄酮的功效活性
• 1.3.3 橘皮多甲氧基黄酮的检测方法概述
• 1.3.4 橘皮PMFs的分离纯化研究概述
• 1.3.5 橘皮中多甲氧基黄酮的应用现状
• 1.4 本课题选题及研究意义
• 1.4.1 高速逆流色谱在天然产物中的应用
• 1.4.2 柑橘功能因子保健新产品的开发
• 第二章 甜瓜蒂中葫芦素的高速逆流色谱分离
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器及试剂
• 2.2.2 甜瓜蒂粗提物的制备
• 2.2.3 两相溶剂的选择
• 2.2.4 高效液相色谱条件
• 2.2.5 高速逆流色谱分离条件
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 溶剂体系的选择结果
• 2.3.2 高速逆流色谱分离结果
• 2.3.3 产物纯度的测定
• 2.3.4 产物结构的鉴定
• 2.4 结论
• 第三章 橘皮中多甲氧基黄酮的高速逆流色谱分离
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器及试剂
• 3.2.2 甜瓜蒂粗提物的制备
• 3.2.3 两相溶剂的选择
• 3.2.4 高效液相色谱条件
• 3.2.5 高速逆流色谱分离条件
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 溶剂体系的选择结果
• 3.3.2 高速逆流色谱分离纯化的结果
• 3.3.3 产物纯度的测定
• 3.3.4 产物结构的鉴定
• 3.4 结论
• 第四章 橘皮中川陈皮素和红橘素的含量测定及方法学研究
• 4.1 引言
• 4.2 仪器与试剂
• 4.3 方法与结果
• 4.3.1 色谱条件
• 4.3.2 溶液的制备
• 4.3.3 线性关系考察
• 4.3.4 精密度试验
• 4.3.5 重复性试验
• 4.3.6 稳定性试验
• 4.3.7 加样回收率实验
• 4.4 结论
• 第五章 橘皮中多甲氧基黄酮的提取工艺研究
• 5.1 引言
• 5.2 仪器与试剂
• 5.3 方法与结果
• 5.3.1 川陈皮素和红橘素的HPLC测定
• 5.3.2 样品的制备和测定
• 5.3.3 微波辅助提取单因素试验
• 5.3.4 优化微波提取工艺的正交试验
• 5.3.5 验证试验
• 5.3.6 与传统提取工艺比较
• 5.4 结论
• 第六章 橘皮中多甲氧基黄酮的分离纯化工艺研究
• 6.1 仪器与试剂
• 6.2 供试样品的制备
• 6.3 大孔树脂的预处理
• 6.4 树脂的水分测定
• 6.5 静态试验筛选树脂
• 6.5.1 树脂静态吸附性能的比较
• 6.5.2 树脂静态解吸附性能的比较
• 6.6 AB-8树脂动态吸附条件的优化
• 6.6.1 上样液浓度对树脂吸附率的影响
• 6.6.2 上样流速对树脂吸附率的影响
• 6.6.3 乙醇浓度对树脂解吸率的影响
• 6.7 本章小结
• 第七章 多甲氧基黄酮软胶囊的制备及处方工艺研究
• 7.1 引言
• 7.2 仪器与试剂
• 7.3 方法与结果
• 7.3.1 主药含量的确定
• 7.3.2 分散介质的选择
• 7.3.3 助悬剂的筛选
• 7.3.4 润湿剂的筛选
• 7.4 结论
• 总结与展望
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 硕士期间已发表的论文