葡萄籽中化学成分的提取分离及结构鉴定

论文摘要

葡萄籽为葡萄科植物葡萄的种子。近年来,很多报道发现葡萄籽具有较高的营养价值和医疗用途,在美国、日本等国家已被广泛研究利用,并开发成保健食品和药品。但是我国对葡萄籽的研究才刚刚起步,因此对葡萄籽的研究有着广阔的空间。本课题在前人研究的基础上,采用二氧化碳超临界流体萃取法提取葡萄籽中的油脂类成分,对影响提取率的工艺参数进行了单因素试验和正交试验的考察,确定了最佳提取工艺。对脱脂后的葡萄籽进行了蛋白质和原花青素类成分的提取,通过单因素试验和正交试验的考察确定了最佳提取工艺。采用紫外-可见分光光度法测定了蛋白质和原花青素的含量。同时我们又对葡萄籽中的多酚类成分进行了研究,在应用大孔吸附树脂法对其进行初步分离的基础上,通过聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱等手段分离出四个单体化合物,根据理化鉴别和常数测定,并结合MS、UV、IR、NMR等波谱分析,依次鉴定为对羟基苯甲酸、没食子酸、儿茶素和齐墩果酸。本课题的研究探索出了一条从葡萄籽中提取油脂类成分、蛋白质及多酚类成分的科学的可行的技术路线,同时为葡萄籽药材标准的制定及相关制剂质量标准的制定提供了科学的依据,为更深入探索葡萄籽中的功效成分奠定了基础。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 文献综述
• 实验部分
• 1 材料与仪器
• 1.1 材料
• 1.1.1 药材来源
• 1.1.2 药材鉴定
• 1.2 试剂与试药
• 1.3 仪器与设备
• 2 实验方法
• 2流体萃取葡萄籽油'>2.1 超临界CO₂流体萃取葡萄籽油
• 2.1.1 单因素试验的考察
• 2.1.1.1 粉碎度对葡萄籽油萃取率的影响
• 2.1.1.2 水分对葡萄籽油萃取率的影响
• 2.1.1.3 压力对葡萄籽油萃取率的影响
• 2.1.1.4 温度对葡萄籽油萃取率的影响
• 2.1.2 正交试验的考察
• 2.2 脱脂后葡萄籽中蛋白质的提取
• 2.2.1 盐提法提取脱脂后葡萄籽中的蛋白质
• 2.2.1.1 单因素试验的考察
• 2.2.1.1.1 NaCl溶液浓度对蛋白质提取率的影响
• 2.2.1.1.2 料液比对蛋白质提取率的影响
• 2.2.1.1.3 温度比对蛋白质提取率的影响
• 2.2.1.1.4 时间比对蛋白质提取率的影响
• 2.2.1.2 正交试验的考察
• 2.2.2 碱提等电点沉淀法提取脱脂后葡萄籽中的蛋白质
• 2.2.2.1 单因素试验的考察
• 2.2.2.1.1 NaOH溶液浓度对蛋白质提取率的影响
• 2.2.2.1.2 料液比对蛋白质提取率的影响
• 2.2.2.1.3 温度对蛋白质提取率的影响
• 2.2.2.1.4 时间对蛋白质提取率的影响
• 2.2.2.2 正交试验的考察
• 2.3 葡萄籽中原花青素的提取
• 2.3.1 溶剂种类对原花青素提取率及纯度的影响
• 2.3.2 溶剂浓度对原花青素提取率及纯度的影响
• 2.3.3 料液比对原花青素提取率及纯度的影响
• 2.3.4 温度对原花青素提取率及纯度的影响
• 2.3.5 时间对原花青素提取率及纯度的影响
• 2.4 葡萄籽中多酚类成分的提取分离及结构鉴定
• 2.4.1 多酚类成分的提取
• 2.4.2 分离与纯化
• 2.4.2.1 有机溶剂分离法
• 2.4.2.2 大孔吸附树脂法
• 2.4.2.3 Fr.c的分离与纯化
• 2.4.2.4 Fr.c18～27流份的分离与纯化
• 2.4.2.5 Fr.c31～39流份的分离与纯化
• 2.4.2.6 Fr.d的分离和纯化
• 结果和分析
• 1 CO2超临界流体萃取葡萄籽油
• 1.1 单因素试验的考察
• 1.1.1 粉碎度对葡萄籽油萃取率的影响
• 1.1.2 水分对葡萄籽油萃取率的影响
• 1.1.3 压力对葡萄籽油萃取率的影响
• 1.1.4 温度对葡萄籽油萃取率的影响
• 1.2 正交试验的考察
• 2 脱脂后葡萄籽中蛋白质的提取
• 2.1 盐提法提取脱脂后葡萄籽中的蛋白质
• 2.1.1 单因素试验的考察
• 2.1.1.1 NaCl溶液浓度对蛋白质提取率的影响
• 2.1.1.2 料液比对蛋白质提取率的影响
• 2.1.1.3 温度对蛋白质提取率的影响
• 2.1.1.4 时间对蛋白质提取率的影响
• 2.1.2 正交试验的考察
• 2.2 碱提等电点沉淀法提取脱脂后葡萄籽中的蛋白质
• 2.2.1 单因素试验的考察
• 2.2.1.1 NaOH溶液浓度对蛋白质提取率的影响
• 2.2.1.2 料液比对蛋白质提取率的影响
• 2.2.1.3 温度对蛋白质提取率的影响
• 2.2.1.4 时间对蛋白质提取率的影响
• 2.2.2 正交试验的考察
• 3 葡萄籽中原花青素的提取
• 3.1 溶剂种类对原花青素提取率及纯度的影响
• 3.2 溶剂浓度对原花青素提取率及纯度的影响
• 3.3 料液比对原花青素提取率及纯度的影响
• 3.4 温度对原花青素提取率及纯度的影响
• 3.5 时间对原花青素提取率及纯度的影响
• 4 葡萄籽中多酚类成分的提取分离及结构鉴定
• 4.1 化合物Ⅰ
• 4.2 化合物Ⅱ
• 4.3 化合物Ⅲ
• 4.4 化合物Ⅳ
• 讨论
• 致谢
• 参考文献
• 附录