论文摘要
本文对顺序注射固定化酶化学发光法测定葡萄糖进行了研究,制备了使用寿命长、性能稳定并且制作简单的固定化酶反应器,并与顺序注射化学发光分析法相结合,实现了分析操作的自动化,成功测定了血浆和尿液中的葡萄糖。论文第一章首先分别介绍了顺序注射和化学发光分析法的原理、特点及应用进展,然后介绍了固定化酶的固定化方法、常用的载体材料、固定化酶反应器的类型,以及顺序注射化学发光联用技术,最后提出本文工作的设计思想。论文第二章介绍了固定化酶反应器的制备方法,并应用于顺序注射化学发光分析法测定血浆和尿液中的葡萄糖。基于聚二甲基硅氧烷(PDMS)的自然粘接特性,制备了一种流阻低、比表面积大的双层固定化酶微粒的固定化酶反应器;设计了顺序注射固定化酶化学发光法联用流路,采用单因素法优化了进样顺序、试剂体积和浓度、进样体积、流速、停流时间等实验参数。方法的线性范围和检出限分别为2.5×10-5~7.0×10-4mol L-1、3.7×10-6mol L-1 (3σ),对5.0×10-4mol L-1的葡萄糖溶液进行11次测定的相对标准偏差为1.2%,携出率小于5%,分析通量为63样/h。成功测定了血浆和尿液试样中的葡萄糖,回收率为96.7%-104.4%。第三章对制作的固定化酶反应器的特点以及建立的分析方法进行了总结和展望。
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