丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用

论文摘要

背景及目的乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发生率在世界范围内仍呈上升趋势,居女性癌死亡率的第一位。我国乳腺癌的发生率约为18.7/100,000,低于发达国家（80/100,000）,但我国乳腺癌发生率增加速度（3%～5%）明显高于世界平均水平（1.5%）。目前,肿瘤的三大常规治疗方法（手术、放疗和化疗）虽然已经取得了长足进展,但各自又面临着自身无法克服的缺陷。因此,研究恶性肿瘤新的治疗措施是肿瘤学工作者关注的热点课题之一。丁酸钠（sodium butyrate,NaB）是短链脂肪酸丁酸的钠盐,对肝癌、胃癌、大肠癌、黑色素瘤、卵巢癌、脑胶质细胞瘤等多种肿瘤细胞均具有抑制细胞增殖并诱导细胞分化的作用。但未见丁酸钠在体内外对乳腺癌作用的研究报道。因此,本研究在体外观察丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用,为丁酸钠在乳腺癌治疗中的应用提供理论和实验依据。材料与方法1.乳腺癌细胞株MCF-7细胞购于中国科学院细胞库。MCF-7细胞接种于含10%胎牛血清（fetal bovine serum,FBS）的DMEM培养液中,于37℃,5%CO2培养箱中培养。2.取对数生长期MCF-7细胞接种于24孔板,同步化24 h后分为4组,即对照组（含10%胎牛血清的DMEM培养液培养）和不同浓度丁酸钠（2.5 mmol/L、5mmol/L和10 mmol/L）实验组。通过细胞计数观察丁酸钠对MCF-7细胞生长速度的影响,并计算倍增时间。3.取对数生长期MCF-7细胞接种,同步化24 h后分为对照组和5 mol/L丁酸钠实验组。采用倒置显微镜观察细胞形态变化;通过平板克隆实验观察克隆形成的变化;采用流式细胞术观察细胞周期分布和细胞凋亡的变化;采用琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA“断裂”的变化。4.统计学分析:使用SPSS11.5统计学分析软件包进行数据处理。两均数的比较用t检验,多个均数的比较用方差分析,两个样本率的比较用χ2检验。检验水准为α=0.05。结果1.丁酸钠对MCF-7细胞生长速度和倍增时间的影响:与对照组相比,随着丁酸钠浓度增加和处理时间延长,MCF-7细胞生长速度减慢,倍增时间延长（对照组、2.5 mmol/L、5 mmol/L和10 mmol/L丁酸钠处理的MCF-7细胞倍增时间分别为29.9h、62.3h、164.2h和301.0h）。2.丁酸钠对MCF-7细胞克隆形成的影响:对照组和丁酸钠（5mmol/L）处理24h的MCF-7细胞克隆形成数量分别为72.00±6.27和16.70±4.66个。丁酸钠处理的MCF-7细胞克隆形成数量明显减少,差别有统计学意义（P＜0.05）。3.丁酸钠对MCF-7细胞细胞周期的影响:对照组G1期、S期和G2/M期细胞比例分别为51.50±1.10%、38.10±0.27%和10.40±1.00%,实验组细胞G1期、S期和G2/M期细胞比例分别为82.00±0.62%、12.90±0.5%和5.10±0.23%。与对照组相比,丁酸钠处理的MCF-7细胞出现明显的G1期阻滞,S期和G2/M期细胞比例显著减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。4.丁酸钠对MCF-7细胞形态的影响:与对照组相比,丁酸钠处理的MCF-7细胞,细胞逐渐收缩变圆,细胞核变小,24h后细胞核染色质凝集成块并出现边集,出现漂浮细胞。随着时间的延长,出现上述改变的细胞增多。而对照组细胞无明显变化。5.丁酸钠对MCF-7细胞凋亡的影响:流式细胞术分析结果显示对照组MCF-7细胞凋亡率为0.14%,实验组MCF-7细胞凋亡率为19.78%。实验组与对照组相比凋亡明显增加,差别有统计学意义（P＜0.05）。6.丁酸钠对MCF-7细胞DNA的影响:琼脂糖凝胶电泳检测,与对照组相比,实验组细胞出现明显的DNA“梯子”样断裂变化。结论1.丁酸钠处理的MCF-7细胞生长速度减慢,倍增时间延长,克隆形成减少,出现明显的G1期阻滞,S期和G2/M期细胞比例显著减少。表明丁酸钠可抑制乳腺癌细胞MCF-7的生长。2.丁酸钠处理的MCF-7细胞细胞核变小,核染色质浓集,凋亡率增加,并出“梯子”样DNA断裂。表明丁酸钠可诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡。3.为丁酸钠在乳腺癌治疗中的应用提供了初步的理论和实验依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文部分 丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 丁酸钠抗肿瘤作用研究进展
• 参考文献
• 中英文缩写词
• 3年发表的论文、专著和教研成果
• 致谢