肠型放射病小鼠模型中小肠细胞死亡类型的鉴定和修饰性p53蛋白的表达研究

论文摘要

目的：放射治疗是肿瘤治疗的三大主要手段之一，其中70%的恶性肿瘤可以进行放射治疗。在许多腹腔恶性肿瘤放疗过程中病人会出现肠道症状，如腹泻、消化不良等，这是放疗对肠道正常细胞的损伤引起的副作用。这种副作用的存在极大地影响了放疗的进行和病人的康复。再者，目前没有有效的药物救治核泄漏事故中的肠型放射病。通过对照射后肠道细胞死亡形式及其机制的研究，寻找相应的救治措施，提高对正常组织的保护，以期提高放射治疗的疗效和救治肠型放射病。方法：小鼠接受15Gy全身照射后，观察记录小鼠的生存，绘制生存曲线；在照后指定的时间点处死小鼠，取出回肠，观察结肠粪便形成、HE染色以及透射电镜等形态学指标；免疫荧光法分析活性氧（ROS）的水平；ELISA法测定谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮（NO）、过氧化氢（H2O2）以及超氧化物歧化酶（SOD）的水平；免疫印迹法分析Caspase-3，LC3B以及p53的磷酸化、乙酰化水平；免疫荧光法分析HMGB1；酶联免疫法测定血清中的IL-6水平。结果：照后小鼠回肠中活性氧明显增加，而氧化指标（GSH, NO, H2O2, SOD）却没有明显改变。通过形态学以及生化指标反映：在15Gy全身照射后的小鼠回肠中均显示出凋亡、坏死以及自噬的特征。剪切的Caspase-3（凋亡标志物）的出现，LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ（自噬标志物）的转换，血清IL-6的分泌以及HMGB1（坏死标志物）的表达。此外，在15Gy照后出现p53基因379位赖氨酸的乙酰化以及第6、20、392位的丝氨酸的磷酸化，这种现象在照后2小时后消失。结论：在照射后的肠道细胞的死亡不应被视为单一的死亡形式，而应该是一种“混合型死亡”。放疗中的同步治疗药物如能促进p53基因379位赖氨酸的乙酰化以及第6、20、392位的丝氨酸的磷酸化，则可能降低放疗后肠道细胞的死亡。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 辐射损伤诱导的胃肠综合症模型的建立
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 辐射损伤后动物模型体内活性氧、氧化指标的改变及肠上皮细胞死亡类型的鉴定研究
• （一）辐射损伤对动物模型体内活性氧的产生及氧化指标的影响
• （二）辐射损伤后肠上皮细胞的凋亡
• （三）辐射损伤后肠上皮细胞的坏死
• （四）辐射损伤后肠上皮细胞的自噬
• 第三部分 辐射损伤后肠上皮细胞死亡的作用机制研究
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 发表论文及其他
• 致谢