论文摘要
小分子配体与蛋白质相互作用的研究是化学生物学的重要研究内容。血清白蛋白是血浆中含量最丰富的蛋白质,可以广泛地和许多内源性及外源性物质结合,在体内起着储存和转运作用。研究药物、毒性物质等小分子配体与血清白蛋白的相互作用,在药代动力学和毒理学上具有重要意义。该领域己成为从事生命科学、化学和临床医学科研工作者共同关注的课题之一。本文利用分子光谱法对食用合成色素、药物与血清白蛋白间的作用机理进行了研究探讨,共分以下五部分:第一章:综述了荧光光谱法研究小分子配体与蛋白质相互作用的研究内容,并介绍了两种配体与蛋白质结合的相互竞争的条件及研究进展,在此基础上提出本文的选题思路和研究内容,共引用参考文献52篇。第二章:荧光光谱法研究食用合成色素与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。在pH=7.40 Tris–HCl缓冲溶液中,柠檬黄（TTZ）、日落黄（SY）及赤藓红（ETS）三种食用合成色素与BSA形成非共价复合物,导致BSA的内源性荧光发生静态猝灭;它们与BSA的结合能力依次为:ETS > TTZ > SY,体系的Hill系数稍大于1。计算体系热力学参数表明三种食用色素与BSA结合的作用力主要是氢键和范德华力。应用标记竞争试验确定了三种食用合成色素在BSA中的结合位置主要位于亚结构域ⅡA（位点Ⅰ）,并根据F?rster偶极-偶极非辐射能量转移机理计算了食用合成色素与BSA的结合距离r值均小于7 nm。第三章:荧光光谱法研究食用合成色素对诺氟沙星（NFLX）与牛血清白蛋白结合的影响。食用合成色素TTZ、SY和ETS及NFLX都能猝灭牛血清白蛋白（BSA）的荧光。NFLX与BSA间的作用力主要是静电作用力,结合位置也主要位于亚结构域ⅡA（位点Ⅰ）。食用合成色素与NFLX共存时发生对BSA结合位点的竞争,从而造成游离型NFLX含量增加,药效改变。根据F?rster非辐射能量转移理论,研究了食用合成色素对NFLX与BSA之间的结合距离r的影响,结果表明色素的存在使r值增大。第四章:荧光光谱法研究食用合成色素对盐酸环丙沙星（CPFX）与牛血清白蛋白结合的影响。CPFX与BSA间的作用力主要是静电作用力,结合位置主要位于位点Ⅰ即亚结构域ⅡA。食用合成色素的存在影响CPFX与BSA之间的结合常数和结合距离,并且这种影响与食用合成色素的浓度和结合力有关,从而致使血液中游离的CPFX浓度增加,药效改变。第五章:荧光光谱法研究不同温度时头孢噻肟钠（CTX）和氯霉素（CHL）与牛血清白蛋白的相互作用。在pH=7.40 Tris–HCl缓冲溶液中,CTX、CHL对BSA荧光的猝灭反应皆为静态猝灭过程。标记竞争实验表明CTX、CHL在BSA中的结合位置主要位于位点Ⅰ。在BSA–CTX（或BSA–CHL）体系中再加入CHL（或CTX）时,可使BSA的荧光进一步猝灭,结合常数减小,且三元体系的Hill系数均小于1,表明一种药物的存在将影响另一种药物与BSA的结合,两种药物之间具有负协同作用。并用热力学参数确定了药物与BSA之间主要为静电作用力。