抗人转铁蛋白受体单克隆抗体增强姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌抑制效应的实验研究

论文摘要

目的了解姜黄素在体外对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的抑制效应。方法采用不同浓度的姜黄素（6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L）作用于雄激素非依赖性前列腺癌细胞,MTT法检测姜黄素对细胞生长活性的影响。然后分别采用CFSE染色、Annexin V-PI染色和PI染色法,使用流式细胞仪分析姜黄素对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果MTT结果显示6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L四个浓度的姜黄素处理24小时后,PC-3细胞的活性未受显著影响；而100μmol/L的姜黄素则对PC-3细胞产生显著的细胞毒性作用。50μmol/L的姜黄素作用后,PC-3细胞的增殖指数从7.08±0.20降到4.38±0.19（P<0.05）；凋亡率从（5.34±0.96）%提高到（21.53±2.87）%（P<0.05）；G2/M期细胞比例由（34.27±1.87）%上升到（57.29±1.91）%（P<0.05）。结论姜黄素能在体外显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡并导致细胞周期的阻滞。目的明确姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞内信号通路活性的影响,探讨姜黄素抗瘤效应产生的可能机制。方法采用荧光素酶报告基因系统检测姜黄素在体外对核因子-кB (NF-кB、激活蛋白-1（AP-1）.Elkl.CHOP和CREB五个信号通路的影响,以带有荧光素酶报告基因的质粒（pNF-κB-Luc,pAP-1-Luc,pElk1-Luc,pCHOP-Luc,pCREB-Luc）转染PC-3细胞,姜黄素干预后,检测荧光素酶活性。结果荧光素酶活性检测结果显示,姜黄素能在体外显著抑制NF-кB和AP-1两个细胞内信号通路的活性（P<0.05）,而对Elkl、CHOP和CREB三个信号通路的活性影响不明显。结论姜黄素可能通过抑制NF-кB和AP-1信号通路发挥抑癌效应。目的检测抗人转铁蛋白受体单克隆抗体（TfR mAb）对雄激素非依赖性前列腺癌细胞生物学行为的影响,了解抗人TfR mAb对姜黄素抗瘤作用的增强效应。方法利用杂交瘤细胞株制备抗人TfR mAb,分别采用CFSE染色、AnnexinⅤ-PI染色和PI染色法检测抗人TfR mAb对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。采用FITC标记的鼠抗人TfR mAb检测姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞表面转铁蛋白受体表达的影响。采用流式细胞仪进一步检测抗人TfR mAb联合姜黄素对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果抗人TfR mAb对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期无显著影响（P>0.05）。姜黄素能够显著上调雄激素非依赖性前列腺癌细胞表面TfR表达（P<0.05）。抗人TfRmAb可显著增强姜黄素对PC-3细胞凋亡的诱导作用（P<0.05）,而不影响姜黄素对PC-3细胞增殖和细胞周期的影响（P>0.05）。结论姜黄素可导致雄激素非依赖性前列腺癌细胞表面转铁蛋白受体表达增高。抗人TfR mAb单独作用对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的生物学行为无显著影响,但抗人TfR mAb可以增强姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的凋亡效应。

论文目录

• 前言
• 参考文献
• 中文摘要
• Abstract
• 第一部分 姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌体外抑制效应的研究
• 1.1 前言
• 1.2 材料
• 1.3 方法
• 1.4 结果
• 1.5 讨论
• 参考文献
• 第二部分 姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞内信号通路活性的影响
• 2.1 前言
• 2.2 材料
• 2.3 方法
• 2.4 结果
• 2.5 讨论
• 参考文献
• 第三部分 抗人转铁蛋白受体单克隆抗体增强姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌的抑制效应
• 3.1 前言
• 3.2 材料
• 3.3 方法
• 3.4 结果
• 3.5 讨论
• 参考文献
• 小结
• 综述 姜黄素抗前列腺癌的研究进展
• 附录
• 致谢