乳酸菌抗氧化特性与耐酸耐胆盐特性的研究

论文摘要

乳酸菌在发酵过程中能产生超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶及NADH氧化酶，这使得乳酸菌具有防癌能力及提高机体免疫力的能力。含有乳酸菌的微生态制剂在养殖业、乳制品及医药等方面有着广泛的应用。本文重点研究三株乳酸菌的抗氧化性及耐胆盐、耐酸特性。本实验研究超声波破粹仪处理的样品与未处理样品的抗氧化性。首先，采用脱氧核糖氧化法测定各样品对·OH的消除率。在60mmol/L2-脱氧-D-核糖的体系中，菌株1以处理的发酵液对·OH的消除率最强，最高消除率为83.4%，其他两株菌在本实验中对·OH无清除作用。再次，采用邻苯三酚氧化法测定各样品对O2·的消除率。在2.5mmol/L邻苯三酚的体系中，菌株1、菌株5、菌株34分别以处理的菌体、处理的发酵液及未处理的菌体对O2·的消除率最高，最高消除率分别为96.5%、86.3%及88.8%。在0.12mmol/L DPPH的体系中，菌株1、菌株5、菌株34分别以处理的上清液、未处理的菌体及未处理的菌体对DPPH的消除率最高，最高消除率分别为82.8%、92.6%及70.4%。在抗脂质过氧化性方面，以5%亚油酸为脂质，测定各样品对亚油酸的抑制率。菌株1、菌株5、菌株34都以处理的菌体对亚油酸的抑制率最高，且抑制率分别为5.6%、10.1%及7.0%。在5%DTNB体系中，菌株1、菌株5、菌株34的无细胞提取物内TTG含量分别为5.0×10-6mol/L，6.6×10-6mol/L及3.4×10-6mol/L。采用SOD试剂盒、GSH-PX试剂盒分别测定样品内的SOD、GSH-PX含量。菌株1、菌株5、菌株34都以上清液内SOD含量最高，最高含量分别为3.05U、3.65U及3.28U；菌株1、菌株5、菌株34分别以菌体、菌体及上清液内GSH-PX含量最高，且最高含量分别为194.52U、124.68U及49.71U。菌株1、菌株5、菌株34在含100μg/mL胆固醇与0.3%牛胆汁的改良MRS培养基中，对胆固醇的去除率分别为41.67%、17.67%及2.65%。在模拟耐酸环境中，菌株5强于其他两株菌，在pH值为2的MRS培养基中，5h后菌株5的菌落数为9×108CFU/mL；在模拟耐胆盐环境中，菌株34强于其他两株菌，在0.4%胆盐的实验组，5h后菌株34的菌落为6.5×108CFU/mL。这两数值均高于菌株发挥有益作用的临界值（1.0×106CFU/mL）。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 术语与缩略词
• 目录
• 文献综述
• 1 益生菌
• 1.1 益生菌的定义
• 1.2 益生菌的种类
• 1.3 益生菌的生理功能
• 1.3.1 益生菌的耐酸性
• 1.3.2 益生菌的耐胆盐性
• 2 微生态制剂
• 2.1 微生态制剂的定义
• 2.2 微生态制剂的种类
• 2.3 微生态制剂的作用机理
• 2.4 微生态制剂的应用
• 3 乳酸菌
• 3.1 乳酸菌的定义概述
• 3.2 乳酸菌的抗氧化活性
• 2-.）的清除'>3.2.1 乳酸菌对超氧阴离子自由基（O₂-.）的清除
• 3.2.2 乳酸菌对羟自由基（·OH）的清除
• 3.2.3 乳酸菌的抗脂质过氧化性
• 3.3 乳酸菌的降胆固醇能力
• 3.4 乳酸菌的应用
• 3.4.1 乳酸菌与乳制品
• 3.4.2 乳酸菌与饲料添加剂
• 3.4.3 乳酸菌与其他产品
• 4 乳酸菌的发展前景
• 4.1 菌种变异
• 4.2 产品类型
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 菌株
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 仪器设备
• 2.1.4 试剂
• 2.1.5 主要试剂的配制
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 菌株的活化及种子液的制备
• 2.2.2 无细胞提取物的制备
• 2.2.3 清除羟自由基（·OH）能力的测定
• 2·）能力的测定'>2.2.4 消除超氧自由基（O₂·）能力的测定
• 2.2.5 消除自由基 DPPH 能力的测定
• 2.2.6 抗亚油酸氧化抑制的测定
• 2.2.7 TTG 含量的测定
• 2.2.8 蛋白浓度测定-Lowry 法
• 2.2.8.1 蛋白质标准曲线的绘制
• 2.2.8.2 Lowry 法测蛋白浓度
• 2.2.9 超氧化物歧化酶（SOD）活力的测定
• 2.2.9.1 试剂的组成与配制
• 2.2.9.2 操作方法
• 2.2.9.3 总 SOD 活力计算
• 2.2.10 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力的测定
• 2.2.10.1 试剂的组成与配制
• 2.2.10.2 操作方法
• 2.2.10.3 总 GSH-Px 活力计算
• 2.2.11 总胆固醇量的测定
• 2.2.11.1 试剂组成成份
• 2.2.11.2 操作方法
• 2.2.11.3 总胆固醇含量计算
• 2.2.12 体外降胆固醇能力的测定
• 2.2.13 菌体耐胆盐能力的测定
• 2.2.14 菌体耐酸性能力的测定
• 3 结果与分析
• 3.1 菌株的抑菌作用
• 3.2 BSA 标准品的标准曲线
• 3.3 不同样品清除羟自由基（·OH）的能力
• 2·）能力'>3.4 消除超氧自由基（O₂·）能力
• 3.5 消除自由基 DPPH 能力
• 3.6 对亚油酸反应抑制能力
• 3.7 无细胞提取物内 TTG 含量
• 3.8 SOD 活性
• 3.9 GSH-Px 活性
• 3.10 菌株降胆固醇
• 3.12 菌体耐酸性
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介
• 在读期间发表的学术论文