论文摘要
目的：研究羟基喜树碱（HCPT）对体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞系HXO-RB44增殖的影响及其诱导HXO-RB44细胞凋亡的作用，并初步探讨其影响细胞增殖和诱导细胞凋亡的机制。方法：体外培养HXO-RB44细胞系，定期传代换液。各实验中HCPT均选取10-5，10-4，10-3，10-2，10-1mg／ml五个药物浓度，并设空白对照组。采用MTT法检测羟基喜树碱对HXO-RB44细胞生长的抑制作用。采用流式细胞仪定量检测HCPT处理24h后细胞周期的改变及细胞凋亡的百分率。采用Western blot免疫印迹技术检测HCPT处理24h后细胞内bcl-2蛋白表达水平的变化。结果：羟基喜树碱在一定浓度范围内(10-5mg／ml，10-4mg／ml，10-3mg／ml，10-2mg／ml，10-1mg／ml)能够抑制HXO-RB44细胞的生长，将细胞周期阻滞在S期，具有时间、剂量依赖性。流式细胞仪检测不同浓度的羟基喜树碱10-5mg／ml，10-4mg／ml，10-3mg／ml，10-2mg／ml，10-1mg／ml作用24小时后细胞凋亡率分别为5.67±1.65％，10.09±1.03％，12.39±0.82％，48.54±1.27％，18.82±0.96％。Dunnett-t检验均与对照组差异有统计学意义（p＜0.05）。Western blot免疫印迹检测结果表明羟基喜树碱作用24小时后，HXO-RB44细胞中bcl-2蛋白表达水平较正常对照组细胞明显下调。结论：羟基喜树碱能够抑制HXO-RB44细胞的增殖，其抑制细胞增殖作用具有时间和浓度依赖性，且羟基喜树碱是通过将细胞阻滞在细胞周期的S期而起到抑制HXO-RB44细胞增殖的作用；羟基喜树碱可以诱导HXO-RB44细胞凋亡，其诱导凋亡作用与下调细胞内bcl-2蛋白表达有关。