金雀异黄素抑制人结肠癌细胞增殖及分子机制研究

论文摘要

目的:观察金雀异黄素（Genistein,GEN）对体外培养人结肠癌细胞系（SW-480）细胞增殖抑制作用,探讨GEN抗肿瘤作用机制。 方法:体外培养人结肠癌细胞系（SW-480）细胞,MTT比色法测定GEN对SW-480细胞增殖抑制作用。细胞计数法测定GEN对SW-480细胞生长的影响:PI染色流式细胞术（FCM）分析GEN作用后的细胞周期分布和凋亡率;免疫细胞化学SP法检测GEN对SW-480细胞NF-κB、Bcl-2、Bax、COX2蛋白表达的影响;Western blot检测GEN对ERK1/2磷酸化水平的影响。 结果: 1.MTT比色法测定结果显示,GEN （6.25、12.5、25、50、100μmol/L）对体外培养SW480细胞具有抑制增殖作用,呈剂量的依赖性（p<0.05）。 2.细胞计数法测定显示,GEN 50μmol/L对SW480细胞24h其抑制率为28%,48h其抑制率为50%,第6天其抑制率为86%。对SW480细胞增殖抑制作用呈时间依赖性。 3.流式细胞术分析显示GEN作用于SW480细胞,出现G2/M期阻滞。 4.免疫细胞化学法检测结果显示,GEN50、100μmol/L对SW480细胞,对照组bcl-2、NF-κB、COX表达呈强阳性,而处理组呈阴性或弱阳性,阳性率明显降低,处理组平均灰度值较对照组明显高（p<0.05）。对照组Bax呈阴性或弱阳性,而处理组呈强阳性,阳性率明显增加,处理组平均灰度值较对照组明显低（p<0.05）。 5.Western Blot结果显示:6.25、12.5、25、50、100;XXμmol/L的GEN处理SW480细胞,呈浓度依赖性抑制人结肠癌细胞ERK1/2蛋白磷酸化。（P<0.05）。 结论: 1.金雀异黄素对人结肠癌细胞系（SW-480）细胞增殖具有抑制作用。

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