论文摘要
第一部分低氧环境下丙泊酚对新生大鼠学习记忆功能的影响目的:探讨低氧环境下丙泊酚对新生大鼠学习记忆功能的影响。方法:健康SD大鼠48只,日龄7 d,按照随机数字表法分为6组（n=8）:丙泊酚低氧组（PH组）、丙泊酚空气组（PA组）和丙泊酚纯氧组(（PO组）分别腹腔注射丙泊酚50 mg/kg,1次/d,连续7 d;脂肪乳低氧组（CH组）、脂肪乳空气组（CA组）和脂肪乳氧气组（CO组）腹腔注射脂肪乳5.0 ml/kg,1次/d,连续7 d。每次注射完毕后分别放于低氧（18% O2）、空气和纯氧环境中,待翻正反射恢复后放回鼠笼。记录给药后SaO2和RR。给药后2周进行Morris水迷宫实验,测试学习记忆功能。结果:与CO组比较,PO组RR降低,水迷宫测试的前两天逃逸潜伏期明显延长（P <0.05）;与CA组比较,PA组RR和SaO2降低,逃逸潜伏期延长,穿越原平台区次数明显减少（P <0.05）;与CH组比较,PH组RR和SaO2降低,逃逸潜伏期延长,穿越原平台区次数明显减少（P <0.05）;与PO组比较,PA组和PH组SaO2降低,逃逸潜伏期明显延长,穿越原平台区次数减少（P <0.05）。CO组、CA组和CH组上述各指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论:单独丙泊酚可引起新生大鼠短期的学习和记忆功能下降;合并低氧则引起较长时间的学习和记忆功能下降。第二部分低氧环境下丙泊酚导致新生大鼠海马神经细胞凋亡的病理改变目的:探讨低氧环境下丙泊酚对新生大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法:实验分组和处理同第一部分,记录给药后SaO2和RR,每天给药后待翻正反射恢复后放回鼠笼。于第7天注射完毕后24 h,各组随机抽取6只大鼠,取海马组织,TUNEL染色检测海马细胞凋亡;免疫组化检测海马Caspase-3表达;透射电镜观察海马细胞超微结构变化。结果:与CO组比较,PO组RR降低（P <0.05）;与CA组比较,PA组RR和SaO2降低,凋亡指数升高,caspase-3的表达增强（P <0.05）;与CH组比较,PH组RR和SaO2降低,凋亡指数升高,caspase-3的表达增强（P <0.05）;与PO组比较,PA组和PH组SaO2降低,凋亡指数升高,caspase-3的表达增强（P <0.05）。CO组、CA组、CH组和PO组上述各指标差异无统计学意义（P>0.05）。透射电镜显示:PA组和PH组细胞体积缩小,细胞基质电子密度加深,质膜向内凹陷,细胞核固缩,凋亡明显,而CO组、CA组、CH组和PO组海马神经细胞超微结构无明显变化。结论:单独丙泊酚不导致新生大鼠海马神经细胞明显凋亡;合并低氧时,凋亡的海马神经细胞显著增多。第三部分低氧环境下丙泊酚对新生大鼠海马LTP的影响目的:探讨低氧环境下丙泊酚对新生大鼠海马长时程增强的影响。方法:实验分组和处理同第一部分,记录给药后SaO2和RR,每天给药后待翻正反射恢复后放回鼠笼。于第7天注射完毕后24 h,制备海马脑片,记录电刺激诱导的兴奋性突触后场电位（field excitatory postsynaptic potential, fEPSP）的变化和长时程增强（long-term potentiation,LTP）诱导成功率。结果:与CO组比较,PO组RR降低,fEPSPS幅度有一定下降,LTP诱导成功率降低（P<0.05）;与CA组比较,PA组RR和SaO2降低,fEPSPS幅度明显降低,LTP诱导成功率明显降低（P<0.05）;与CH组比较,PH组RR和SaO2降低,fEPSPS幅度和LTP诱导成功率也明显降低（P <0.05）;与PO组比较,PA组和PH组SaO2降低,fEPSPS幅度和LTP诱导成功率显著降低（P <0.05）;CO组、CA组和CH组上述各指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论:单独丙泊酚抑制大鼠离体海马LTP的形成;低氧环境下,丙泊酚抑制海马LTP更显著。第四部分低氧环境下丙泊酚对新生大鼠海马神经细胞Ca2+及CaMKⅡ的影响目的:探讨低氧环境下丙泊酚对新生大鼠海马神经细胞Ca2+及CaMKⅡ蛋白的影响。方法:实验分组和处理同第一部分,记录给药后SaO2和RR,每天给药后待翻正反射恢复后放回鼠笼。于第7天注射完毕后24 h,取海马组织,利用激光共聚焦测定神经细胞胞浆内Ca2+变化,Western blot检测CaMKⅡ蛋白的表达。结果:与CO组比较,PO组RR降低,海马神经细胞Ca2+内流明显,CaMKⅡ表达降低（P<0.05）;与CA组比较,PA组RR和SaO2降低,海马神经细胞Ca2+内流明显,CaMKⅡ表达降低（P<0.05）;与CH组比较,PH组RR和SaO2降低,海马神经细胞Ca2+内流明显,CaMKⅡ表达降低更显著（P<0.05）;与PO组比较,PA组和PH组SaO2降低,海马神经细胞Ca2+内流明显,CaMKⅡ表达明显降低（P <0.05）;CO组、CA组和CH组上述各指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论:单独丙泊酚致海马神经细胞Ca2+内流,CaMKⅡ表达降低;低氧环境下,Ca2+内流更明显,CaMKⅡ表达显著降低。
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