用酶法评定鸭饲料代谢能的方法学研究

用酶法评定鸭饲料代谢能的方法学研究

论文摘要

本研究根据鸭在常态条件下小肠液中消化酶酶谱的变异幅度,设计了与鸭小肠液中消化酶活性近似的人工小肠液,建立了以胃蛋白酶—人工鸭小肠液两步酶水解法估测鸭饲料代谢能值的离体评定方法,为构建我国水禽饲养标准的有效能值参数提供了现代化的测定手段。 本论文第一部分模拟鸭小肠液酶谱首先需要在克服应激条件下获得足够量的小肠液的手段,关键技术是采集食糜的T型套管设计。本试验在参照猪、牛、羊小肠套管的基础上优选出了可持续采集食糜的专用套管及配套的食糜采集的方法。结果表明,本试验设计的套管对肠道的损伤轻微,肠道与腹脂的粘连率少。试验鸭安装套管后15天内能恢复到术前体重。经套管收集的食糜量平均可达20.2ml/h。 第二部分为了获得一般生产条件下,鸭小肠液消化酶酶谱的变异幅度,就通过简单T型套管获得有代表性肠液的采样方案及日粮营养水平对鸭小肠液消化酶活性的影响进行了研究。结果表明,北京鸭在自由采食、饮水的条件下,小肠液中消化酶活性具有昼夜节律及日间变化。代表性肠液的采样方案为,采样时间为9:30~18:30,每次采集1h,每次采样后间隔3h,然后重复采样过程。一天共采集3次,隔日重复采样过程1次,共采集3天。日粮能量水平对鸭小肠液消化酶活性没有显著地影响,而蛋白质水平对小肠液中淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶有显著地影响。在一般生产条件下,北京鸭空肠液中消化酶活性的变异范围分别为:淀粉酶308.26~408.15U/ml,胰蛋白酶74.51~101.77U/ml,糜蛋白酶32.14~48.20U/ml,脂肪酶0.79~1.22U/ml,蔗糖酶5.27~5.41U/ml,麦芽糖酶24.57~30.32 U/ml。 第三部分为了确定胃蛋白酶—人工鸭小肠液的最适酶水解条件参数,就胃蛋白酶、人工鸭小肠液酶水解的温度、时间、pH等条件进行了研究。结果表明,酶水解法中,胃蛋白酶的浓度及人工肠液中酶的种类及活性可以代表鸭胃肠道中参与饲料消化的主要消化酶的生理水平。胃蛋白酶的适宜水解时间为3小时,水解温度为38℃。人工小肠液酶水解的最适pH为6.6,适宜水解时间为22小时。 第四部分为了通过酶水解物总能值(EHGE)估测鸭饲料的生物学法代谢能值,以玉米为例研究了以酶法测值估测生物学法代谢能值的数学模型。结果表明,以玉米酶法测值回归校正到鸭排空强饲法代谢能值的数学模型为:AME=2.639+0.897×EHGE(CF<2.8),AME=3.890+0.788×EHGE(CF>2.8)(P<0.01;RSD=0.166MJ/kg);TME=3.625+0.905×EHGE(CF<2.8),TME=4.950+0.792×EHGE(CF>2.8)(P<0.01;RSD=0.166MJ/Kg)。酶法AME估测值与生物学法的偏差范围为-0.353 MJ/Kg~0.343 MJ/Kg,TME的偏差范围为-0.371MJ/Kg~0.335 MJ/Kg。用酶法估测玉米的代谢能值可以达到与生物学法类似的精度。且酶法的估测精度明显地高于化学法。 第五部分以玉米为例检验了酶法估测鸭饲料代谢能值的精度及重演性。结果表明,用酶法评定鸭饲料中玉米的代谢能值具有较好的重演性及较高的精度。6种被检玉米的酶法AME估测值与生物学法实测值的偏差范围为-0.05MJ/Kg~0.303 MJ/Kg,TME为-0.065 MJ/Kg~0.294MJ/Kg。酶水解法可以达到满足生产要求的定量水平。

论文目录

  • 第一章 绪论
  • 1.1 研究目的和意义
  • 1.2 国内外研究进展
  • 1.2.1 家禽饲料有效能评定体系沿革
  • 1.2.2 家禽饲料代谢能的生物学评定方法
  • 1.2.3 对家禽饲料代谢能值评定方法中若干误区的探讨
  • 1.2.4 用酶法评定家禽饲料的代谢能值
  • 1.3 研究内容和技术路线
  • 第二章 鸭的空肠食糜连续采集方法及其空肠套管的设计
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 试验动物、日粮及饲养管理
  • 2.1.2 套管设计
  • 2.1.3 套管安装部位与过程
  • 2.1.4 护理方案
  • 2.1.5 样本瓶的制备
  • 2.1.6 食糜的采集及流量测定
  • 2.1.7 小肠分段
  • 2.1.8 统计分析
  • 2.2 结果与分析
  • 2.2.1 荷术鸭的术后健康状况及术部愈后局部的损害
  • 2.2.2 术后体重恢复状况
  • 2.2.3 套管安装位置
  • 2.2.4 食糜收集量
  • 2.3 讨论
  • 2.3.1 套管的设计及材料筛选
  • 2.3.2 套管术部的筛选
  • 2.3.3 套管的使用效果
  • 2.3.4 食糜样品保鲜
  • 2.4 小结
  • 第三章 鸭小肠液消化酶活性的昼夜节律及日粮能量蛋白比对消化酶活性的影响
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 试验动物及其管理
  • 3.1.2 试验设计及日粮组成
  • 3.2 结果与分析
  • 3.2.1 北京鸭小肠液消化酶活性的昼夜节律
  • 3.2.2 日粮能量蛋白比对北京鸭小肠液中消化酶活性的影响
  • 3.3 讨论
  • 3.3.1 北京鸭小肠液消化酶活性的变异
  • 3.3.2 典型食糜样品的采集方案
  • 3.3.3 不同能量蛋白比下北京鸭小肠液消化酶活性的变异
  • 3.4 小结
  • 第四章 胃蛋白酶—人工鸭小肠液的酶水解条件的研究
  • 4.1 材料与方法
  • 4.1.1 试验日粮
  • 4.1.2 试验设计
  • 4.1.3 酶水解参数研究
  • 4.1.4 酶水解物与未水解物的分离方法
  • 4.1.5 样品测定指标
  • 4.1.6 酶法消化率的计算
  • 4.1.7 数据分析与统计
  • 4.2 结果与分析
  • 4.2.1 胃蛋白酶水解参数的确立
  • 4.2.2 人工小肠液酶水解参数的确立
  • 4.3 讨论
  • 4.3.1 酶水解法中消化酶的组成及活性
  • 4.3.2 胃蛋白酶的水解时间与最适温度
  • 4.3.3 人工小肠液酶水解的最适pH与时间
  • 4.4 小结
  • 第五章 玉米酶法测值估测生物学法代谢能值数学模型的研究
  • 5.1 材料与方法
  • 5.1.1 试验动物及其管理
  • 5.1.2 试验设计及定标玉米
  • 5.1.3 代谢能测定方案
  • 5.1.4 实验室酶水解法操作规程
  • 5.1.5 样品侧定指标
  • 5.1.6 数据分析与统计
  • 5.2 结果与分析
  • 5.2.1 定标模拟玉米酶水解物总能值与排空强饲法AME、TME的比较
  • 5.2.2 玉米酶水解物总能值与排空强饲法AME、TME间的数学模型
  • 5.2.3 用酶法估测的玉米代谢能值与排空强饲法AME、TME的实测值比较
  • 5.3 讨论
  • 5.3.1 酶法测值与排空强饲法测值的比较
  • 5.3.2 以酶法测值为变量以排空强饲法代谢能值为依变量的数学模型建立原则及优化
  • 5.3.3 用酶法估测鸭饲料代谢能值的精度
  • 5.4 小结
  • 第六章 用酶法估测鸭饲料代谢能值的精度及重演性
  • 6.1 材料与方法
  • 6.1.1 试验动物及其管理
  • 6.1.2 试验设计及验证玉米
  • 6.1.3 代谢能测定方案
  • 6.1.4 实验室酶水解法操作规程
  • 6.1.5.样品测定指标
  • 6.1.6.数据分析与统计
  • 6.2 结果与分析
  • 6.2.1 用酶法估测的玉米鸭代谢能值的精度
  • 6.2.2 用排空强饲法测出的AME、TME值与酶水解物总能值的比较
  • 6.3 讨论
  • 6.3.1 用酶法评定鸭的玉米代谢能值的精度
  • 6.3.2 酶水解法估测生物学效价的重演性
  • 6.4 小结
  • 第七章 结论
  • 7.1 结论
  • 7.2 有待深入研究的领域
  • 7.3 本研究创新之处
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简历
  • 相关论文文献

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