罗格列酮通过PI3K/Akt通路促进人子宫肌瘤细胞的凋亡

论文摘要

【目的】观察过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ）激动剂罗格列酮体对人子宫肌瘤细胞的增殖和凋亡的影响以及雌激素受体和凋亡基因Bad和p21表达的影响，并进一步探讨磷脂酰肌醇-3激酶/丝/苏氨酸激酶（phosphatidylinositol-3kinase/serine/threonine kinase, PI3K/Akt）信号通路在其中的作用，为临床应用PPARγ激动剂治疗子宫肌瘤的可能性提供实验依据。【方法】１．原代培养人子宫平滑肌瘤细胞并鉴定。２．用不同浓度的罗格列酮(10-8、10-7和10-6mol/L)处理原代培养的人子宫肌瘤细胞24、48和72h。采用MTT法测定细胞生长曲线，流式细胞术测定细胞凋亡。３．雌激素受体激动剂雷洛昔芬和PI3K/Akt信号通路特异性激动剂胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor-1, IGF-1）预处理30分钟后，同前法测定细胞生长曲线和细胞凋亡，放射免疫法测定培养液中雌二醇水平，实时定量PCR和Western Blot分别检测雌激素受体α、β mRNA和蛋白的表达。采用Western Blot检测Akt、磷酸化Akt（phosphorylationAkt, p-Akt）、Bad和p21蛋白的表达。【结果】１．与对照组比较，罗格列酮(10-8、10-7和10-6mol/L)处理48和72小时后，以浓度和时间依赖的方式抑制了子宫肌瘤细胞的增殖（均P＜0.05）；罗格列酮(10-8、10-7和10-6mol/L)处理24小时，对子宫肌瘤细胞的增殖没有显著性影响（均P＞0.05）；罗格列酮(10-8、10-7和10-6mol/L)处理72小时，以浓度依赖的方式促进了子宫肌瘤细胞的凋亡（均P＜0.05）。２．与对照组比较，罗格列酮(10-8、10-7和10-6mol/L)处理72小时，以浓度依赖的方式降低了子宫肌瘤细胞雌二醇的分泌和雌激素受体α、β mRNA和蛋白的表达（均P＜0.05）。而在用雌激素受体激动剂雷洛昔芬预处理30分钟后，罗格列酮抑制子宫肌瘤细胞增殖和促进子宫肌瘤细胞凋亡的作用部分消除（均P＜0.05）。３．与对照组比较，罗格列酮(10-6mol/L)处理子宫肌瘤细胞72小时， p-Akt蛋白含量显著性降低（P＜0.05）。应用PI3K/Akt通路特异性激动剂IGF-1，可以消除罗格列酮抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的作用，同时消除了罗格列酮对雌激素受体表达的影响（均P＜0.05）。４．与对照组比较，罗格列酮(10-6mol/L)处理子宫肌瘤细胞72小时均显著性增加了Bad和p21蛋白的表达（均P＜0.05）。【结论】1. PPARγ激动剂罗格列酮他通过降低子宫肌瘤细胞雌二醇的分泌抑制子宫肌瘤细胞的增殖，促进了子宫肌瘤细胞的凋亡。2.罗格列酮通过PI3K/Akt信号通路降低子宫肌瘤细胞中雌激素受体α、β的表达和上调了凋亡基因Bad和p21的表达促进了子宫肌瘤细胞的凋亡。

论文目录

• 缩略词
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 1 试剂和仪器
• 2 药品的配制
• 3 实验方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 硕士期间发表的论文
• 致谢