不同剂量甲基强的松龙对大鼠胸腺细胞凋亡的影响

论文摘要

目的:胸腺是重要的免疫器官,与自体免疫性疾病特别是与重症肌无力关系密切,而甲基强的松龙冲击疗法是治疗重症肌无力行之有效的方法之一,可通过诱导淋巴细胞的凋亡发挥作用,但是,在临床应用中,甲基强的松龙的用量、用法尚不统一,本研究探讨了甲基强的松龙不同剂量及不同给药次数对大鼠胸腺细胞凋亡的影响,为其临床应用提供理论依据。方法:选用四周龄Wistar大鼠96只,体重在140g-155g,随机分成（1） 生理盐水对照组（2） MP治疗组,再按照甲基强的松龙的不同剂量、不同给药次数分为四小组:A组:注射一次组,剂量为5mg/Kg;B组:注射一次组,剂量为30mg/Kg;C组:每天注射一次,连用三天组,剂量为5mg/Kg;D组:每天注射一次,连用三天组,剂量为30mg/Kg。每小组12只;对照组分别按照甲基强的松龙分组注射等量生理盐水,每小组12只。药物和生理盐水组均经腹腔内注射。各组于注射后第3天、第7天、第14天时分别取4只,取出胸腺,在用药前及用药后分别测量各组大鼠体重、胸腺重量、胸腺指数、并用光镜技术、电镜技术、脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（Terminaldeoxynucleotidyl trarIsferase mediatedDUTP-biotin nick end labeling,TUNEL）染色进行凋亡细胞的定性和定量分析。电镜包埋、半薄切片、甲苯胺蓝染色光镜下对凋亡细胞计数,透射电镜观察和TUNEL染色对凋亡细胞进行定性观察,比较各组间大鼠胸腺细胞凋亡情况。结果:1 注射生理盐水组 胸腺细胞结构清晰,形态规则,自然凋亡细胞比率低,各时间点各组大鼠胸腺指数与胸腺细胞凋亡数比较,统计学差异无显著性（P>0. 05） 。山东大学硕士学位论文 2不同剂量的甲基强的松龙均可引起大鼠胸腺细胞凋亡,电镜和光镜观察及TUNEL染色显示典型细胞凋亡变化,定量分析结果显示: （1）甲基强的松龙组与注射生理盐水组比较,应用甲基强的松龙组胸腺细胞凋亡数均较注射生理盐水组高,各时间点统计学差异有显著性（P<0 .05） （2）甲基强的松龙smg/Kg一次组与smg/Kg三次组比较;30mg/Kg一次组与30mg/Kg三次组比较,差异无显著性（P>0.05）。第3天各组胸腺指数即有降低,胸腺细胞凋亡数增加,第7天凋亡细胞数仍较多。 （3）甲基强的松龙30mg/Kg各组与smg/Kg各组比较,在第3天、第7天时30mg/Kg各组胸腺指数降低更明显,胸腺细胞凋亡数均较smg/Kg各组增加,统计学差异有显著性（P（0 .05）。 （4）第14天时甲基强的松龙各组比较,各甲基强的松龙组胸腺指数、胸腺细胞凋亡数比较,统计学差异无显著性（P>0.05）,但胸腺凋亡数仍较生理盐水组增加,统计学差异有显著性（P<0.05）。甲基强的松龙各组胸腺指数与生理盐水各组比较,统计学差异无显著性（P）0.05）。 （5）注射药物后,各组大鼠的体重增加数比较,统计学差异无显著性（P>0 .05）。 结论 通过电镜和TUNEL方法定性以及半薄切片定量观察不同剂量及不同给药方式甲基强的松龙对大鼠胸腺细胞凋亡的影响,是研究类固醇糖皮质激素用法与疗效关系的有效动物实验方法。 1甲基强的松龙单次给药后,胸腺细胞均发生凋亡,大剂量甲基强的松龙更容易诱导胸腺细胞凋亡。 2甲基强的松龙连续3次给药后,大剂量组细胞凋亡数高于小剂量组。 3同剂量甲基强的松龙1次给药与连续3次给药对胸腺细胞凋亡的影响无差异。 4胸腺细胞凋亡与单次给药的甲基强的松龙剂量有关,与给药次数无关。关键词胸腺甲基强的松龙t、凋亡糖皮质激素重症肌无力

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 第一部分甲基强的松龙对大鼠体重及胸腺指数的影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分甲基强的松龙对大鼠胸腺细胞凋亡的影响
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图与说明
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学位论文目录