柑橘皮中黄酮类化合物提取和纯化方法研究

论文摘要

本研究选取四川常见的4种柑橘果皮（温州蜜柑、罗伯逊脐橙、琯溪蜜柚和彭祖寿柑）为原料,以果皮中的黄酮提取率为试验指标,筛选出最优品种,分别进行水浴浸提、微波萃取和超声波辅助提取,研究了3种不同方法下的不同工艺条件对其黄酮类化合物提取效果的影响,并进一步探讨了大孔树脂纯化黄酮类化合物的工艺。主要研究结果如下.1.柑橘皮中黄酮类化合物含量的分光光度测定方法中,以芦丁为标样,亚硝酸钠-硝酸铝法-氢氧化钠法显色,510nm处分光光度法检测。对其进行方法学考察,芦丁质量浓度在0.00517～0.09306mg/mL范围内,呈良好的线性关系,r=1.0000,平均回收率为96.69%。该方法准确度较高、重现性好、操作简单且快速,适用于黄酮类化合物的定量检测。2.按照相似相溶的原理,本试验选择了7种溶剂在相同的条件下提取柑橘皮黄酮类化合物,综合考虑安全性及黄酮提取率,选择乙醇为最佳提取溶剂。采用Duncan氏法比较了在同一乙醇水浴浸提条件下的4种柑橘果皮的黄酮提取效果,确定温州蜜柑为黄酮提取的最佳品种。以黄酮提取率为试验指标,乙醇为提取溶剂,通过单因素试验和正交设计确定了水浴浸提、微波萃取和超声波辅助提取柑橘皮黄酮类化合物的最佳工艺条件。水浴浸提的最佳工艺条件为：乙醇浓度60%,料液比1：25（g/mL）,浸提时间2.0h,浸提温度为55℃,黄酮提取率为8.92mg/g；微波萃取的最佳工艺条件为：乙醇浓度70%,料液比1：40（g/mL）,辐照时间8min,微波功率400W,黄酮提取率为11.23mg/g；超声波辅助提取的最佳工艺条件为：超声波功率150W,乙醇浓度80%,料液比1：40（g/mL）,超声时间35min,提取温度55℃,黄酮提取率为14.14mg/g。三种方法进行比较,超声波辅助提取黄酮的得率最高,且操作简单、易于控制。因此,对柑橘皮黄酮的提取宜采取超声波辅助法。3.柑橘皮中黄酮类化合物的大孔树脂纯化工艺研究。采用大孔树脂HPD600、S-8、HPD400、AB-8、D101、X-5纯化柑橘皮黄酮粗提液。通过6种树脂对黄酮类化合物的吸附与解吸特性的研究,确定了AB-8型大孔树脂综合性能最好。采用单因素和正交试验优化出AB-8树脂纯化黄酮的最佳工艺条件：上样浓度0.15mg/mL,上样流速0.5ml/min,上样体积5BV,乙醇浓度70%,洗脱流速1.0ml/min,洗脱体积5BV,总黄酮回收率为76.91%。在此工艺条件下,大孔树脂可重复利用10次。4.柑橘皮黄酮类化合物进行定性检测。通过化学显色法和薄层层析法的试验结果表明,柑橘类黄酮化合物主要是二氢黄酮,其中包括橙皮苷和柚皮苷。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1.文献综述
• 1.1 柑橘概述
• 1.1.1 柑橘定义
• 1.1.2 柑橘种植分布
• 1.1.3 柑橘产量
• 1.1.4 柑橘加工
• 1.1.5 柑橘果皮利用现状
• 1.2 黄酮类化合物研究概况
• 1.2.1 黄酮类化合物来源
• 1.2.2 黄酮类化合物结构和分类
• 1.2.3 黄酮类化合物理化性质
• 1.2.4 黄酮类化合物摄入量与代谢研究
• 1.2.5 黄酮类化合物生理功能
• 1.2.6 黄酮类化合物含量测定方法
• 1.2.7 黄酮类化合物提取研究
• 1.2.8 黄酮类化合物分离纯化研究
• 1.3 立题背景
• 1.4 试验目的及意义
• 2 材料与方法
• 2.1 供试材料
• 2.1.1 试验原料
• 2.1.2 主要药品试剂
• 2.1.3 主要仪器设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 柑橘皮中黄酮类化合物分光光度法的建立和评价
• 2.2.3 柑橘皮黄酮类化合物提取工艺的研究
• 2.2.4 柑橘皮黄酮类化合物大孔树脂纯化工艺的研究
• 2.2.5 柑橘皮黄酮类化合物的鉴定
• 3 结果与分析
• 3.1 分光光度法测定柑橘皮中黄酮类化合物含量的方法评价
• 3.1.1 标准曲线的绘制
• 3.1.2 精密度实验
• 3.1.3 重现性实验
• 3.1.4 稳定性实验
• 3.1.5 加标回收率实验
• 3.2 柑橘皮黄酮类化合物提取工艺的研究
• 3.2.1 提取溶剂的筛选
• 3.2.2 柑橘品种的筛选
• 3.2.3 水浴浸提法提取黄酮类化合物的工艺研究
• 3.2.4 微波萃取黄酮类化合物的工艺研究
• 3.2.5 超声波辅助提取黄酮类化合物的工艺研究
• 3.3 柑橘皮黄酮类化合物大孔树脂纯化工艺的研究
• 3.3.1 大孔树脂的静态吸附
• 3.3.2 AB-8型大孔树脂对黄酮类化合物的动态吸附与解吸单因素试验结果
• 3.3.3 正交试验结果
• 3.3.4 大孔树脂再生研究
• 3.4 柑橘皮总黄酮初步鉴定
• 3.4.1 显色反应
• 3.4.2 薄层层析结果
• 4 讨论
• 4.1 柑橘皮中黄酮类化合物的亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色的分光光度检测方法
• 4.2 柑橘皮黄酮类化合物的提取工艺
• 4.2.1 提取溶剂
• 4.2.2 柑橘皮品种的选择
• 4.2.3 提取方法
• 4.3 柑橘皮黄酮类化合物的大孔树脂纯化
• 4.4 柑橘皮黄酮类化合物的薄层层析定性
• 5 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录