SP和CGRP阳性神经元在大鼠上橄榄复合体中的分布

论文摘要

目的研究大鼠上橄榄复合体（superior olivary complex,SOC）中P物质（substance P,SP）和降钙素基因相关肽（calcitonin-gene related peptide,CGRP）免疫反应阳性神经元的分布特点,并探讨其意义。方法按照大鼠脑立体定位图谱对大鼠的第四脑室进行定位,定位后行颅骨钻孔,用微量注射器缓慢加压注入秋水仙素（80～100μg/只）,留针观察10min。动物存活48h后,对其进行灌注。断头后,剥除颅骨,取下脑干,用40g/L多聚甲醛再固定12h,然后置于300g/L蔗糖磷酸缓冲液（pH7.4,4℃）直至沉底。根据核团定位,对上橄榄复合体分别以40μm行冰冻切片,共三组贴片,每组8张标本,分别行SP、SPc、CGRP免疫组化。根据核团定位,对上橄榄复合体分别行10μm冰冻切片,共四组贴片,每组8张标本,分别行SP免疫荧光反应,CGRP免疫荧光反应,SP-CGRP免疫荧光双标,对照组。对照试验用抗体稀释液代替第一抗体,其它试剂及步骤不变。结果免疫组织化学染色:SP阳性神经元胞体主要存在于大鼠Tz,呈梭形,体积较小,直径约10～12μm,未见明显突起;于LSO见大量SP阳性神经纤维及终末,呈串珠状及点状,主要集中于LSO靠中线侧。SPc阳性神经元胞体主要存在于大鼠Tz、MSO、LSO,呈圆形、椭圆形不等,体积较大,直径约25～30μm,有多个突起。CGRP阳性神经元主要位于LSO,呈卵圆形单极或双极细胞,突起于横切面上垂直于LSO长轴,胞体直径约12～16μm,靠中线侧较密集。免疫荧光染色:SP阳性神经元主要位于大鼠Tz,呈梭形、卵圆形,体积较小,直径约11～13μm。CGRP阳性神经元主要位于大鼠Tz和LSO,位于Tz中的呈多角形,体积较小,直径约11～13μm;位于LSO中的呈卵圆形,体积较小,直径约10～12μm。斜方体核内见大量CGRP和SP双标神经元胞体,并为CGRP点状阳性终末所包绕。阴性对照未见明显着色。结论SP与CGRP在听觉传导功能中有协同作用,且斜方体内SP阳性神经元可能参与了对LSO内CGRP阳性神经元的调控,进而参与调节橄榄耳蜗束（olivocochlear bundle,ocb）的神经活动。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 第一部分 SP、SPC、CGRP阳性神经元在大鼠上橄榄复合体中的分布
• 引言
• 1 材料
• 1.1 实验材料
• 2 方法
• 2.1 立体定位（动物模型制作）
• 2.2 取材（动物灌注）
• 2.3 冰冻切片（40μm）
• 3 结果
• 3.1 免疫组织化学染色结果
• 4 讨论
• 第二部分 SP和CGRP阳性神经元在大鼠上橄榄复合体中的共同分布
• 引言
• 1 材料
• 1.1 实验材料
• 2 方法
• 2.1 立体定位（动物模型制作）
• 2.2 取材（动物灌注）
• 2.3 冰冻切片（10μm）
• 3 结果
• 3.1 免疫荧光染色结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢