论文摘要
目的观察SMYD3（SET and MYND-domain containing 3）基因沉默后c-myc的表达及对HepG2细胞凋亡的影响。方法构建针对SMYD3的shRNA干扰质粒Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2、阴性对照质粒Pgenesil-1-hk,分为Pgenesil-1-s1组、Pgenesil-1-s2组、Pgenesil-1-hk组和空白组,采用Lipofectamine2000脂质体介导转染法转染质粒。RT-PCR检测干扰前后HepG2中SMYD3、c-myc的表达情况。流式细胞术法检测各组细胞的凋亡。结果SMYD3、c-myc基因在HepG2细胞中强表达。RT-PCR示转染24h、48h、72h后Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2转染组与阴性对照质粒转染组Pgenesil-1-hk相比,SMYD3的表达均明显下调,同时c-myc的表达下调明显,24h后细胞出现了明显的凋亡。结论应用RNA干扰技术特异性沉默HepG2细胞中SMYD3 mRNA的表达后,抑制了c-myc的表达,促进了HepG2细胞的凋亡。