论文摘要
目的:应用侧脑室注射M1型胆碱能受体激动剂McN-A-343、M2型胆碱能受体拮抗剂美索曲明（Methoctramine）以及α7亚单位的N型胆碱能受体激动剂胆碱（Choline）的方法激活胆碱能抗炎通路（cholinergic anti-inflammatory pathway,CAP）,通过检测大鼠左侧海马、心、肝、肺、肾和血浆中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha, TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）含量及右侧海马CA1区细胞凋亡数,进一步探讨CAP对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。方法:健康成年雄性Sprague-Daewley大鼠25只,随机分为5组（n=5）:假手术组（SHAM组）、脑缺血再灌注组（I/R组）、美索曲明组（MET组）、McN-A-343组（MA343组）和胆碱组（CHO组）。4-VO[1]法建立全脑缺血再灌注损伤模型,电凝大鼠双侧椎动脉（SHAM组除外）,于缺血前15min分别经侧脑室向MET组、MA343组及CHO组注射Methoctramine（500ng/kg,10μl）、McN-A-343（500ng/kg,10μl）及Choline（500ng/kg,10μl）,SHAM组及I/R组注射生理盐水10μl。除SHAM组外,各组夹闭双侧颈总动脉20min后再灌注。再灌注6h后,断头处死动物,采集标本。放射免疫法（RIA）检测左侧海马、心、肝、肺、肾和血浆中TNF-α、IL-1β含量。TdT介导的dUTP缺口末端标记技术（Terminal deoxynucleotidyl transferase fluorescein-12-dUTP nick end labeling, TUNEL）染色检测右侧海马CA1区细胞凋亡数。结果:再灌注后,MET组和MA343组海马、心、肝、肾组织匀浆及血浆TNF-α、IL-1β含量显著低于I/R组（P<0.05）,肺组织TNF-α、IL-1β含量差异无统计学意义（P>0.05）。CHO组海马TNF-α、IL-1β含量较I/R组有所降低（P<0.05）,而心、肺、肝、肾及血浆TNF-α、IL-1β含量差异无统计学意义。与I/R组相比,MET、MA343及CHO组海马CA1区凋亡细胞数目减少（P<0.05）。结论:TNF-α、IL-1β的释放是脑缺血再灌注损伤的重要机制之一,CAP对脑缺血再灌注引发的局部及全身炎症反应均具有保护作用,对细胞凋亡有间接抑制作用。其机制与Methoctramine、McN-A-343和Choline激活CAP后抑制缺血再灌注TNF-α、IL-1β的释放有关。