水稻谷蛋白论文-周优,林冬枝,董彦君

水稻谷蛋白论文-周优,林冬枝,董彦君

导读:本文包含了水稻谷蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:水稻,CRISPR,Cas9,贮藏蛋白,谷蛋白基因

水稻谷蛋白论文文献综述

周优,林冬枝,董彦君[1](2019)在《CRISPR/Cas9技术定点编辑水稻谷蛋白基因GluA》一文中研究指出通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对粳稻品种‘嘉花1号’的谷蛋白基因GluA3(LOC_Os03 g31360)进行编辑获得转基因T0代植株,并对其衍生的T1代28个单株进行鉴定分析。结果表明:获得了两种类型的GluA3编辑突变植株;突变体的未成熟胚乳中GluA3 RNA表达水平明显下调;突变体谷蛋白含量呈下降趋势。对‘嘉花1号’野生型及突变体水稻农艺性状考查发现,突变体水稻穗数和产量下降明显。试验表明,CRISPR/Cas9技术可有效编辑水稻谷蛋白基因,可为水稻谷蛋白品质育种提供理论指导。(本文来源于《上海农业学报》期刊2019年01期)

李文静,孙艳香[2](2018)在《水稻谷蛋白基因GluC启动子的克隆及表达分析》一文中研究指出水稻谷蛋白仅在水稻种子胚乳中表达,其启动子是分离胚乳特异性表达启动子的理想材料。本研究克隆了GluC基因启动子pGluC,生物信息学分析表明pGluC内部含有胚乳特异性表达所需要的Skn-1 motif和ACGT-box元件。将pGluC启动子和7个5'端缺失启动子片段构建到p GPTV-GUS载体上,转化水稻愈伤组织,进行组织化学染色和GUS酶活分析。结果表明:全长及截短的-1 911、-1 611、-1 311 bp启动子均能驱动GUS基因在水稻种子胚乳中高效稳定表达。-999、-451、-203、-102 bp启动子失去了胚乳表达特异性,在根、茎或者叶中也检测到GUS表达。该结果为实现外源目的基因在水稻胚乳中特异高效表达提供了理论依据。(本文来源于《植物研究》期刊2018年06期)

周优[3](2018)在《CRISPR/Cas9系统介导水稻谷蛋白基因定点突变研究》一文中研究指出水稻(Oryza sativa L.)是基因组研究的模式粮食植物。培育功能性专用品种日渐成为水稻育种的重要目标。利用CRISPR/Cas9技术对水稻谷蛋白基因进行编辑,可大大缩短育种时间,提高育种效率。本研究利用CRISPR/Cas9技术针对水稻谷蛋白基因进行定点编辑,得出以下结论:1.利用CRISPR/Cas9技术能够成功的对水稻3个谷蛋白基因(LOC_Os01g55690(GluA1),LOC_Os03g31360(GluA3),LOC_Os02g16830(GluB4))进行基因组定点编辑。2.研究得到以下结果:LOC_Os01g55690(GluA1)得到2种类型的纯合突变体:(1)1个碱基T的插入;(2)6个碱基(GCTTCG)缺失,1个碱基的替换(A→C)。LOC_Os03g31360(GluA3)共得到5种突变类型:(1):缺失32bp(TTGCTACAACATCGTCAGGAAGTGCGCGGAAG),插入8bp(ATGCATTT);(2):缺失27bp(GCGCGGAAGATGGAATTCTTTCCTGCC),插入9bp(CCGCGCACT);(3):缺失21bp(AGGAAGTGCGCGGAAGATGGA);(4):缺失4bp(AGAT);(5):缺失45bp(GAAGATGGAATTCTTTCCTGCCATGTGGCTAACCATGGAGTCAGG),插入59bp(TCTTCATATGTGGCTAACCATGGAGTCAGGGTTGGTTTTCAATGTCAACATGATCACAA)。LOC_Os02g16830(GluB4)得到1种纯合体突变类型:插入一个碱基T。3.对得到的8种纯合突变体进行了转录水平的表达量分析:发现我们得到的8种突变体材料大部分在RNA表达水平上都表现出异于野生型粳稻品种—嘉花1号。4.SDS-PAGE分析表明8种突变体材料的谷蛋白在蛋白表达水平上并没有转录表达水平的变化那么明显,与野生型相比差异不大。5.对8种突变体材料的农艺性状调查,发现其穗数、每穗粒数、结实率以及单株产量与野生型都存在有显着差异。本研究利用CRISPR/Cas9技术成功的对水稻谷蛋白基因进行了定点编辑,为运用CRISPR/Cas9技术对水稻蛋白质品质改善提供了理论指导。(本文来源于《上海师范大学》期刊2018-05-01)

赵丰兰,段永波,盛玮,薛建平[4](2015)在《基于降低水稻谷蛋白多成员表达水平的干涉表达载体构建》一文中研究指出通过水稻全基因组比对分析,获得16个谷蛋白成员信息。序列比对获得其保守区域,并选取其中129 bp构建RNAi干涉载体,双酶切验证和测序结果表明干涉载体构建成功。(本文来源于《甘肃农业科技》期刊2015年09期)

赵祥祥,陆长丽,胡小兰,纪丽莲,刘巧泉[5](2013)在《转高赖氨酸融合蛋白基因水稻谷蛋白急性毒性》一文中研究指出以我国自主培育的转高赖氨酸融合蛋白基因水稻(简称转GL基因水稻)为材料,参考中华人民共和国国家标准,通过小鼠急性经口毒性实验研究转GL基因水稻谷蛋白的食用安全性。采用低碱法(0.35%)提取的谷蛋白以5000mg/kg最大剂量灌胃小鼠,连续观察14d后测定小鼠体质量、血常规、脏器系数和脏器的病理学检查。结果表明:整个实验期间,小鼠生长状态良好,无死亡和异常现象;转GL基因稻米谷蛋白LD50>5000mg/kg,属实际无毒级别;各实验组间的小鼠体质量增长无明显差异,血常规指标、脏器系数和病理学检查也未见显着差异。因此,转GL基因水稻谷蛋白对小鼠无急性毒性作用。(本文来源于《食品科学》期刊2013年17期)

魏雪松[6](2011)在《转基因调控水稻谷蛋白基因Gt1表达的研究》一文中研究指出稻米是人类的主食,其中的贮藏蛋白易被消化吸收,但蛋白质含量较低,赖氨酸含量也缺乏,是稻米蛋白质中的第一限制必需氨基酸。所以,提高稻米中的必需氨基酸含量和蛋白质含量,平衡其营养品质,一直是遗传育种学家追求的目标之一。常规育种技术已在鉴别突变体以改良主要粮食作物蛋白质营养品质等方面获得了一些进展,但在水稻中却收效甚微。分子生物技术的发展为改良稻米种子蛋白质营养品质提供了一条有效的技术路线。本研究即是要通过基因工程技术,在水稻种子胚乳中过表达水稻内源谷蛋白以及来自异源植物四棱豆的一个富含赖氨酸的蛋白质(Lysine-rich protein, LRP),以提高稻米中的谷蛋白组成以及赖氨酸含量,最终达到改良稻米营养品质的目的。为此,重点开展了两个方面的研究工作,包括:(1)水稻贮藏蛋白基因的过表达以及对水稻蛋白含量的影响。(2)高赖氨酸含量转基因水稻新品系HL1与HL5的表达分析与分子特征分析。主要研究结果如下:第一,为了能用种子胚乳特异性表达的启动子来指导目标蛋白在转基因水稻种子中高效特异地表达,本研究利用谷蛋白基因Gtl (GluA-2)和醇溶蛋白基因RP5的启动子连同水稻谷蛋白Gtl(GluA-2)基因构建成嵌合基因,并导入9983与武育粳3号两个水稻品种中。对转基因水稻中mRNA的表达以及总蛋白含量分析表明:(1)所有启动子都能指导Gtl基因在转基因水稻种子的胚乳中转录,但最终种子总蛋白含量却无明显变化,说明通过增加谷蛋白基因的办法不能提高稻米蛋白的含量;(2)在将Gtl N-端信号肽编码序列或将其替换成醇溶蛋白N-端信号肽编码序列后,由RP5启动子引导的Gtl融合基因有明显的转录活性,但最终未能筛选到高谷蛋白或低醇溶蛋白转基因转化事件,信号肽的作用不明显。(3)为借助于农杆菌介导的双元载体转化方法培育可剔除抗性选择标记转基因水稻,构建了含双T-DNA区的超双元载体,证明用超双元载体法可将外源基因与抗性选择标记基因同时导入并整合到同一个水稻细胞的基因组中;在由超双元载体法转化获得的转基因水稻植株的自交后代中,已筛选获得了无抗性选择标记基因但含Gtl基因的转基因水稻转化事件。第二,本实验室在前期研究中用Gt1基因的启动子及其5’调控序列与LRP cDNA构建了一个嵌合基因,又采用融合蛋白策略,即将富含赖氨酸的LRP融合进水稻谷蛋白Gt1的碱性亚基中,设计并构建了1个Gt1::LRP融合蛋白。将这两种构建都导入了同一个水稻品种9983中,通过筛选,分别获得了两个不含有抗性选择标记、高赖氨酸含量转基因水稻新品系HL1与HL5。本研究主要对这两个新品系进行表达与分子特征分析,主要结论如下:(1)在Gt1基因启动子的指导下,LRP与Gt1::LRP融合蛋白都能在转基因水稻种子中高效表达并稳定积累;(3)Gt1::LRP融合蛋白能在转基因水稻种子中正常翻译,产生预期分子量大小的融合蛋白;当LRP融合进谷蛋白的碱性亚基时,只形成单一分子量的融合蛋白,未发生翻译后加工等过程。(4)转化事件HL1与HL5都是双拷贝单插入位点;(5)转化事件HL1的两个T-DNA区为头尾相连,插入到水稻10号染色体上一个蛋白激酶家族成员的3’UTL。而转化事件HL5的两个T-DNA区为头头相连,插入到水稻9号染色体上一个核酸结合蛋白基因的3’UTL。本研究结果充分证明通过融合蛋白途径可显着提高异源蛋白在转基因水稻中的表达,同时也显示水稻谷蛋白Gt1是一个用于构建融合蛋白的理想受体。(本文来源于《扬州大学》期刊2011-05-01)

田孟祥,陈涛,张亚东,朱镇,赵凌[7](2010)在《水稻谷蛋白突变体的分类及其分子生物学研究进展》一文中研究指出水稻谷蛋白突变体不仅是研究真核生物贮藏蛋白生物合成和基因表达调控的重要遗传材料,也是培育功能性专用水稻品种不可或缺的优良种质资源。近年来,随着研究的不断深入,在谷蛋白突变体的遗传变异机理和育种等研究方面取得了明显进展。该文以国内外近年来有关文献为依据,综述了谷蛋白突变体的分类及其分子生物学的研究进展,并对谷蛋白突变体与功能稻育种的关系展开了讨论。最后,结合育种实践对今后利用谷蛋白突变体进行功能性水稻选育提出建议。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2010年04期)

许昱,王幻予,张伟,李建粤[8](2010)在《“中花11”水稻谷蛋白Gt1基因克隆及蜡质基因启动子引导Gt1基因表达载体的构建》一文中研究指出谷蛋白含量及分布对水稻营养品质起着至关重要的作用.利用PCR技术从"中花11"水稻基因组成功克隆到谷蛋白Gt1基因,再分别以PCR技术和限制酶酶切从p13W4载体上获得水稻蜡质基因(Waxy)启动子、第一内含子和NOS终止子,并以pCAMBIA1301双元载体为骨架,成功构建了由Waxy启动子引导的水稻Gt1基因表达载体,为今后利用转基因技术改良水稻稻米营养品质奠定了基础.(本文来源于《上海师范大学学报(自然科学版)》期刊2010年02期)

张晔[9](2009)在《水稻谷蛋白“调节”基因功能揭示》一文中研究指出着名学术刊物《植物》最近发表了以南京农业大学为第一署名单位、万建民教授为通讯作者的有关水稻谷蛋白合成机理方面的重要文章《液泡加工酶OsVPE1是水稻进行谷蛋白高效加工所必需的》。该研究从分子水平揭示了引起水稻谷蛋白前体巨增突变性状的分子机理,阐述了该基因(本文来源于《中国特产报》期刊2009-04-03)

张晔,倪峰[10](2009)在《我科学家揭示水稻谷蛋白“调节”基因功能》一文中研究指出着名学术刊物《植物》最近发表了以南京农业大学为第一署名单位、万建民教授为通讯作者的有关水稻谷(本文来源于《北京农业》期刊2009年08期)

水稻谷蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

水稻谷蛋白仅在水稻种子胚乳中表达,其启动子是分离胚乳特异性表达启动子的理想材料。本研究克隆了GluC基因启动子pGluC,生物信息学分析表明pGluC内部含有胚乳特异性表达所需要的Skn-1 motif和ACGT-box元件。将pGluC启动子和7个5'端缺失启动子片段构建到p GPTV-GUS载体上,转化水稻愈伤组织,进行组织化学染色和GUS酶活分析。结果表明:全长及截短的-1 911、-1 611、-1 311 bp启动子均能驱动GUS基因在水稻种子胚乳中高效稳定表达。-999、-451、-203、-102 bp启动子失去了胚乳表达特异性,在根、茎或者叶中也检测到GUS表达。该结果为实现外源目的基因在水稻胚乳中特异高效表达提供了理论依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

水稻谷蛋白论文参考文献

[1].周优,林冬枝,董彦君.CRISPR/Cas9技术定点编辑水稻谷蛋白基因GluA[J].上海农业学报.2019

[2].李文静,孙艳香.水稻谷蛋白基因GluC启动子的克隆及表达分析[J].植物研究.2018

[3].周优.CRISPR/Cas9系统介导水稻谷蛋白基因定点突变研究[D].上海师范大学.2018

[4].赵丰兰,段永波,盛玮,薛建平.基于降低水稻谷蛋白多成员表达水平的干涉表达载体构建[J].甘肃农业科技.2015

[5].赵祥祥,陆长丽,胡小兰,纪丽莲,刘巧泉.转高赖氨酸融合蛋白基因水稻谷蛋白急性毒性[J].食品科学.2013

[6].魏雪松.转基因调控水稻谷蛋白基因Gt1表达的研究[D].扬州大学.2011

[7].田孟祥,陈涛,张亚东,朱镇,赵凌.水稻谷蛋白突变体的分类及其分子生物学研究进展[J].江苏农业学报.2010

[8].许昱,王幻予,张伟,李建粤.“中花11”水稻谷蛋白Gt1基因克隆及蜡质基因启动子引导Gt1基因表达载体的构建[J].上海师范大学学报(自然科学版).2010

[9].张晔.水稻谷蛋白“调节”基因功能揭示[N].中国特产报.2009

[10].张晔,倪峰.我科学家揭示水稻谷蛋白“调节”基因功能[J].北京农业.2009

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