尿血Ⅰ号方对大鼠肾小球系膜细胞增殖影响的实验研究

尿血Ⅰ号方对大鼠肾小球系膜细胞增殖影响的实验研究

论文摘要

[目的] 以中医药理论为指导观察具有清心泻火、凉血活血作用的尿血Ⅰ号方对体外培养的系膜细胞(Mesangial cell, MsC)增殖的抑制作用,从而探明中医药治疗肾小球性血尿的作用机制。 [方法]1.购买肾小球系膜细胞细胞株(HBZY),对其进行培养,观察细胞形态的变化;2.实验用SD大鼠30只,随机分成正常组、雷公藤多甙片组、尿血Ⅰ号方高、中、低剂量组,连续灌胃一周,提取动物血清;3.利用培养的MsC,随机分成正常组、雷公藤多甙片组、尿血Ⅰ号方高、中、低剂量组进行换液,观察各组在48h、72h对MsC增殖的影响,采用MTT法测定OD值,并求出抑制率(%);4.采用流式细胞仪检测在48h、72hMsC的凋亡率,以及各组细胞周期的DNA含量。 [结果]1.尿血Ⅰ号方能够抑制MsC增殖,雷公藤组多甙片、尿血Ⅰ号方高、中、低剂量组与正常血清组比较均有差异(P<0.01);2.尿血Ⅰ号方能够促进MsC的凋亡,雷公藤多甙片组、尿血Ⅰ号方高、中剂量组的48h凋亡率较正常血清组有显著差异(P<0.05),高剂量组与雷公藤多甙片组比较无显著差异(P>0.05),说明其作用相当,而在72h的凋亡率较48h的凋亡率有下降的趋势;3.尿血Ⅰ号方能将MsC的有丝分裂阻滞在G1期,雷公藤多甙片组、尿血Ⅰ号方高、中、低剂量组的48hG1期的细胞DNA含量较正常血清组有显著差异(P<0.01),而在72h G1期的细胞DNA含量较48h有下降的趋势。。 [结论]尿血Ⅰ号方能够抑制MsC的增殖,其作用机制可能是通过多途径的,从而为中医药治疗肾小球性血尿提供了可靠的实验依据。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 引言
  • 实验研究
  • 1.实验材料
  • 1.1 实验药物
  • 1.2 实验动物
  • 1.3 主要试剂
  • 1.4 主要实验仪器
  • 2.实验方法
  • 2.1 培养液及其试剂的配制
  • 2.2 SD大鼠肾小球系膜细胞的培养
  • 2.3 尿血Ⅰ号方含药血清的制备
  • 2.4 细胞计数
  • 2.5 尿血Ⅰ号方对肾小球系膜细胞增殖的影响
  • 3.实验结果与分析
  • 3.1 尿血Ⅰ号方对肾小球系膜细胞增殖的抑制作用
  • 3.2 尿血Ⅰ号方诱导肾小球系膜细胞凋亡
  • 3.3 尿血Ⅰ号方对肾小球系膜细胞周期的影响
  • 讨论
  • 1.尿血Ⅰ号方含药血清的应用
  • 2.检测时间的选择
  • 3.血清添加量和对照组的设立
  • 4.阳性对照药雷公藤多甙片的选择
  • 5.肾小球系膜细胞增殖与细胞凋亡
  • 6.肾小球系膜细胞与细胞周期
  • 7.肾小球系膜细胞与肾小球性血尿
  • 8.尿血Ⅰ号方的处方来源
  • 9.尿血Ⅰ号方对肾小球系膜细胞增殖的影响
  • 结论
  • 问题与展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 综述
  • 附图
  • 相关论文文献

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