乌骨鸡黑色素氧化降解产物的液相分离及其电喷雾质谱解析

论文摘要

乌骨鸡的滋补药用价值功效物质基础是乌骨鸡黑色素。现阶段的科学理论研究并未清楚地阐明乌骨鸡黑色素的化学结构。由于黑色素的稳定性,给其结构研究带来不便,采用化学降解法可以获得黑色素的可溶性降解产物。目前,化学降解法是研究黑色素结构的一种方法。本研究采用NaOH-H202化学氧化方法的方法降解乌骨鸡黑色素,打断乌骨鸡黑色素可能具有的聚合结构,以期获得可溶性的小分子降解产物,并对其黑色素降解物进行高效液相色谱法的分离和电喷雾质谱的结构解析,目的在于初步探索乌骨鸡黑色素的结构组成,为进一步研究乌骨鸡黑色素的结构提供科学借鉴和理论参考。本研究的主要内容和结论如下:1.采用NaOH-H202作为乌骨鸡黑色素的降解方法。其方法为:以pH=12 NaOH溶液为反应介质,反应时匀速加入体积分数为3.4%H202,90 ℃反应24 h。,降解产物丙酮上清液的质量含量占降解前黑色素质量数的8%。F样在365 nm紫外下具有荧光,硅胶板薄层显色后发现,F样中存在有机酸,氨基酸及肽类物质。2.在水-乙腈体系的流动相梯度洗脱的条件下,F获得了较好的分离,色谱图上可以看到13个色谱峰,其中4个色谱峰分离较好,并对其4峰组分收集3.采用茚三酮显色实验等证实,4个收集组分均为肽类化合物,其中1、2、4号峰为环肽类化合物,3号为线形肽类。4.通过电喷雾-串联四级杆-飞行时间质谱法获得了乌骨鸡黑色素氧化降解产物的4个收集组分的其精确分子量,分别为452.3355,565.4226,678.5033,791.5896。5.通过对4个收集组分的MS/MS碎片分析,得出4个组分为亮氨酸或异亮氨酸结构单元组成的肽类,1、2、3、4号峰对应的分子式分别为 C24H44N4O4,C30H55N5O5,C36H66N6O6,C42H77N7O7,其基本组成结构单元为C6H11NO。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 电喷雾质谱技术综述
• 1.1.1 常见的现代质谱技术
• 1.1.2 电喷雾质谱技术的特点及其应用
• 1.1.3 电喷雾质谱技术在分析多肽方面的研究进展
• 1.2 高效液相色谱技术综述
• 1.2.1 高效液相色谱简介及其应用
• 1.2.2 高效液相色谱方法开发
• 1.3 乌骨鸡黑色素综述
• 1.3.1 乌骨鸡及乌骨鸡黑色素简介
• 1.3.2 乌骨鸡黑色素结构的研究进展
• 1.4 本研究的目的意义、主要研究内容和创新性
• 1.4.1 本研究的目的意义
• 1.4.2 本研究的主要内容
• 1.4.3 本研究的创新性
• 第2章 乌骨鸡黑色素的氧化降解
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 实验材料与试剂
• 2.2.2 实验仪器与设备
• 2.2.3 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2O₂氧化降解分析'>2.3.1 乌骨鸡黑色素NAOH-H₂O₂氧化降解分析
• 2.3.2 乌骨鸡黑色素氧化降解产物化学成分初探
• 2.4 本章小结
• 第3章 高效液相色谱法分析乌骨鸡黑色素氧化降解产物
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 实验材料与试剂
• 3.2.2 实验仪器与设备
• 3.2.3 实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 甲酸-甲醇水系统对F的高效液相分析
• 3.3.2 甲酸-乙腈水系统对F的高效液相分析
• 3.3.3 水-乙腈系统对F的高效液相分析
• 18制备柱对F的分离'>3.3.4 C₁₈制备柱对F的分离
• 18半制备柱对F的分离'>3.3.5 C₁₈半制备柱对F的分离
• 18柱对F的分离和各个组分的收集及纯度分析'>3.3.6 分析型C₁₈柱对F的分离和各个组分的收集及纯度分析
• 3.4 本章小结
• 第4章 电喷雾质谱法解析乌骨鸡黑色素氧化降解物
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料与仪器
• 4.2.1 实验材料与试剂
• 4.2.2 实验仪器与设备
• 4.2.3 实验方法
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 肽、环肽类化合物的验证
• 4.3.2 1号峰的质谱分析
• 4.3.3 2号峰的质谱分析
• 4.3.4 3号峰的质谱分析
• 4.3.5 4号峰的质谱分析
• 4.4 本章小结
• 第5章 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 进一步工作方向
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果