钙结合蛋白Calbindin-d28k在女性生殖系统表达与变化的研究

论文摘要

背景 人类生殖是一个复杂的过程，既往大量的证据表明，生殖器官局部产生的诸多生物活性物质参与调节此过程。Calbindin-d28k（CaBP-d28k）是一种存在于真核细胞浆中的可溶性蛋白质，属于钙结合蛋白（Calcium-binding protein，CaBP）家族中的一员。CaBP-d28k与细胞内游离钙离子有高度亲和力，可介导调节钙离子参与的多种生理功能。近年来，在对雌性动物多种生殖器官的研究中，发现CaBP-d28k在雌性生殖事件中具有重要作用。但是，对CaBP-d28k与人类女性生殖系统相互关系的研究，迄今仅见CaBP-d28k在人子宫内膜表达的相关报道。CaBP-d28k在人类卵巢、输卵管中是否存在，国内外尚未有资料。对人子宫中CaBP-d28k的研究国内仍未见报道。CaBP-d28k与女性生殖器官正常生理功能和病理改变的关系尚未明了。既往研究认为CaBP-d28k在植入过程中具有重要作用，那么临床不孕症的病因与CaBP-d28k是否相关，以及病理状态下女性生殖系统CaBP-d28k的表达状况至今尚未被认识。同时，CaBP-d28k在女性生殖器官作用的可能机制尚不清楚。所以，以人类组织标本为研究对象，开展人类生殖系统CaBP-d28k的相关研究，有助于增进对人类受精和着床机制的认识，而且可为不孕症病因学分析及抗生育研究提供资料，为临床不孕症的病因机制研究及治疗对策提供了新的思路。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 1 引言
• 2 钙结合蛋白CaBP-d28k
• 2.1 钙结合蛋白
• 2.2 CaBP-d28k的结构和特点
• 3 雌（女）性生殖系统CaBP-d28k的国内外研究现状
• 3.1 CaBP-d28k在子宫中的表达与作用
• 3.2 CaBP-d28k在输卵管的表达与作用
• 3.3 CaBP-d28k在卵巢中的表达与作用
• 3.4 CaBP-d28k在胎盘中的表达
• 4 CaBP-d28k与细胞凋亡
• 2+超载'>4.1 细胞内Ca²⁺超载
• 2+超载'>4.2 细胞凋亡与细胞内Ca²⁺超载
• 4.3 CaBP-d28k与细胞凋亡
• 2+超载及细胞凋亡'>4.4 Caspase-家族与Ca²⁺超载及细胞凋亡
• 5 科学意义、应用价值和发展趋势
• 5.1 增进对人类受精和着床机制的认识
• 5.2 有利于不孕症病因学分析及治疗
• 5.3 有利于抗生育研究
• 6 本课题主要研究内容
• 第一章 Calbindin-d28k在女性生殖器官的表达及变化
• 第一节 人卵巢Calbindin-d28k蛋白及其mRNA的表达
• 1 材料与方法
• 1.1 标本来源及采集
• 1.2 主要实验试剂
• 1.3 主要实验仪器
• 1.4 主要溶液的配制
• 1.5 研究方法
• 1.5.1 标本处理
• 1.5.2 组织病理学观察
• 1.5.3 免疫组织化学方法检测卵巢组织CaBP-d28k蛋白水平
• 1.5.4 RT-PCR方法检测卵巢组织中CaBP-d28k mRNA水平
• 1.6 结果判定
• 1.6.1 卵泡分级
• 1.6.2 免疫组化检测结果判定
• 1.6.3 RT-PCR结果定性判定
• 2 结果
• 2.1 CaBP-d28k蛋白在人卵巢组织中的表达
• 2.2 人卵巢组织CaBP-d28k mRNA的表达
• 3 讨论
• 附图
• 第二节 人输卵管组织Calbindin-d28k蛋白及其mRNA的表达
• 1 材料与方法
• 1.1 标本来源及采集
• 1.2 主要实验试剂及实验仪器
• 1.3 研究方法
• 1.3.1 标本制备与实验分组
• 1.3.2 组织病理学观察
• 1.3.3 免疫组织化学方法检测输卵管组织CaBP-d28k蛋白水平
• 1.3.4 RT-PCR方法检测输卵管组织中CaBP-d28k mRNA水平
• 1.4 结果判定与统计学分析
• 1.4.1 免疫组化检测结果判定
• 1.4.2 RT-PCR结果判定
• 2 结果
• 2.1 CaBP-d28k蛋白在人输卵管组织中的表达
• 2.2 CaBP-d28k mRNA在人输卵管组织的表达
• 3 讨论
• 附图
• 第三节 人子宫内膜Calbindin-d28k蛋白及其mRNA的表达
• 1 材料与方法
• 1.1 标本来源及采集
• 1.2 主要实验试剂及实验仪器
• 1.3 研究方法
• 1.3.1 标本制备与实验分组
• 1.3.2 组织病理学观察
• 1.3.3 免疫组织化学方法检测子宫内膜组织CaBP-d28k蛋白水平
• 1.3.4 RT-PCR方法检测子宫内膜组织中CaBP-d28k mRNA水平
• 1.4 结果判定与统计学分析
• 1.4.1 免疫组化检测结果判定
• 1.4.2 RT-PCR结果判定
• 2 结果
• 2.1 CaBP-d28k蛋白在人子宫内膜组织中的表达
• 2.2 CaBP-d28k mRNA在人子宫内膜中的表达
• 3 讨论
• 附图
• 本章小结
• 第二章 输卵管炎症及输卵管妊娠病变中输卵管上皮组织Calbindin-d28k表达及变化的研究
• 第一节 输卵管炎症中输卵管上皮Calbindin-d28k的表达变化
• 1 材料与方法
• 1.1 标本来源及实验分组
• 1.2 主要实验试剂及实验仪器
• 1.3 研究方法
• 1.3.1 标本制备
• 1.3.2 组织病理学观察
• 1.3.3 免疫组织化学方法检测输卵管炎症输卵管上皮CaBP-d28k蛋白水平
• 1.4 结果判定与统计学分析
• 2 结果
• 2.1 输卵管炎症组织学
• 2.2 CaBP-d28k蛋白在输卵管炎症输卵管上皮中的表达
• 3 讨论
• 附图
• 第二节 输卵管妊娠中输卵管上皮Calbindin-d28k的表达变化
• 1 材料与方法
• 1.1 标本来源
• 1.2 主要实验试剂及实验仪器
• 1.3 研究方法
• 1.3.1 标本制备
• 1.3.2 组织病理学观察
• 1.3.3 免疫组织化学方法检测输卵管妊娠输卵管上皮CaBP-d28k蛋白水平
• 1.4 结果判定与统计学分析
• 2 结果
• 2.1 妊娠囊种植部位组织学判断
• 2.2 CaBP-d28k蛋白在输卵管妊娠输卵管上皮中的表达
• 3 讨论
• 附图及说明
• 本章小结
• 第三章 细胞凋亡及Capase-3与Calbindin-d28k表达相关性的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 标本来源
• 1.2 主要实验试剂及实验仪器
• 1.3 研究方法
• 1.3.1 标本制备
• 1.3.2 TUNEL法检测输卵管粘膜上皮细胞凋亡
• 1.3.3 免疫组织化学方法检测输卵管上皮Caspase-3蛋白表达
• 1.4 结果判定与统计学分析
• 1.4.1 细胞凋亡检测结果判定
• 1.4.2 免疫组化检测结果判定
• 2 结果
• 2.1 输卵管妊娠输卵管上皮中细胞凋亡
• 2.2 Caspase-3蛋白在输卵管妊娠输卵管上皮中的表达
• 2.3 输卵管妊娠输卵管组织中种植部位与非种植部位CaBP-d28k表达与细胞凋亡、Caspase-3蛋白表达的相关性分析
• 3 讨论
• 附图
• 本章小结
• 全文结论
• 参考文献
• 附录Ⅰ 主要英文缩略词表
• 附录Ⅱ 博士研究生在校期间发表论文目录
• 附录Ⅲ 科技情报查新报告
• 致谢