甘氨酸受体在ATP耗竭细胞保护中的作用及机制研究

论文题目: 甘氨酸受体在ATP耗竭细胞保护中的作用及机制研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 病理生理学

作者: 潘超

导师: 陈琪,陈进

关键词: 甘氨酸受体,耗竭,复能,细胞保护,定点突变,干涉

文献来源: 南京医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的: 明确细胞ATP耗竭时,甘氨酸对细胞的保护作用是否由甘氨酸受体(glycine receptor, GlyR)所介导;观察细胞在ATP耗竭-“复能”过程中,其代谢、增殖活性变化的特点。为进一步揭示甘氨酸保护作用机制提供研究基础和新的思路。方法: GlyR的配基对ATP耗竭细胞的保护作用。构建甘氨酸受体α1亚单位(GlyRα1)的真核表达载体pcDNA3.1(b),采用脂质体法(LipofectAMINETM 2000)将其与pEGFP-C1质粒共转染入缺乏天然GlyR的人胚胎肾细胞株(Human Embryonic Kidney 293,HEK 293)内,流式细胞仪、激光共聚焦显微镜检测细胞转染率,分别以RT-PCR及Western blot检测GlyRα1的mRNA转录及蛋白表达。野生型及转染GlyR的HEK293细胞处于ATP耗竭状态,观察甘氨酸、士的宁对细胞的保护作用。犬肾细胞MDCK(Madin-Darby Canine Kidney)作为对照细胞。光学显微镜及电镜观察细胞形态及超微结构改变。通过检测细胞乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)释放率、细胞膜对不同分子量标记复合物(分子量668Da的碘化丙啶、3kDa及70kDa右旋糖苷)通透性反映细胞膜完整性。通过台盼蓝染色观察细胞活性。

论文目录:

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分：GlyR介导甘氨酸对ATP耗竭细胞的保护作用及机制研究

第二部分：GlyR介导的细胞保护作用对“复能”细胞生理特性的影响

小结

参考文献

致谢

发表论文：Cytoprotection of Glycine against ATP Depleted Injury Is Meidated via Glycine Receptor in Renal cells

综述

论文独创性声明

发布时间: 2005-07-22