目的: 本研究的主要目的是对2003年济南章丘市无菌性脑膜炎爆发开展全面的调查,从现场流行病学的角度出发,初步描述所有病例的“三间”分布等基本情况,探讨其流行因素;同时,结合血清流行病学、病毒学和分子生物学技术,运用已经建立的血清中和抗体检测、肠道病毒分离鉴定和RT—PCR快速诊断等方法,从病原学上明确病因,并对分离到ECHO30的VP1段进行基因序列的测定和分析,确定ECHO30山东分离株的基因型及其变异程度。 材料与方法: 所有病例信息来源于2003年章丘市无菌性脑膜炎爆发调查的资料,包括发病情况调查和个案调查。病原学标本来源于爆发期内采集的43份粪便标本和24份急性期、14份恢复期血清标本。病毒的分离、型别鉴定以及血清中和抗体试验按照WHO《脊髓灰质炎实验室手册》规定的方法进行;19株阳性分离株,经Trizol试剂提取总RNA,进行逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)合成互补脱氧核糖核酸(cDNA),PCR产物纯化后测定VP1基因的全长。借助Sequencher,Bioedit,Mega2.1等软件进行结果分析。血清流行病学标本采用按比例多级抽样方法,n=(ts)2/δ=38,设置7个年龄组,发病地区(病例组)和未发病地区(对照组)各取2各乡镇,以每个乡镇每个年龄组20人为标准,每人采集静脉血3ml。得到血清标本病例组397份,对照组248份,运用中和抗体试验技术,测定血清中和抗体的滴度。以上所得结果用SPSS12.0进行统计学分析处理。 结果: 2003年6~9月,济南章丘市发生了无菌性脑膜炎的爆发,发病高峰集中
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