萘对斑马鱼（Danio rerio）胚胎发育毒性效应的研究

论文摘要

由于长期的燃料燃烧、石油泄漏等人为释放,多环芳烃化合物(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons,简称PAHs)已经对自然环境和人类健康构成了严重威胁。萘(Naphthalene,NAP)是结构最简单、挥发性最强的PAHs,具有光毒效应,其毒性研究已经成为一个备受关注的全球性课题。本研究以斑马鱼(Danio rerio)胚胎和仔鱼为试验体,应用胚胎发育技术探讨PAHs的代表——萘对斑马鱼胚胎的发育毒性。在萘急性毒性试验基础上,通过亚致死毒性、致畸性和组织病理学等指标评价了萘的水生毒性。胚胎急性毒性实验结果表明,萘24h、48h半数致死浓度(median lethal concentration,LC50)分别为10.04 mg／L、8.96 mg／L。萘导致斑马鱼胚胎发育中出现多种致死及亚致死反应,包括胚胎自溶、发育停滞、发育异常和20s内无自主活动、心律显著减少、黑色素细胞不发育、孵化延迟、72h畸形等,其中最敏感指标是72h畸形,半数效应浓度值EC50为10.64 mg／L。致畸症状包括卵黄囊肿(Yolk Edema, YE)、心包水肿(Pericardial Edema, PE)(出现心脏线状畸变)以及脊柱弯曲(Spinal Flection, SF)。在胚胎毒性实验的基础上,使用组织切片技术,考察萘在组织器官水平上的毒性,暴露3d的斑马鱼仔鱼主要在卵黄囊、心包、脊柱三种器官上出现畸形。

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ABSTRACT

第1章前言

1.1 多环芳烃概述

1.2 萘的概述

1.3 萘污染现状

1.4 PAHs胁迫下鱼类生理生化响应

1.5 斑马鱼与毒理学研究

1.6 斑马鱼胚胎发育方法与毒理学研究

1.7 石蜡切片技术

1.8 研究目的与意义

1.8.1 研究目的与内容

1.8.2 研究意义

1.8.3 技术路线

第2章实验材料与方法

2.1 实验试剂与仪器

2.1.1 主要试剂

2.1.2 主要仪器

2.2 实验方法

2.2.1 萘助溶剂的选择

2.2.2 实验动物驯养

2.2.3 受精卵的收集

2.2.4 斑马鱼胚胎急性毒性实验

2.3 萘暴露实验

2.4 石蜡切片的制备

2.5 组织显微观察

2.6 萘挥发的测定

2.7 数据统计和分析方法

第3章结果与分析

3.1 萘对斑马鱼胚胎的急性毒性

3.2 萘挥发分析

3.3 萘的梯度暴露试验

3.4 斑马鱼胚胎发育的毒理学终点

3.5 萘对斑马鱼仔鱼的致畸效应

3.5.1 卵黄囊肿（Yolk Edema,YE）

3.5.2 心包水肿（Pericardial Edema,PE）

3.5.3 脊柱弯曲（Spinal Flection,SF）

第4章讨论与结论

4.1 萘对斑马鱼胚胎的发育毒性

4.2 萘对72HPF斑马鱼仔鱼的致畸毒性

4.2.1 卵黄囊肿

4.2.2 心包水肿

4.2.3 脊柱弯曲

4.3 结论

参考文献

后记

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