尿路上皮干细胞的鉴定

论文摘要

目的：建立小鼠尿路上皮“标记滞留细胞”的动物模型,寻找小鼠尿路上皮干细胞的体内定位。方法：将转基因小鼠Krt5-rtTa-VP16与TRE-H2B-GFP杂交,获得双转基因小鼠。Krt5,GFP等基因的表达用RT-PCR技术鉴定。待此小鼠长到4周后进行脉冲追踪（pulse-chase）实验,喂予含强力霉素的食物,并注射环磷酰胺以刺激尿路上皮增殖,2周后获得尿路上皮基底层细胞表达绿色荧光蛋白（GFP）的双转基因小鼠。Chase期后制作组织连续切片和组织整标本,用表面荧光显微镜,立式显微镜,三维反卷积显微镜和双光子共聚焦显微镜观察GFP标记滞留细胞在小鼠尿路系统中的分布。用Image J, Volocity等软件对图像及数据进行重建和整合。结果：转基因小鼠Krt5-rtTa-VP16与TRE-H2B-GFP杂交后获得双转基因小鼠Krt5-rtTa/TRE-H2B-GFP。此小鼠进食含强力霉素的食物后尿路上皮基底层表达绿色荧光蛋白。小鼠膀胱,输尿管连续切片的结果显示,含GFP的标记滞留细胞分布于膀胱三角区,膀胱颈,肾盂输尿管连接处和输尿管膀胱连接处。对小鼠膀胱和输尿管整标本采集的数据基本与连续切片的结果吻合。结论：此实验成功建立了鉴定小鼠尿路上皮干细胞的方法,观察到小鼠尿路上皮干细胞分布于膀胱三角区,膀胱颈,肾盂输尿管连接处和输尿管膀胱连接处,为上皮干细胞的进一步研究打下基础,同时也为尿路肿瘤的研究提供了理论依据。

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Abstract

转基因小鼠模型的建立

1.1 背景

1.2 材料和方法

1.3 结果

1.4 讨论

Reference

小鼠尿路上皮干细胞的鉴定

2.1 背景

2.2 材料和方法

2.3 结果

2.4 讨论

Reference

小鼠整标本在泌尿系统的应用

3.1 背景

3.2 材料和方法

3.3 结果

3.4 讨论

Reference

结果分析与结论

4.1 尿路上皮干细胞的鉴定

4.2 尿路上皮干细胞与发育学

4.3 尿路上皮干细胞与临床

结论

Reference

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