去细胞组织工程异种瓣膜支架制备方法的比较研究

论文摘要

目的:通过观察去垢剂、胰蛋白酶等对猪主动脉瓣膜去细胞的影响,探讨心脏瓣膜组织工程生物支架的最佳制备方法。方法:取新鲜猪主动脉瓣16个,剥离外膜后,随机分为4组,对照组未脱细胞,试验组分为NaCl-SDS法脱细胞组、胰蛋白酶法脱细胞组、曲拉通法脱细胞组。常规行苏木素伊红染色,电子扫描电镜及主要组织相容性复合体（MHC-Ⅰ）检查,评价效果。结果:NaCl-SDS对主动脉瓣的内皮细胞去除不彻底,细胞外基质的三维网状结构虽完整但纤维模糊,肿胀。胰蛋白酶法处理的瓣膜内皮细胞基本去除,但瓣膜支架结构改变很明显,胶原纤维肿胀,边缘毛糙,纤维网状间隙增宽、不规则。曲拉通法处理的瓣膜内皮细胞去除彻底,支架结构保存完好。NaCl-SDS法、胰蛋白酶法和曲拉通法脱细胞后的瓣膜均存在一定的免疫原性,但用胰蛋白酶法和曲拉通法脱细胞后的瓣膜支架所表达的免疫原性较NaCl-SDS法显著降低。结论:应用曲拉通法制作的瓣膜支架去内皮细胞较为彻底,不改变瓣叶支架结构,而且免疫原性小,因此曲拉通法是一种良好的组织工程瓣膜支架制作方法。

论文目录

一、引言

二、材料、方法

1.主要试剂

2.主要仪器

3.异种主动脉瓣的采集及处理

4.组织学检测

4.1 光学显微镜

4.2 电子显微镜

4.3 MHC-Ⅰ类抗原的检测

4.4 图像分析

5. 统计学处理

三、结果

四、论文图表

五、讨论

六、结论

七、论文参考文献

八、综述

九、综述参考文献

十、致谢

去细胞组织工程异种瓣膜支架制备方法的比较研究

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