楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化与防治肥胖机理的实验研究

论文摘要

目的：通过体外实验（细胞培养）研究楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化的作用及分子调控机制。通过体内实验（动物实验）研究楂曲平胃散预防小鼠肥胖和治疗肥胖小鼠的作用，并探讨其作用机制是否与其抑制前脂肪细胞分化的作用有关。 方法：（1）体外实验：加入楂曲平胃散处理原代培养小鼠前脂肪细胞，运用形态学方法观察细胞分化过程中的形态变化、运用油红0染色提取法检测细胞内的脂肪含量、运用酶组织化学提取法检测细胞内甘油磷酸脱氢酶（GPDH）的含量，同时运用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测细胞分化相关基因C／EBP α、PPAR γ、ADD1／SREBP1、Pref-1 mRNA的表达。（2）体内实验：进行楂曲平胃散防治肥胖作用的研究，在实验过程中运用称量方法测定食量、体重和体脂重量，根据公式计算小鼠肥胖指数和脂肪系数；运用形态学方法观察脂肪细胞大小及肝、肾形态变化；运用生化方法测定血脂含量。 结果：（1）体外实验：楂曲平胃散作用于细胞后，从形态学角度细胞内脂肪颗粒出现的速度较慢且数量较少；细胞内脂肪含量和细胞分化标志酶—GPDH的含量均少于阴性对照组细胞：同时C／EBP α mRNA、PPAR γ mRNA、ADD1／SREBP1 mRNA的表达量减少，Pref-1 mRNA的表达量增多。4mg／ml和6 mg／ml剂量组效果明显。（2）体内实验：楂曲平胃散用药后，小鼠食量有一定减少，体重减轻、肥胖指数下降，体脂重量减轻、脂肪系数下降，血脂含量降低，脂肪细胞体积变小。高、中剂量组效果明显。同时，各组小鼠肝、肾形态学观察未见明显损伤性病变。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 实验研究
• 第一部分 体外实验（细胞培养）楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化的作用及分子调控机制
• 1 实验目的
• 2 实验材料
• 2.1 动物
• 2.2 药物
• 2.3 主要试剂
• 2.4 仪器设备
• 2.5 主要实验用液的配制
• 3 实验方法
• 3.1 小鼠前脂肪细胞的培养及鉴定方法
• 3.2 实验分组
• 3.3 加药方法
• 3.4 指标检测
• 4 统计方法
• 5 实验结果与分析
• 5.1 小鼠前脂肪细胞的培养及鉴定
• 5.2 楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化的作用
• 5.3 楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化的分子调控机制
• 第二部分 体内实验（动钧实验）楂曲平胃散预防小鼠肥胖和治疗肥胖小鼠的作用
• 1 实验目的
• 2 实验材料
• 2.1 动物
• 2.2 药物
• 2.3 主要试剂
• 2.4 仪器设备
• 2.5 动物饲料
• 3 实验方法
• 3.1 营养性肥胖小鼠模型的造模方法及判断指标
• 3.2 实验分组
• 3.3 给药方法
• 3.4 指标检测
• 4 统计方法
• 5 实验结果与分析
• 5.1 营养性肥胖小鼠模型的建立
• 5.2 楂曲平胃散预防小鼠肥胖的作用
• 5.3 楂曲平胃散治疗肥胖小鼠的作用
• 讨论
• 1 中医对肥胖的认识
• 1.1 中医对肥胖病因病机的认识
• 1.2 中医对肥胖治疗及方药的认识
• 2 前脂肪细胞分化与肥胖形成的关系
• 2.1 关于前脂肪细胞分化的研究
• 2.2 关于前脂肪细胞分化与肥胖形成关系的探讨
• 2.3 关于抑制前脂肪细胞分化与防治肥胖的可行性分析
• 3 实施本课题的前期工作基础
• 3.1 前脂肪细胞的来源、培养及鉴定
• 3.2 关于阳性对照药物（大印象减肥茶）的确立
• 3.3 关于受试药物楂曲平胃散的确立
• 3.4 楂曲平胃散有效剂量的筛选
• 4 楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化的作用
• 4.1 细胞形态学观察
• 4.2 油红O染色提取法测定细胞内脂肪含量结果
• 4.3 酶组织化学提取法测定细胞内甘油磷酸脱氢酶（GPDH）含量结果
• 5 楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化的分子调控机制
• 5.1 关于（前）脂肪细胞分化的分子调控机制研究
• 5.2 楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化的分子调控机制
• 6 肥胖模型的选择及评价
• 6.1 造模方法的分类与选择
• 6.2 营养性肥胖小鼠模型的建立
• 7 楂曲平胃散预防小鼠肥胖和治疗肥胖小鼠的作用
• 7.1 楂曲平胃散预防小鼠肥胖的作用
• 7.2 楂曲平胃散治疗肥胖小鼠的作用
• 8 楂曲平胃散防治肥胖的中医机理探讨
• 9 楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪细胞分化与防治肥胖相关性的探讨
• 10 本课题的创新之处
• 结论
• 问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 附件
• 附件1：综述
• 附件2：实验研究部分其它图片
• 附件3：攻读博士学位期间公开发表的论文
• 附件4：声明