FGFR4基因多态性与原发性肝细胞癌的遗传易感性研究

论文摘要

研究背景和目的原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一,我国每年新发病例约占全球45%,已成为世界上肝癌发病最为集中的国家。肝癌具有起病隐匿,侵袭性生长快速,治疗后易复发,病死率高等特点,始终是我国医学界面临的基础和临床研究的重大课题。我国医学工作者在肝癌的外科手术治疗上取得了举世瞩目的成就。但传统的外科手术加化疗或放疗等方法都有其局限性,肝癌的生物治疗尚不成熟,肝癌根治性切除后的复发率很高,复发的危险因素主要与肝癌的侵袭转移性有关。因此,要提高肝癌患者的生存率应加强肝癌分子病理机制的研究,寻找肝癌相关基因,探讨肝癌生物治疗的新途径。目前研究认为,癌基因和/或抑癌基因改变是决定癌症发生的重要因素,而基因多态性可能与不同个体对癌症易感性及预后多样性有关。成纤维细胞生长因子受体4(fibroblast growth factor receptor 4,FGFR4)在不同组织中均有较高表达。在乳腺癌,FGFR4基因第388位密码子第一个碱基的单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism,SNPs)与乳腺癌、结肠癌、前列腺癌及软组织癌预后等密切相关;而FGFR4基因多态性与原发性肝细胞癌预后的关系尚未见研究报道。本研究旨在运用Taqman基因分型技术对FGFR4基因在中国华东人群中的不同分型作初步的关联研究,并探讨其在肝癌个性化治疗方面潜在的应用价值。实验方法:1.收集东方肝胆医院经临床/病理证实的中国汉族原发性肝癌的全血;2.对所收集的病例组进行流行病学调查、病例资料统计以及后期随访,其中包括生活习惯,合并肝炎类型,合并其它疾病,肿瘤类型,病理类型,治疗方法,预后,复发及转移等;3.对所收集的病例组酚/氯仿法提取全血基因组DNA并标化统一浓度;4.以病例组肝炎年龄、性别比例为参照,配对收集健康体检样本并纯化全血基因组DNA,统一标化,其中对照组设为两组,分别为健康人群(以HBsAg阴性为准)以及HBV携带者(以HBsAg阳性为准)但未合并肝硬化、肝癌;5.对所收集的对照组进行流行病学调查及资料统计;6.根据已有NCBI等报道SNPs位点和小样本测序结果选择位点,设计TaqMan荧光探针(美国ABI公司),对FGFR4的4个位点(rs351855,rs641101,rs376618,rs31777)在所有样本及对照中进行基因分型;7.根据每个侯选位点的具体情况,建立可用于大样本基因分型的方法,分析侯选基因调控区功能多态性位点基因型在病例与对照组的频率分布差异,并根据HBV感染等环境暴露进行分层分析,运用非条件Logistic回归分析,检测和探讨侯选基因的多态位点是否影响肿瘤的易感性及可能存在的基因—基因和基因—环境因素间的相互作用,确定相关肿瘤的易感基因和相应的调控区易感多态位点。结果:1.与已有报道不同,中国人群中仅rs351855(Arg388)和rs641101两个位点有不同分型结果,而rs376618,rs31777两个位点在中国人群中均为单一分型;2.两个有分型结果位点均与原发性肝癌的发病无相关性;3.rs351855 C/T基因型与HCC合并大体门静脉癌栓存在负相关;4.rs351855 T/T基因型与HCC合并肝硬化存在负相关;结论:我们成功运用了Taqman基因分型技术,对肝癌相关FGFR4基因的单核苷酸多态性位点进行基因分型,分析其位点与肝癌的发生是否存在相关性。发现FGFR4基因多态性虽不与肝癌发病有关,但可能是影响原发性肝癌合并相关病变的重要遗传因素之一。同时进一步建立原发性肝癌候选基因的筛选检测平台,寻找标志性的多态位点及单体型,阐明其与原发性肝癌发生发展的相关性及意义,并将对今后的个体化医疗起指导性作用。

论文目录

• 英文缩略词表
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• 引言
• FGFR4基因多态性与原发性肝细胞癌遗传易感性研究
• 前言
• 材料和方法
• 实验结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录一 文献综述
• 高通量SNPs基因分型技术
• 胆汁酸代谢相关核受体的研究进展
• 附录二 原发性肝癌患者生活习惯调查表
• 附录三 博士期间参与的工作及形成的论文
• 致谢