论文摘要
重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）是临床上常见的危重急症,近年来其发病率有上升趋势,临床发病凶险、病情进展快、并发症多、预后差、死亡率高。其病因至今不清楚,而且缺乏有效的治疗手段。胃肠功能衰竭是SAP最常见并发症,常发生在其他脏器衰竭之前,既是多系统脏器衰竭（Multiple system organ Failure,MSOF）的一种局部表现,又是引发和加重MSOF的“动力部位”、“扳机因素”。大量临床证据证实及时预防和治疗胃肠功能衰竭,对减少和预防SAP时MSOF发生具有重要意义。微生态制剂近年被逐渐用于研究改善肠,常用的微生态制剂包括益生菌、益生元以及合生元。研究发现其可通过直接补充机体的正常菌群或选择性刺激正常菌群的生长繁殖,从而抑制外源性致病菌和内源性条件致病菌的过度生长和繁殖,防止内源性感染的发生和发展,而且还具有保护肠屏障、促进肠蠕动等功能。但是目前还未见其对SAP肠衰竭方面的研究。本实验旨在研究微生态制剂培菲康（三联活菌制剂）、燕麦β-葡聚糖联合肠内营养对重症急性胰腺炎肠功能衰竭（包括肠屏障和肠吸收及运转功能）的作用。为防治SAP继发感染、降低SAP病死率、改善预后提供新的有效措施;为微生态制剂的临床应用提供理论基础,因此具有重要的理论和实际意义。基于上述思路,本课题主要研究以下3部分:第一部分复制重症急性胰腺炎大鼠动物模型目的:成功建立适用于进行SAP营养治疗研究的大鼠模型,其模型要稳定、可靠、重复性好。方法:20只SD大鼠（体重300±10g）,随机分为假手术组10只,造模组10只。采用胰被膜下均匀注射3.8%牛磺胆酸钠1ml溶液建立SAP大鼠模型。通过对该模型大鼠血清淀粉酶测定,以及通过HE观察其胰腺组织病理学改变来判定SAP模型的成功。结果:模型组大鼠在造模后血清淀粉酶升高,与对照组大鼠有显著性差异。HE染色,胰腺病理损害随时间呈渐进性进展,胰腺组织出现坏死。模型动物在1W内死亡情况稳定,病情渐进性发展,该模型建立成功。结论:SAP大鼠模型制备成功,适用于进行SAP的营养治疗研究,是理想的SAP大鼠动物模型。第二部分微生态制剂联合肠内营养对SAP大鼠肠屏障作用研究目的:探讨肠内营养联合微生态制剂培菲康、燕麦β-葡聚糖及其联合对SAP大鼠肠屏障的保护作用。方法:雄性SD大鼠30只,随机分成对照组,EN组,葡聚糖+EN组,培菲康+EN以及葡聚糖+培菲康+EN组,每组6只。在第7d处死大鼠6前,腹主动脉采血、收集小肠组织,预处理后置于液氮中待检测各项指标。结果:1、血浆内毒素:培菲康+EN组血浆内毒素低于其他组,与单纯EN组及葡聚糖+EN组比较差异有显著性,P＜0.05;而培菲康+葡聚糖+EN、葡聚糖+EN组的内毒素结果与单纯肠内营养比较差异不具有统计学意义;2、二胺氧化酶（DAO）:培菲康+EN组血浆DAO活性低于其他组,与单纯EN比较差异显著,P＜0.05:而培菲康+葡聚糖+EN组的DAO结果与单纯肠内营养比较也有明显改善,差异有统计学意义,P＜0.05;而葡聚糖+EN组对DAO的作用不明显。3、血清TNF-α:与单纯EN组相比,培菲康+EN组TNF-α水平有所降低,差别有统计学意义,P＜0.05;葡聚糖联合EN组虽然较单纯EN组有降低的趋势,但差别无显著性。4、白介素6（IL-6）:与单纯EN组、葡聚糖+EN相相比,培菲康联合EN组IL-6水平有所降低,差别有统计学意义P＜0.05;培菲康+葡聚糖+EN组虽较单纯肠内营养有降低的趋势,但差别无显著性。5、小肠黏膜高度和绒毛厚度:培菲康+EN组、培菲康+葡聚糖+EN组肠黏膜高度,绒毛厚度较EN组明显增高,P＜0.05;培菲康+EN组与葡聚糖+EN组相比也显著改善了肠黏膜高度和绒毛厚度,P＜0.05。6、SAP肠形态学变化:添加培菲康的EN组,肠黏膜可见明显炎症反应,大片绒毛坏死脱落少见,小肠绒毛形态基本完整,部分绒毛变钝,固有层腺体丰富;培菲康联合葡聚糖的EN组肠黏膜高度,绒毛厚度也较单纯肠内营养有所好转,而葡聚糖组肠黏膜组织病理改善不很明显。结论:培菲康联合肠内营养可有效改善SAP大鼠肠微环境,减少有害微生物和细菌内毒素的释放,还具有保护肠屏障功能的作用;而燕麦β-葡聚糖和肠内营养联合给与后,对SAP大鼠肠黏膜屏障功能并没有改善作用。第三部分微生态制剂联合肠内营养对SAP大鼠肠运转及吸收功能的作用研究目的:探讨肠内营养联合微生态制剂培菲康、燕麦β-葡聚糖及其联合对SAP大鼠肠运转及吸收的改善作用。方法:雄性SD大鼠30只,随机分成对照组,EN组,葡聚糖+EN组,培菲康+EN以及葡聚糖+培菲康+EN组,每组6只。在第7d处死前1小时进行D-木糖吸收试验,半小时前给予亚甲基兰1ml灌胃测量胃肠蠕动,收集血清及小肠组织,预处理后置于液氮中待检测各项指标。结果:1、肠转运功能:各SAP组的肠转运系数显著降低;培菲康+EN组显著高于葡聚糖+EN组,差别具有显著性,P＜0.05,与单纯肠内营养组比较有增高的趋势,但是差别无显著性;葡聚糖+EN组和培菲康+葡聚糖+EN组的肠推进比较单纯肠内营养组有所下降,但是无统计学差异。2、血浆D-木糖:模型对照组与其他各组相比,血浆木糖水平显著下降,差别有显著性,P＜0.05;与单纯肠内营养组及葡聚糖+EN组相比,培菲康+EN组、培菲康+葡聚糖+EN组的血浆D-木糖水平显著增高,差别有显著性,P＜0.05;葡聚糖+EN组对木糖的作用不明显,其值较单纯肠内营养组有所下降,但是差异无统计学意义。3、肠ATP酶的检测:模型对照组肠酶活性大部分低于各试验组,差异有统计学意义,P＜0.05;培菲康+EN组肠管Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性高于其他组,与单纯EN组及葡聚糖+EN组相比差异显著,P＜0.05,而该组Mg2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase只对葡聚糖+EN组增高有显著性差异,P＜0.05;其余各组可见肠内营养组肠管酶活性较高,而添加葡聚糖组肠管酶活性普遍降低,但是差异无显著性。4、血浆MTL的检测:模型对照组与单纯肠内营养组及培菲康+EN组相比,血浆胃动素水平显著下降,差别有显著性,P＜0.05;与单纯肠内营养组及葡聚糖+EN组相比,培菲康+EN组的血浆胃动素水平显著增高,差别有显著性,P＜0.05;培菲康+葡聚糖+EN组、葡聚糖+EN组对血浆胃动素水平改善不显著。结论:培菲康联合肠内营养可改善SAP大鼠肠运转,促进肠吸收功能,而燕麦β-葡聚及联用培菲康后,对SAP大鼠肠运转和肠吸收并没有改善作用。
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