狄斯瓦螨（Varroa destructor）在我国的自然种系构成、分布及寄生特性差异的研究

论文摘要

狄斯瓦螨是瓦螨属的一种外寄生性螨类，专性寄生于蜜蜂成蜂及幼虫体上，以其寄主血淋巴为食。狄斯瓦螨分布在全世界各地，西方蜜蜂群几乎100％感染，如不防治，则蜂群1-2年内覆没，目前是危害世界养蜂业最为严重的害虫。要有效地对这一害虫进行防治，首先应弄清楚其分类学地位、地理分布及生物学特性。在前人大量研究的基础之上，我们对我国狄斯瓦螨自然种系构成、分布，以及其对不同寄主之间寄生特性的差异做了很多探索性的研究。其结果如下：对10个省不同地区的16份来自中华蜜蜂群落的狄斯瓦螨样品进行了mtDNA CO1基因序列分析和限制酶切多态性分析。发现我国东南部地区福建、江西、浙江、湖南、安徽五省各地区的中蜂寄生瓦螨样本都属于狄斯瓦螨朝鲜基因型；海南省发现的中蜂寄生瓦螨也属于狄斯瓦螨朝鲜基因型；在我国贵州省采到的中蜂狄斯瓦螨样本经测序鉴定为中国基因型；四川、甘肃中蜂群中发现的大螨都属于狄斯瓦螨中国2基因型；广西省接近越南的地区发现的中蜂螨样本为以前从没发现过的新基因型。对8个省不同地区的16份来自意大利蜂群落的狄斯瓦螨样品进行了mtDNA CO1基因序列分析和限制酶切多态性（AFLP）分析。我国大部分地区的意蜂群中寄生的大蜂螨都属于狄斯瓦螨的朝鲜基因型。但是在江西意蜂场采到的标本中有一只属于狄斯瓦螨的中国2基因型，而其它两只则属于朝鲜基因型。中国2基因型属于中蜂寄生的特有基因型，之前没有报道过在意蜂群中发现中蜂螨。随即我们在广西宁明的意蜂寄生瓦螨中也发现了相似的结果：采到的四只样品中有一只是新发现的基因型，与该地中蜂群中发现的狄斯瓦螨属于相同的类型，另外几只属于狄斯瓦螨的中国1基因型。证明意蜂可以携带中蜂螨。综合以前的研究成果，用地理分析软件分别做出了我国中蜂和意蜂狄斯瓦螨各基因型的分布图。根据地理环境并结合历史事件，对我国最早在浙江一带发现意蜂感染狄斯瓦螨作出合理解释，且推测狄斯瓦螨朝鲜基因型有可能起源于浙江、安徽一带。发现狄斯瓦螨中国2基因型具有很强的环境适应性和便利的传播条件，认为其具有潜在的危险性。尝试性的对4份狄斯瓦螨样本进行了mtDNA 16SrRNA基因片段序列比较，结果其序列完全相同，与GenBank中记录的序列略有不同。认为这段序列进化速度比CO1基因更慢，更适合进行属级以上的分类鉴定，不适合进行种内和近缘种的比较。尝试性地对不同蜜蜂封盖幼虫血淋巴中的氨基酸和营养性矿物质元素含量进行了比较。发现中蜂工蜂幼虫各种氨基酸含量明显高于其他三种幼虫，这与螨对寄主的偏好性正好相反，而中蜂雄蜂中与繁殖相关的矿物质元素含量则明显高与其它三种幼虫，趋势与螨对寄主的偏好呈现正相关。推测不同蜂幼虫血淋巴中营养物质含量的不同与东方蜜蜂的抗螨性相关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 引言
• 1.1 研究背景及国内外研究现状
• 1.1.1 狄斯瓦螨的生物学特性及危害
• 1.1.2 狄斯瓦螨的界定
• 1.1.3 利用线粒体DNA基因序列分析对狄斯瓦螨进行分类界定
• 1.1.4 形态学分类研究
• 1.1.5 我国瓦螨的分类研究及分布状况
• 1.1.6 狄斯瓦螨的防治及相关研究
• 1.2 存在的问题与展望
• 1.3 研究目的与意义
• 第二章 我国中蜂和意蜂寄生狄斯瓦螨的基因型分类及分布
• 2.1 技术路线
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 狄斯瓦螨的采集
• 2.2.2 所用试剂及配制方法
• 2.2.3 大蜂螨总DNA提取方法
• 2.2.4 大蜂螨线粒体CO1基因片段PCR扩增及提纯
• 2.2.5 大蜂螨线粒体CO1基因片段酶切多态性分析（RFLP）
• 2.2.6 大蜂螨线粒体DNA CO1基因片段克隆及测序方案
• 2.3 结果
• 2.3.1 PCR反应
• 2.3.2 限制酶切多态性分析（AFLP）
• 2.3.3 mtDNA CO1基因片段测序结果及基因型鉴定
• 2.4 讨论
• 第三章 狄斯瓦螨流行病学调查
• 3.1 对意蜂群中寄生狄斯瓦螨的流行病学调查及结果
• 3.2 对中蜂群中寄生狄斯瓦螨的流行病学调查及结果
• 3.3 讨论
• 第四章 狄斯瓦螨mtDNA 16S rRNA基因片段多态性初探
• 4.1 实验方法
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 第五章 蜜蜂幼虫血淋巴组分差异对其抗螨特性影响初探
• 5.1 材料及方法
• 5.1.1 蜜蜂幼虫血淋巴的抽提
• 5.1.2 游离氨基酸种类、含量的测定
• 5.1.3 营养性矿物质种类、含量测定
• 5.2 结果与分析
• 5.3 讨论
• 第六章 全文结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历