论文摘要
目的:支气管哮喘（简称哮喘,asthma）是由多种细胞（如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、气道上皮细胞等）和细胞成分参与的气道慢性炎症疾病。它是机体对抗原性或非抗原性刺激引起的一种气管-支气管反应性过度增高的疾病。西医治疗哮喘方面虽然有见效快等方面的优点,但存在药物副作用较大、易复发等问题,而中医在治疗哮喘方面有其独特的优势,因此通过应用中西医结合的方法治疗哮喘,同时研发治疗哮喘的有效方药具有重要的意义。根据小儿哮喘通常具有虚实夹杂的病机特点,导师经过多年的临床研究,依据宣肺化痰、固本平喘的治法,自拟灵麻固本平喘汤（LM）,同时配合西药共同治疗哮喘,疗效显著。为探讨本方的药效及作用机理,我们进行了动物实验。本实验采用致敏法复制大鼠哮喘模型,通过观察灵麻固本平喘汤对哮喘大鼠血中T淋巴细胞、免疫球蛋白及补体、肿瘤坏死因子的影响,从免疫角度探讨灵麻固本平喘汤治疗哮喘大鼠的作用机理,为本方的临床应用提供理论依据。方法:参照崔龙苹等[1]哮喘大鼠模型的造模方法。将50只健康雌雄各半的SD大鼠随机分为5组:正常对照组（简称正常组,normal group）、模型组（model group）、灵麻固本平喘汤组（简称中药组,LM group）、氨茶碱组（简称西药组,Aminophylline group）、中西药结合组（简称结合组,Drugcombination group）,10只/组。模型组、中药组、西药组、结合组分别于第1天、第5天和第8天分3次腹腔皮下注射抗原液致敏,正常组用等量的生理盐水进行致敏。实验第14天开始将造模后大鼠放入自制的不完全封闭的有机玻璃箱内,予1%卵蛋白（OVA）溶液用超声雾化器喷雾激发。正常组用等量的生理盐水进行激发。实验第17天开始,每次雾化吸入激发前半小时给予药物干预,中药组和西药组分别给予灵麻固本平喘汤的混悬液和氨茶碱悬浊液灌胃治疗,结合组给予灵麻和氨茶碱混悬液灌胃治疗,正常组每日给予生理盐水灌胃。实验第25天,在末次激发结束后12小时内,各组大鼠断头取血。分别用流式细胞术检测大鼠外周血中T细胞亚群CD4+、CD8+百分率、CD4+/CD8+比值的变化,用免疫比浊法检测大鼠血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和补体（C3、C4）,用双抗体夹心ELISA法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）。并取左肺组织固定后切片,常规HE染色制作病理切片,在光镜下观察各组大鼠肺组织的形态学变化。结果:1 LM对哮喘大鼠肺组织病理形态学的影响正常组:支气管、肺泡组织结构正常。模型组:细、小支气管的管壁和伴行动脉周围有较多嗜酸细胞和淋巴细胞浸润,支气管粘膜皱壁增多延长,杯状细胞增生明显。中药组及西药组:轻到中度炎性细胞浸润,仍以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润为主;支气管粘膜上皮有轻到中度损伤,杯状细胞增生不明显。结合组:炎症明显好转,支气管管腔内及血管周围可见轻度炎性细胞浸润,偶见少许嗜酸性粒细胞浸润;支气管粘膜上皮基本完整。2 LM对哮喘大鼠外周血T细胞亚群的影响与正常组比较:模型组CD4+均明显上升（P<0.01）,CD8+均明显下降（P<0.01）,CD4+/CD8+比值显著性上升（P<0.01）。与模型组比较:各治疗组CD4+均明显下降（P<0.01或P< 0.05）,CD8+均明显上升（P<0.01或P<0.05）,CD4+/CD8+比值明显下降,有显著性差异（P<0.01或P<0.05）。其中结合组CD4+较中药组、西药组呈显著性降低（P<0.05）,CD8+呈显著性升高（P<0.05）,CD4+/CD8+比值呈显著性降低（P<0.05）。3 LM对哮喘大鼠血清免疫球蛋白及补体的影响与正常组比较:模型组大鼠血清中IgG的含量均明显增高（P<0.01）,IgA、补体C3、C4的含量均明显下降（P<0.01）,IgM的含量无明显变化（P>0.05）。与模型组比较:各治疗组大鼠血清中IgG的含量均显著下降（P<0.01或P<0.05）,IgA、补体C3、C4的含量均显著上升（P<0.01或P<0.05）,IgM的含量无明显变化（P>0.05）。其中结合组血清中IgG的含量较中药组、西药组呈显著性降低（P<0.05）;IgA、补体C3、C4的含量呈显著性升高（P<0.05）。4 LM对哮喘大鼠血清肿瘤坏死因子的影响与正常组比较:模型组大鼠血清中TNF-α的含量均明显增高（P<0.01）。与模型组比较:各治疗组大鼠血清中TNF-α的含量均显著下降（P<0.01或P<0.05）。其中结合组血清中TNF-α的含量较中药组、西药组呈显著性降低（P<0.05）。结论:1 LM能有效调整CD4+/CD8+比值,降低IgG、TNF-α含量,升高IgA、补体水平,从而起到抗气道炎症和免疫调节的作用。2 LM能明显改善哮喘大鼠肺组织的损伤。
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