论文摘要
目的意义:唐氏综合征是活产胎儿中最常见的染色体异常综合征之一,其发病率约为650～1000分之一。患儿通常具有严重的智力发育迟缓和特别明显的组织器官畸形。目前其临床诊断和产前诊断通常采用外周血淋巴细胞和羊水中胎儿细胞培养后的染色体显带检查,该方法耗时长、劳动强度大、通量低。本研究的目的在于建立唐氏综合征基因诊断和产前诊断的双色荧光定量PCR新技术,以实现快速、简便、高通量检测这一发病高、危害大的染色体异常综合征;并应用荧光原位杂交技术检测外周血淋巴细胞和羊水中胎儿细胞培养后的染色体铺片,探索应用荧光原位杂交技术检测唐氏综合征的可能性;用两者的结果相互印证和比较两者各自的优缺点。 方法:提取42例正常人和27例唐氏综合征患者的外周血淋巴细胞和羊水中胎儿细胞DNA;设计合成含两种荧光素的DSCR1和GAPD基因特异的TaqMan探针,然后优化PCR反应条件,在同一个反应管中同时进行DSCR1基因和看家基因GAPD的Q-PCR反应,并使得两者的反应效率基本一致,每个样本重复三次,比较正常人群和患者群体两个基因的ΔCT的变异范围,对两组人的ΔCT做统计学分析,观察两者的ΔCT均值是否有统计学意义。用荧光间接标记的人的DSCR1基因的部分序列与染色体进