脐带间充质干细胞的内皮分化及其与骨髓间充质干细胞的对比研究

论文摘要

间充质干细胞（MSCs）作为组织工程的种子细胞具有良好的应用前景。而通过组织工程得到的新生组织的新血管生成越来越成为制约组织工程发展的关键因素。在本次研究中,由脐带沃顿胶质组织（Wharton’s Jelly）分离所得的间充质干细胞（UCMSCs）经内皮细胞分化诱导后可分化成内皮细胞,并首次就其内皮分化能力与骨髓来源间充质干细胞（BMMSCs）进行了较为全面的比较。UCMSCs与BMMSCs具有相似的梭形成纤维细胞状的细胞形态,流式细胞术分析表明二者均表达典型间充质干细胞标志物且表达水平相当,且碱性磷酸酶活性染色和Von Kossa染色表明二者均具有类似的以成骨分化为典型代表的多向分化能力。然而,UCMSCs比BMMSCs具有更快的增殖速度和更强的增殖能力。经内皮分化诱导后,免疫荧光细胞化学分析和实时定量聚合酶链式反应（Real-Time PCR）分析均表明UCMSCs比BMMSCs表达更高水平的三种内皮细胞特征性标志蛋白;微血管生成能力的检测也表明UCMSCs比BMMSCs具有更强的微血管生成能力;低密度脂蛋白吸收能力的检测表明二者具有相似的低密度脂蛋白吸收能力。以上结果表明脐带间充质干细胞（UCMSCs）比骨髓来源间充质干细胞（BMMSCs）具有更强的内皮细胞分化能力。另外,与骨髓来源间充质干细胞（BMMSCs）相比,由于脐带间充质干细胞（UCMSCs）来源于免疫系统尚未发育完善的新生儿脐带,所以UCMSCs作为组织工程的种子细胞在进行移植后引起免疫排斥机率相对较小,而且由于脐带传统上作为医疗废弃物,所以脐带间充质干细胞（UCMSCs）的来源也具有易获得性。以上这些数据表明,与骨髓来源间充质干细胞（BMMSCs）相比,脐带沃顿胶组织（Wharton’s Jelly）来源的间充质干细胞（UCMSCs）可以成为组织工程中新血管形成及血管损伤相关疾病的治疗中的更理想的细胞来源的选择。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 前言
• 1.1 间充质干细胞（MSCs）概述
• 1.1.1 MSCs 的介绍
• 1.1.2 MSCs 的来源与研究历史
• 1.1.3 MSCs 的鉴定
• 1.1.4 MSCs 多向分化潜能的研究进展
• 1.2 脐带来源的间充质干细胞（UCMSCs）概述
• 1.2.1 脐带沃顿胶组织（Wharton’s Jelly）的介绍
• 1.2.2 UCMSCs 的来源与研究历史
• 1.2.3 UCMSCs 相对于BMMSCs 的移植优势
• 1.3 MSCs 内皮分化的意义与研究进展
• 1.3.1 MSCs 内皮分化的意义
• 1.3.2 MSCs 内皮分化的研究进展
• 1.4 选题的创新性、目的及其意义
• 第2章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 标本来源
• 2.1.2 实验试剂
• 2.1.3 实验溶液及配制
• 2.1.4 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 UCMSCs 与BMMSCs 的分离与培养
• 2.2.2 UCMSCs 与BMMSCs 的FACS 鉴定
• 2.2.3 UCMSCs 与BMMSCs 成骨分化潜能的鉴定
• 2.2.4 UCMSCs 与BMMSCs 增殖能力的比较
• 2.2.5 UCMSCs 与BMMSCs 的内皮分化
• 2.2.6 免疫荧光技术鉴定内皮分化
• 2.2.7 Real Time- PCR 技术鉴定内皮分化
• 2.2.8 微血管形成能力鉴定内皮分化
• 2.2.9 低密度脂蛋白吸收能力鉴定内皮分化
• 第3章 结果及讨论
• 3.1 UCMSCs 与BMMSCs 特征的比较
• 3.1.1 UCMSCs 与BMMSCs 的形态及比较
• 3.1.2 UCMSCs 与BMMSCs 的FACS 鉴定
• 3.1.3 UCMSCs 与BMMSCs 成骨分化潜能的鉴定
• 3.1.4 UCMSCs 与BMMSCs 增殖能力的比较
• 3.2 UCMSCs 与BMMSCs 的内皮分化的鉴定与比较
• 3.2.1 免疫荧光技术检测内皮细胞特异性蛋白的表达
• 3.2.2 Real Time- PCR 检测内皮细胞特异性基因的表达
• 3.2.3 微血管形成能力鉴定内皮分化
• 3.2.4 低密度脂蛋白吸收能力鉴定内皮分化
• 3.3 讨论与小结
• 第4章 结语
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历和在学期间发表论文情况